研究背景:乳腺癌對(duì)于我國(guó)女性來(lái)說(shuō)是很大的威脅,每年新生和死亡人數(shù)分別占世界的12.2%和9.6%。隨著醫(yī)學(xué)科學(xué)的發(fā)展,乳腺癌的診治已經(jīng)有了比較大的進(jìn)步,獲得了很高的治愈率和生存率。但是乳腺癌患者仍然有高復(fù)發(fā)率和轉(zhuǎn)移率。乳腺癌的內(nèi)科治療包括化療、內(nèi)分泌治療和靶向治療。近幾年來(lái),乳腺癌靶向治療已成為臨床研究的熱點(diǎn)話題,其臨床應(yīng)用明顯提高了乳腺癌的診療效果。已經(jīng)針對(duì)不同的乳腺癌亞型開(kāi)發(fā)了越來(lái)越多的靶向療法。這些藥物的臨床應(yīng)用改善了乳腺癌的治療效果,并不斷改變?nèi)橄侔┑呐R床實(shí)踐過(guò)程。如何克服癌癥的耐藥性,開(kāi)發(fā)出能夠超越傳統(tǒng)靶向藥物療效的新藥,是未來(lái)的重要研究方向。MYC是一個(gè)強(qiáng)大的原癌基因,原發(fā)于Burkitt淋巴瘤t(8;14)(q24;q32)染色體中發(fā)現(xiàn)。MYC是螺旋亮氨酸拉鏈家族成員,和它的其他家族成員N-MYC、L-MY C一樣,都是轉(zhuǎn)錄因子。MYC是以核定位序列,螺旋-環(huán)-螺旋二聚區(qū)域,DNA結(jié)合區(qū)域和轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)區(qū)域?yàn)榛A(chǔ)發(fā)揮其功能作用。正常細(xì)胞中,MYC原癌基因在轉(zhuǎn)錄水平、轉(zhuǎn)錄后水平、細(xì)胞周期檢驗(yàn)點(diǎn)和染色體有絲分裂中嚴(yán)格受多種調(diào)控機(jī)制和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路等調(diào)控。這些嚴(yán)格調(diào)控機(jī)制使細(xì)胞不能發(fā)生...

【文章頁(yè)數(shù)】：99 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
第一部分 MYC在乳腺癌組織中的表達(dá)及其臨床意義
    1.實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
        1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑及制備
    2.實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 組織樣本的收集
        2.2 石蠟標(biāo)本的制備
        2.3 組織切片的蘇木精-伊紅染色(HE染色)
        2.4 免疫組織化學(xué)技術(shù)(IHC)檢測(cè)組織中MYC表達(dá)水平
        2.5 隨訪
        2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3.結(jié)果
        3.1 MYC蛋白在乳腺癌組織、癌旁正常組織中的表達(dá)
        3.2 MYC陽(yáng)性表達(dá)與乳腺癌臨床病理特征的關(guān)系
        3.3 MYC陽(yáng)性表達(dá)與乳腺癌預(yù)后的關(guān)系
    4.討論
第二部分 MYC對(duì)p53缺失的乳腺癌細(xì)胞增殖和凋亡的影響
    1.實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
        1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        1.3 主要實(shí)驗(yàn)試劑配制
    2.實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)方法
        2.2 慢病毒轉(zhuǎn)染及效率測(cè)定
        2.3 RT-PCR檢測(cè)mRNA表達(dá)
        2.4 Western blot法檢測(cè)蛋白表達(dá)
        2.5 克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖
        2.6 MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖能力
        2.7 TUNEL法分析細(xì)胞凋亡
        2.8 流式細(xì)胞儀法檢測(cè)細(xì)胞凋亡
        2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3.結(jié)果
        3.1 MYC野生型與突變型(T58A)轉(zhuǎn)染后轉(zhuǎn)染效率測(cè)定
        3.2 MYC野生型與突變型(T58A)對(duì)細(xì)胞增殖的影響
        3.3 MYC野生型與突變型(T58A)對(duì)細(xì)胞凋亡的影響
        3.4 MYC野生型與突變型(T58A)轉(zhuǎn)染后各相關(guān)凋亡蛋白表達(dá)
        3.5 MYC野生型與突變型(T58A)轉(zhuǎn)染后Bim的表達(dá)
    4.討論
第三部分 分析MYC在p53缺失情況下對(duì)Bim的調(diào)控作用
    1.實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
        1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑及制備
    2.實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 慢病毒轉(zhuǎn)染
        2.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3.結(jié)果
        3.1 轉(zhuǎn)染后p21和Bim的表達(dá)
        3.2 干擾p21后對(duì)細(xì)胞增殖和凋亡的影響
        3.3 轉(zhuǎn)染后p14和Bim的表達(dá)
        3.4 干擾p14后對(duì)細(xì)胞增殖和凋亡的影響
    4.討論
參考文獻(xiàn)
結(jié)論
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
致謝



本文編號(hào)：4047984