目的研究微小RNA-124(miR-124)對(duì)阿霉素誘導(dǎo)的心肌毒性的影響以及潛在機(jī)制。方法建立阿霉素誘導(dǎo)的C57BL/6小鼠和乳小鼠心肌細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷模型,采用Western blot檢測(cè)Src同源2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1(p66Shc)蛋白表達(dá)水平。轉(zhuǎn)染miR-124 mimic、inhibitor后觀察阿霉素處理心肌細(xì)胞活性氧(ROS)水平,比色法檢測(cè)總超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)的含量,Western blot檢測(cè)Caspase-3和p66Shc的蛋白表達(dá),使用熒光素酶報(bào)告基因方法驗(yàn)證miR-124與p66Shc蛋白之間的結(jié)合作用。結(jié)果阿霉素引起心肌p66Shc蛋白表達(dá)升高(P<0.05)。過(guò)表達(dá)miR-124可減輕阿霉素引起的心肌細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷,表現(xiàn)為ROS和MDA含量減少、SOD活性升高、Caspase-3和p66Shc的蛋白表達(dá)降低(P<0.05)。miR-124與p66Shc存在直接的結(jié)合作用。結(jié)論 miR-124通過(guò)抑制p66Shc蛋白表達(dá)而對(duì)阿霉素誘導(dǎo)的心肌氧化應(yīng)激損傷起保護(hù)作用。

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【文章目錄】：
材料與方法
    一、材料
        1.動(dòng)物
        2.主要試劑
    二、方法
        1.阿霉素處理小鼠心肌氧化應(yīng)激損傷模型的建立
        2.細(xì)胞培養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)分組
        3.細(xì)胞內(nèi)ROS含量檢測(cè)
        4.MDA含量、SOD活性檢測(cè)
        5.Western blot檢測(cè)蛋白表達(dá)
        6.熒光素酶檢測(cè)
    三、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié) 果
    一、不同阿霉素給藥次數(shù)對(duì)小鼠心肌組織中p66Shc蛋白表達(dá)的影響
    二、不同濃度的阿霉素處理后對(duì)小鼠心肌細(xì)胞中p66Shc蛋白表達(dá)的影響
    三、干涉miR-124的表達(dá)可有效影響阿霉素所致的心肌細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷
    四、干涉miR-124的表達(dá)對(duì)阿霉素處理后心肌細(xì)胞內(nèi)p66Shc表達(dá)的影響
    五、p66Shc是miR-124的直接作用靶點(diǎn)
討 論



本文編號(hào)：4049757