【摘要】：目的觀(guān)察肌肽對(duì)2型糖尿病大鼠認(rèn)知功能障礙、海馬組織神經(jīng)元的影響、海馬中氧化應(yīng)激及NF-κB信號(hào)通路的影響。方法50只雄性SD大鼠,隨機(jī)選取其中8只普通飼料喂養(yǎng)設(shè)為對(duì)照組(Con),其他42只大鼠高糖高脂喂養(yǎng)并腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)30 mg·kg~(-1)建立T2DM模型。建模成功后,大鼠隨機(jī)分為2型糖尿病組、肌肽(100、300、900 mg·kg~(-1))組。低、中、高劑量肌肽組大鼠分別灌胃100、300、900 mg·kg~(-1)·d~(-1);對(duì)照組和T2DM組給予相同體積的蒸餾水。在水迷宮實(shí)驗(yàn)期間,繼續(xù)灌胃CAR。定期測(cè)量大鼠血糖及體重;灌服CAR51d后,進(jìn)行Morris水迷宮測(cè)試;HE染色觀(guān)察海馬CA1區(qū)神經(jīng)元病理學(xué)變化;免疫組化檢測(cè)NF-κB p65蛋白表達(dá);試劑盒法檢測(cè)海馬中的丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性;高效液相色譜法(HPLC)檢測(cè)海馬中谷胱甘肽(GSH)和肌肽含量;免疫印跡實(shí)驗(yàn)檢測(cè)海馬組織中胞漿TNF-α、IL-1β及胞核NF-κB p65表達(dá)。結(jié)果與對(duì)照組相比,T2DM模型組的大鼠(1)血糖升高,體重減輕;(2)水迷宮實(shí)驗(yàn)中,大鼠出現(xiàn)認(rèn)知功能障礙,表現(xiàn)為逃避潛伏期明顯延長(zhǎng)(P0.01),大鼠穿越平臺(tái)次數(shù)明顯降低(P0.01);(3)大鼠海馬神經(jīng)元排列紊亂且稀疏,細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則或紡錘形,核凝聚;(4)大鼠海馬NF-κB p65陽(yáng)性細(xì)胞增多(P0.01);(5)大鼠海馬組織SOD活性下降,MDA含量提高;(6)大鼠海馬中GSH和肌肽含量顯著下降;(7)大鼠海馬細(xì)胞核NF-κB p65蛋白的表達(dá)水平明顯升高,胞漿TNF-α、IL-1β蛋白的表達(dá)水平升高。與T2DM模型組相比,(1)CAR組大鼠體重相對(duì)增加,血糖無(wú)明顯變化;(2)CAR組明顯縮短大鼠逃避潛伏期(P0.01),增加穿越平臺(tái)次數(shù)(P0.01);(3)CAR組的大鼠海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞排列較整齊,形態(tài)較完整,并對(duì)神經(jīng)元有一定改善作用;(4)CAR組的大鼠海馬NF-κB p65陽(yáng)性細(xì)胞明顯減少(P0.01或P0.05);(5)CAR組大鼠海馬組織SOD活性提升,MDA含量下降;(6)CAR組大鼠海馬中GSH和肌肽含量顯著上升;(7)CAR組明顯降低大鼠海馬NF-κB p65蛋白向核內(nèi)轉(zhuǎn)移,并下調(diào)TNF-α、IL-1β蛋白的表達(dá)。結(jié)論2型糖尿病可以引起大鼠海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)異常,海馬部位處于氧化應(yīng)激失衡狀態(tài),局部炎癥因子TNF-α、IL-1β過(guò)度表達(dá),從而導(dǎo)致認(rèn)知功能障礙,而肌肽可以改善T2DM大鼠認(rèn)知功能障礙,其機(jī)制可能與抑制海馬氧化應(yīng)激反應(yīng),并減少NF-κB p65向核內(nèi)轉(zhuǎn)移,下調(diào)TNF-α、IL-1β的表達(dá)有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：錦州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：R965;Q51
【圖文】：

17（二）空間探索實(shí)驗(yàn)結(jié)果第56天撤掉平臺(tái)之后，觀(guān)察大鼠60s內(nèi)穿越目標(biāo)平臺(tái)的次數(shù)。見(jiàn)圖2-1(B)，與Con組相比，T2DM組的大鼠在60s內(nèi)明顯降低(P<0.01)。與T2DM組比較，CAR100組、CAR300組、CAR900組的明顯增加穿越目標(biāo)平臺(tái)次數(shù)(P<0.01或P<0.05)且呈劑量依賴(lài)性，表明肌肽可以緩解學(xué)習(xí)記憶的損傷。圖2-1 各組大鼠逃避潛伏期（A）和穿越平臺(tái)次數(shù)（B）(x_±s，n=8)Fig.2-1 Rat escape latency (A) and number of crossing platform (B) in each group注：##P＜0.01 vs Con組；*P＜0

**P＜0.01 vs T2DM組圖2-2 肌肽對(duì)2型糖尿病大鼠Morris水迷宮游泳運(yùn)動(dòng)軌跡的影響Fig 2-2 Effect of Carnosine on swimming trajectory of Morris water maze in type 2 diabeticrats

CAR 劑量組的大鼠海馬 CA1 區(qū)病理改變明顯減輕，其椎體細(xì)胞排列較整齊，形態(tài)較完整，并對(duì)神經(jīng)元有一定改善作用，以 CAR900 組病理改善效果最好。圖3 各組海馬HE染色結(jié)果Fig.3 The results of HE stain of hippocampus in each group注：A：Con，對(duì)照組; B：T2DM，2型糖尿病組; C：CAR 100（mg·kg-1）+T2DM組; CAR 300（mg·kg-1）+T2DM組; CAR 900（mg·kg-1）+T2DM組。四、肌肽對(duì)2型糖尿病大鼠海馬中NF-κB p65結(jié)果的影響活化的NF-κB p65 陽(yáng)性細(xì)胞胞漿呈棕黃色。光學(xué)顯微鏡下觀(guān)察可見(jiàn)Con組大鼠海馬少量NF-κB p65陽(yáng)性細(xì)胞胞漿呈棕黃色。與Con組相比較，T2DM組NF-κB p65陽(yáng)性細(xì)胞增多(P<0.01)。與T2DM組相比較，CAR劑量組NF-κB p65陽(yáng)性細(xì)胞明顯減少(P<0.01或P<0.05)。

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2764145