發(fā)布時間：2017-03-20 03:03

  本文關鍵詞：黃河三角洲來源的耐鹽堿放線菌OUCMDZ-2399的抗生活性產物研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：微生物的多樣性為新化合物的多樣性提供了堅實的基礎,也為生物化學的革新提供豐富的資源。目前有超過23,000個已知的天然來源化合物,其中42%來自于放線菌。在將近10,000個抗生素類天然產物中,就有45-55%來自于鏈霉菌的次級代謝產物。而最近的統(tǒng)計數據表明我們發(fā)現的微生物中,真菌僅占全部生物量的5%,細菌(包含放線菌)還不足0.1%。黃河三角洲是長期的海陸相互作用形成的具有復雜生態(tài)環(huán)境的地域,土壤鹽堿化,部分地區(qū)鹽度頗高。在兼具海陸特性的土壤中,土著的生物物種包括微生物都形成了較為獨特的代謝方式,產生新穎的活性代謝產物�；谝陨涎芯楷F狀,這一區(qū)域的放線菌具有潛在研究價值。為研究該來源的具有耐鹽堿特性的菌株次級代謝產物,我們使用化學特征與生物活性集成的篩選模式,同時追蹤生物活性,對該地區(qū)的微生物進行了研究。主要內容包括：耐鹽堿微生物的分離純化,耐鹽堿放線菌的生物化學篩選以及發(fā)酵條件優(yōu)化；優(yōu)選符合條件的放線菌進行發(fā)酵并分離純化代謝產物；化合物的結構鑒定以及活性評價。從黃河三角洲土壤樣品中分離純化獲得86株微生物,排重后余66株,包括47株放線菌和19株真菌。通過化學和活性雙重標準的篩選,得到兩株活性優(yōu)良的耐鹽堿放線菌OUCMDZ-2399和OUCMDZ-2407。通過從培養(yǎng)基、樹脂、pH、鹽度四個方面摸索放線菌的最佳生長條件,確定發(fā)酵OUCMDZ-2399。發(fā)酵完畢后對其次級代謝產物采用加壓正向硅膠柱色譜、減壓硅膠柱色譜、薄層色譜、凝膠柱色譜和半制備高效液相色譜等多種色譜分離技術進行分離純化,每次純化完畢后都進行定性的生物活性測試,以追蹤活性化合物所在的流分,最終從OUCMDZ-2399中獲得7個化合物,目前已鑒定其中3個。已鑒定的化合物均為Lobophorins化合物,結構上屬于4-羥乙酰乙酸內酯(tetronate)化合物。利用藥敏紙片法和微量比濁法對化合物進行抑菌活性評價,確定化合物對金黃色葡萄球菌的MIC等于甚至低于陽性藥環(huán)丙沙星,對于枯草芽孢桿菌也有較好的抑制活性。其后采用MTT法和CCK-8法對化合物進行細胞毒活性測試,基本上對于A549、 K562、 MCF-7以及HL-60均無抑制作用。綜上所述,本文結合化學與生物活性集成篩選模式得到一株耐鹽堿放線菌,并對其進行次級代謝產物的研究,分離鑒定了3個化合物,并對其進行抑菌和細胞毒的初步評價。以上結果表明黃河三角洲中確實有很大生物及化學的挖掘潛質,放線菌一如既往表現出出色的研究潛力。
【關鍵詞】：耐鹽堿放線菌 黃河三角洲 次級代謝產物 抑菌活性 Lobophorins
【學位授予單位】：中國海洋大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R915
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• Abbreviation10-12
• 前言12-34
• 1 Tetronates化合物的結構12-16
• 2 Lobophorins化合物的活性16-19
• 3 Lobophorins化合物的生物合成19-25
• 4 Lobophorins化合物的全合成25-30
• 小結30-31
• References31-34
• 第一章 耐鹽堿菌株的分離及篩選34-65
• 1.1 微生物的分離純化34-38
• 1.2 菌株的排重及保藏38-42
• 1.3 次級代謝產物活性篩選42-50
• 1.4 候選菌株發(fā)酵條件的摸索50-63
• References63-65
• 第二章 耐鹽堿放線菌OUCMDZ-2399抑菌活性產物研究65-85
• 2.1 菌株發(fā)酵及化合物分離65-72
• 2.2 化合物結構鑒定72-81
• 2.3 化合物結構表征81
• 2.4 化合物的活性評價81-83
• 2.5 小結與討論83-84
• Reference84-85
• 第三章 實驗部分85-94
• 3.1 實驗材料、試劑及儀器85-89
• 3.2 試驗方法89-93
• References93-94
• 結語與創(chuàng)新點94-95
• 個人簡歷及相關研究成果95
• 相關研究成果95-96
• 致謝96-97
• 附錄97-104

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1 楊燁;王e，

本文編號：257024