本文關鍵詞：廣西巴馬居民SIRT6、FOXO3A基因甲基化水平研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:了解廣西巴馬SIRT6、FOXO3A基因啟動子區(qū)甲基化水平,結合前期基因m RNA、蛋白表達的結果,探討這兩個基因甲基化水平與巴馬長壽現(xiàn)象的關系,一步探索巴馬長壽機制提供理論依據(jù)。方法:2011年5月在廣西巴馬瑤族自治縣現(xiàn)場收集樣本,依據(jù)長壽家族史的定義,將收集到的具有長壽家族史的健康居民129例設壽家族史組,根據(jù)是否是長壽老人進一步分壽組(42例)和后代組(87例);無長壽家族史的健康居民86例設漢無長壽家族史組。采集研究人群外周血樣,提取基因組DNA,應用焦磷酸測序方法檢測SIRT6、FOXO3A基因的啟動子區(qū)甲基化水平。結合課題組前期研究的m RNA、蛋白表達結果,采用卡方檢驗比較研究對象基本資料,秩和檢驗比較各組基因的甲基化水平,t檢驗、卡方檢驗比較各組m RNA、蛋白表達水平,logistic回歸分析甲基化水平與長壽的關系,spearman相關分析甲基化率與年齡、m RNA和蛋白表達的關系,多重線性回歸分析甲基化率與吸煙、飲酒的關系。結果:1、研究對象基本資料:研究對象共215人,長壽家族史組129人,非長壽家族史組86人。兩組研究人群性別間差異無統(tǒng)計學意義(P0.05),年齡間差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),長壽家族史組比無長壽家族史組高。長壽家族史組和無長壽家族史組的吸煙比例分別漢24.0%和27.9%,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);長壽家族史組和無長壽家族史組的飲酒比例分別漢69.0%和65.1%,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。2、甲基化水平及m RNA、蛋白水平的比較:長壽家族史組和無長壽家族史組SIRT6基因各Cp G位點甲基化水平的組間比較,p2和p5兩個位點差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05),長壽家族史組比無長壽家族史組低;長壽家族史組m RNA表達比無長壽家族史組高(P0.05);蛋白間比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。長壽家族史組分壽組和后代組后,p2和p5三組間差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05),長壽組和后代組p2位點甲基化水平均比無長壽家族史組低,后代組p5位點甲基化水平比無長壽家族史組低,其他位點組間比較差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05);后代組m RNA表達比長壽組和無長壽家族史組高;蛋白表達由高到低則是長壽組、無長壽家族史組和后代組。FOXO3A基因各Cp G位點甲基化水平在長壽家族史組和無長壽家族史組間的比較顯示,p3和p5位點間差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),其中長壽家族史組在p3位點中的甲基化水平比無長壽家族史組低,在p5位點中比無長壽家族史組高;長壽家族史組m RNA表達比無長壽家族史組高(P0.05);蛋白表達無統(tǒng)計學差異(P0.05)。長壽家族史組分壽組和后代組后p3、p4和p5位點間甲基化水平差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),后代組在p3、p4位點甲基化水平比無長壽家族史組低,長壽組p5位點的甲基化水平則比無長壽家族史高;后代組m RNA表達水平比長壽組和無長壽家族史組高;蛋白水平由高到低是長壽組、無長壽家族史組和后代組。3、各甲基化位點的logistic回歸分析:經(jīng)Logistic回歸分析,調整性別、年齡、吸煙和飲酒等因素的影響后,SIRT6基因各Cp G位點對長壽影響的結果顯示,p2和p5位點是長壽的保護因素,p2、p5的OR值和95%CI分別是0.411(0.218~0.775)、0.834(0.708~0.983)。FOXO3A基因的p3顯示是長壽的保護因素,其具體OR值和95%CI是0.808(0.699~0.934),其他位點無顯示與長壽有關(P0.05)。4、基因位點與m RNA、蛋白表達的相關性:結合前期研究的m RNA、蛋白表達的數(shù)據(jù),p2、p5和pm與m RNA表達負相關(P0.05),p4、p5及pm與蛋白表達正相關(P0.05)。p1、p2、p4和pm與m RNA表達負相關(P0.05),p4和pm與蛋白表達正相關。5、SIRT6、FOXO3A基因甲基化水平與吸煙、飲酒的關系:SIRT6基因p3位點與吸煙有關(P0.05),其他位點與吸煙、飲酒均無關(P0.05)。FOXO3A基因所有位點甲基化水平與吸煙、飲酒均無關(P0.05)。結論:1、SIRT6、FOXO3A基因啟動區(qū)部分位點甲基化水平可能與廣西巴馬長壽現(xiàn)象有關,其低甲基化水平可能是巴馬長壽的有利因素。2、廣西巴馬SIRT6、FOXO3A基因不同的Cp G位點甲基化水平與年齡的相關性不同,部分位點與m RNA表達水平負相關,與蛋白表達水平正相關。3、廣西巴馬SIRT6、FOXO3A基因甲基化水平受吸煙、飲酒影響不大。
【關鍵詞】：巴馬 長壽 SIRT6 FOXO3A 甲基化
【學位授予單位】：廣西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R394
【目錄】：

• 摘要5-8
• ABSTRACT8-12
• 前言12-16
• 1 料與方法16-25
• 1.1 研究對象及分組16
• 1.2 主要儀器與試劑16-17
• 1.3 實驗方法17-25
• 1.4 實驗質量控制25
• 1.5 統(tǒng)計分析方法25
• 2 結果25-42
• 2.1 研究人群基本資料25-26
• 2.2 SIRT6、FOXO3A基因啟動子區(qū)域的生物信息學分析結果26-31
• 2.3 基因甲基化測序結果31-34
• 2.4 SIRT6、FOXO3A基因甲基化水平的比較34-39
• 2.5 基因甲基化位點的logistic回歸分析39-40
• 2.6 甲基化水平與年齡、m RNA、蛋白表達的相關性40-41
• 2.7 基因甲基化水平與吸煙、飲酒的關系41-42
• 3 討論42-49
• 3.1 基因甲基化水平與長壽的關系43-45
• 3.2 甲基化水平與年齡的關系45-46
• 3.3 甲基化水平與m RNA、蛋白表達的關系46-48
• 3.4 甲基化水平與吸煙、飲酒的關系48-49
• 4 總結49-50
• 參考文獻50-59
• 綜述59-71
• 參考文獻66-71
• 致謝71-72
• 攻讀學位期間發(fā)表的學術論文72-73
• 附件73-76

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本文編號：260227