基因療法作為一種解決人類遺傳疾病的潛在有效方法引起了人們的極大關(guān)注。基因載體分為病毒載體和非病毒載體,病毒載體轉(zhuǎn)染效率高但制備起來比較困難較難獲得、傳遞的基因容量較小、特異靶向性能低、有較強(qiáng)的免疫原性、容易產(chǎn)生變異病毒等缺點(diǎn),因此極大的限制了其在臨床上的應(yīng)用。目前研制安全有效且價(jià)格低廉、易實(shí)現(xiàn)規(guī)模化生產(chǎn)的非病毒基因傳遞系統(tǒng)是基因治療的關(guān)鍵。在本文中,我們選擇抗菌肽L-K6作為模板進(jìn)行改造,L-K6是以中國林蛙的皮膚分泌物中分離純化的天然抗菌肽Temporin-1 CEb為模板得到的改造肽,含有Trp的抗菌肽與癌癥細(xì)胞膜有良好的破壞作用,可以透過細(xì)胞膜與胞內(nèi)物質(zhì)發(fā)生相互作用。在前期工作基礎(chǔ)上,通過在不同位置進(jìn)行單個(gè)Trp殘基的替換設(shè)計(jì)合成了一系列含有Trp的新型抗菌肽I1W、L5W、L12W,發(fā)現(xiàn)它們細(xì)胞親和性增高、疏水性增加,推測其可能具有良好的轉(zhuǎn)染能力,因此在本論文中,我們探究了抗菌肽L-K6及其類似物與外源DNA結(jié)合的能力,及其細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)染性能。首先,通過圓二色譜(CD)實(shí)驗(yàn)檢測了多肽L-K6、I1W、L5W和L12W與DNA相互作用后的二級(jí)結(jié)構(gòu),結(jié)果發(fā)現(xiàn)與L-K6相比,I1W、L5W...

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.1基因載體體內(nèi)遞送核酸分子的障礙(引自YinH等人，2014)

遼寧師范大學(xué)碩士學(xué)位論文-3-圖1.1基因載體體內(nèi)遞送核酸分子的障礙(引自YinH等人，2014)Figure1.1Barrierstothedeliveryofnucleicacidmoleculesingenevectors[14](fromYinHetal,2014)

圖1.2環(huán)糊精遞送系統(tǒng)示意圖(引自HardcastleJ等人，2010）

抗菌肽LK-6及其改造肽轉(zhuǎn)染性能研究-4-1.2病毒載體與非病毒載體1.2.1病毒載體1、慢病毒。逆轉(zhuǎn)錄病毒的一個(gè)子類，寄生在不分裂細(xì)胞，它們具有復(fù)制缺陷主要被用來研究體外或體內(nèi)的基因轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)，優(yōu)點(diǎn)是轉(zhuǎn)染效率高[15-18]。2、腺病毒。屬于DNA病毒，不整合進(jìn)入宿主基因組，也不....

圖1.3穩(wěn)定的核酸-脂質(zhì)顆粒(SNLP)示意圖(引自HardcastleJ等人，2010）

抗菌肽LK-6及其改造肽轉(zhuǎn)染性能研究-6-圖1.3穩(wěn)定的核酸-脂質(zhì)顆粒(SNLP)示意圖(引自HardcastleJ等人，2010）Figure1.3Schematicdiagramofstablenucleicacid-lipidparticles(SNLP)[22]（from....

圖1.4透膜肽/核酸復(fù)合物微粒大小對(duì)細(xì)胞透膜機(jī)制的影響[49]

遼寧師范大學(xué)碩士學(xué)位論文-7-圖1.4透膜肽/核酸復(fù)合物微粒大小對(duì)細(xì)胞透膜機(jī)制的影響[49](引自Sahay，G等人，2013）Figure1.4Effectoftheparticlesizeofmembrane-penetratingpeptide/nucleicacidcom....

本文編號(hào)：4029299