發(fā)布時間：2025-05-27 05:12

　　在世界范圍內(nèi),缺血性腦卒中逐漸成為了威脅人類生命健康的一大疾病,且臨床上針對該疾病的治療手段仍十分有限。近年來,圍繞delta阿片受體(delta opioid receptor,DOR)對腦缺血的神經(jīng)保護作用日益受到研究者的關(guān)注。本實驗室前期研究結(jié)果表明,用[d-Ala2,d-Leu5]腦啡肽(DADLE,DOR激動劑)激活DOR可以顯著減輕腦缺血損傷,對腦缺血引起的認知損傷有明顯改善作用。此外,DOR活化可以改善腦缺血3天后神經(jīng)元存活,促進星形膠質(zhì)細胞活化,減少受損的星形膠質(zhì)細胞。然而,DADLE激活DOR促進缺血神經(jīng)元存活的具體機制卻并不清楚。我們在體外研究中關(guān)注到,DADLE激活DOR通過促進自噬可以顯著減輕星形膠質(zhì)細胞糖氧剝奪(oxygen glucose deprivation,OGD)損傷。而近年來的研究報道均表明,自噬在腦缺血損傷中發(fā)揮重要的作用。其中,自噬啟動相關(guān)的Unc-51樣激酶(UNC-51 like kinase 1,ULK1)主要受到腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)和哺乳動物雷帕霉素靶蛋白(mammali...

【文章頁數(shù)】：130 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖1.2自噬過程和調(diào)控示意圖[50]。營養(yǎng)不足、饑餓或缺血應(yīng)激等情況會誘導(dǎo)自噬發(fā)生。Atg1復(fù)合物由ULK1、FIP200、Atg13和Atg101組成,受到上游信號調(diào)控啟動自噬。隨后,Atg1復(fù)合物激活由Beclin-1,Atg14,VSP15和VSP34組成的III類PI3K復(fù)合物,從而觸發(fā)自噬小體成核和膜形成過程。隨著Atg16L1和LC3-II參與膜伸長和融合,形成自噬小體。自噬小體與溶酶體融合形成自噬溶酶體,降解其中內(nèi)容物,完成自噬過程。在營養(yǎng)豐富、生長因子和胰島素信號的情況下,觸發(fā)PI3K/Akt/mTORC1信號通路,抑制Atg1復(fù)合物的形成。

在哺乳動物細胞中,Unc-51樣激酶(UNC-51likekinase1,ULK1)(酵母中為Atg1)、Atg13和FIP200形成ULK1蛋白激酶復(fù)合物,負責自噬的啟動過程。Beclin-1(酵母中為Atg6)、液泡蛋白分選蛋白34(VPS34)和液泡蛋白分選蛋白15(....

圖1.3 AMPK在腦缺血中的作用[93]。(A)AMPK抑制腦缺血損傷后的神經(jīng)炎癥。(B)AMPK減輕腦缺血損傷引起的氧化應(yīng)激。(C)AMPK促進自噬減輕腦缺血損傷。(D)AMPK抑制谷氨酸釋放,減輕興奮性毒性。(E)AMPK改善腦缺血損傷引起的線粒體功能障礙。(F)AMPK抑制腦缺血損傷后的細胞凋亡。簡而言之,AMPK通過調(diào)節(jié)上述機制幫助維持細胞能量穩(wěn)態(tài)。

AMPK是生物能量代謝調(diào)節(jié)的關(guān)鍵分子,被稱為“細胞能量感受器”[92]。同時,AMPK作為自噬的上游調(diào)控因子,通過對ULK1磷酸化影響下游自噬[59]。近年來隨著研究深入,AMPK在腦缺血損傷中的神經(jīng)保護作用逐漸明確起來。除了AMPK介導(dǎo)自噬之外,激活A(yù)MPK可以通過多種機制來減....

圖1.4 DOR結(jié)構(gòu)示意圖[120]。DOR(橙色)包括一個細胞外氨基端區(qū)域,七個跨膜結(jié)構(gòu)域以及一個細胞內(nèi)羥基端區(qū)域。

阿片受體是一類抑制性G蛋白偶聯(lián)受體,其配體為阿片類物質(zhì)[116]。內(nèi)源性阿片樣物質(zhì)包括強啡肽,腦啡肽,內(nèi)啡肽,內(nèi)嗎啡肽和痛敏肽。阿片受體主要由3種亞型組成,即μ、κ、δ阿片受體(MOR,KOR,DOR)。阿片受體分布廣泛,包括大腦、脊髓、外周神經(jīng)元和消化道。除鎮(zhèn)痛和成癮外,阿片受....

圖2.1動物實驗簡要流程示意圖,包括側(cè)腦室埋管、四血管阻斷、給藥和取樣。

實驗動物手術(shù)以及操作的簡要流程參見圖2.1。3.4.腦組織切片制備

本文編號：4047568