目的:利用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)技術(shù),尋找2型糖尿病上熱下寒證相關(guān)的差異性代謝產(chǎn)物,找出糖尿病上熱下寒證生物標(biāo)記物,分析可能涉及的代謝通路。方法:取2型糖尿病上熱下寒證組(S組)(n=25)、健康對照組(N組)(n=30)的血液與裝有抗凝劑的采血管中,離心后放入ep管中,加有機(jī)溶劑,蛋白沉淀后,進(jìn)入液相色譜質(zhì)譜儀得到原始數(shù)據(jù),將數(shù)據(jù)導(dǎo)入Progenesis QI軟件,經(jīng)過峰對齊、峰提取、歸一化處理后,采用SIMCA-P14.1軟件進(jìn)行多元變量統(tǒng)計分析,主要通過有監(jiān)督的正交偏最小二乘法(OPLS-DA),建立模型,得到2型糖尿病上熱下寒證組(S組)與健康對照組(N組)之間的差異性代謝產(chǎn)物,尋找特定的生物標(biāo)志物,通過KEGG數(shù)據(jù)庫,對差異性代謝產(chǎn)物進(jìn)行通路富集,找出差異性代謝產(chǎn)物涉及的代謝途徑,從而獲得可能參與2型糖尿病上熱下寒證發(fā)病進(jìn)程中的代謝通路。結(jié)果:1.一般情況及實(shí)驗(yàn)室檢查:在性別(sex)、體重指數(shù)(BMI)上,兩組比較p0.05,無統(tǒng)計學(xué)差異。在年齡上p0.05,兩組間存在統(tǒng)計學(xué)差異。臨床生化指標(biāo)方面,總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、血肌酐(Scr)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST),兩組比較p0.05,差異無統(tǒng)計學(xué)意義。空腹血糖(FBG)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、尿素(Urea),兩組比較,P0.05,兩組間存在統(tǒng)計學(xué)差異;2.35種物質(zhì)p0.05,vip1,分別是神經(jīng)酰胺(d18:1/24:1(15Z))、溶 血 磷 脂 酰 膽 堿(16:0/14:0)、乙 醇 胺(22:6(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)/16:0)、乙醇胺(20:4(8Z,11Z,14Z,17Z)/16:0)、乙醇胺(18:0/18:1(11Z))、乙醇胺(18:0/22:6(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z))、乙醇胺(20:4(8Z,11Z,14Z,17Z)/18:0)、戊酰肉堿、丁酰肉堿、丙酰肉堿、氨基辛酸、異亮氨酸、谷氨酸、溶血磷脂酰膽堿(18:3(9Z,12Z,15Z))、溶血磷脂酰膽堿(16:1(9Z))、溶血磷脂酰乙醇胺(18:2(9Z,12Z)/0:0)、溶血磷脂酰膽堿(18:2(9Z,12Z))、溶血磷脂酰膽堿(20:4(8Z,11Z,14Z,17Z))、溶血磷脂酰膽堿(16:0)、溶血磷脂酰乙醇胺(18:1(11Z)/0:0)、溶血磷脂酰膽堿(P-16:0)、溶血磷脂酰膽堿(18:1(11Z))、溶血磷脂酰膽堿(P-18:0)、溶血磷脂酰膽堿(20:2(11Z,14Z))、溶血磷脂酰膽堿(18:0)、溶血磷脂酰膽堿(0-18:0)、溶血磷脂酰膽堿(20:0)、乙醇胺(18:2(9Z,12Z)/18:1(11Z))、磷脂酰膽堿(o-16:0/16:1(9Z))、磷脂酰膽堿(o-16:1(9Z)/18:2(9Z,12Z))、磷脂酰膽堿(0-16:0/18:2(9Z,12Z))、磷脂酰膽堿(P-18:0/18:2(9Z,12Z))、磷脂酰膽堿(P-18:0/18:1(11Z))、乙醇胺(P-18:0/18:2(9Z,12Z))、組氨酸;神經(jīng)酰胺(d18:1/24:1(15Z))、神經(jīng)酰胺(d18:1/25:0))、溶血磷脂乙醇胺(22:6(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)/0:0)、磷 脂 乙 醇 胺(22:6(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)/16:0)、磷脂乙醇胺(20:4(8Z,11Z,14Z,17Z)/16:0)、磷脂乙醇胺(18:0/18:1(11Z))、磷脂乙醇胺(18:0/22:6(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z))、磷脂乙醇胺(20:4(8Z,11Z,14Z,17Z)/18:0)、己基肉堿、乙酰肉;13種代謝物fold change1,神經(jīng)酰胺(d18:1/24:1(15Z))、溶血磷脂酰膽堿(16:0/14:0)、乙醇胺(22:6(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)/16:0)、乙醇胺(20:4(8Z,11Z,14Z,17Z)堿、丁酰肉堿、丙酰肉堿、2-氨基辛酸、戊酰肉堿、2-甲基煙酰胺、亮氨酸、谷氨酸、組氨酸/16:0)、乙醇胺(18:0/18:1(11Z))、乙醇胺(18:0/22:6(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z))、乙醇胺(20:4(8Z,11Z,14Z,17Z)/18:0)、戊酰肉堿、丁酰肉堿、丙酰肉堿、氨基辛酸、異亮氨酸、谷氨酸;22種fold change1分別是溶血磷脂酰膽堿(18:3(9Z,12Z,15Z))、溶血磷脂酰膽堿(16:1(9Z))、溶血磷脂酰乙醇胺(18:2(9Z,12Z)/0:0)、溶血磷脂酰膽堿(18:2(9Z,12Z))、溶血磷脂酰膽堿(20:4(8Z,11Z,14Z,17Z))、溶血磷脂酰膽堿(16:0)、溶血磷脂酰乙醇胺(18:1(11Z)/0:0)、溶血磷脂酰膽堿(P-16:0)、溶血磷脂酰膽堿(18:1(11Z))、溶血磷脂酰膽堿(P-18:0)、溶血磷脂酰膽堿(20:2(11Z,14Z))、溶血磷脂酰膽堿(18:0)、溶血磷脂酰膽堿(0-18:0)、溶血磷脂酰膽堿(20:0)、乙醇胺(18:2(9Z,12Z)/18:1(11Z))、磷脂酰膽堿(o-16:0/16:1(9Z))、磷脂酰膽堿(o-16:1(9Z)/18:2(9Z,122))、磷脂酰膽堿(0-16:0/18:2(92,122))、磷脂酰膽堿(P-18:0/18:2(9Z,12Z))、磷脂酰膽堿(P-18:0/18:1(11Z))、乙醇胺(P-18:0/18:2(9Z,12Z))、組氨酸;乙醇胺(22:6(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)/16:0)fold change2,溶血磷脂酰膽堿(18:2(9Z,12Z))fold change0.5。所富集到的通路為甘油脂代謝、氨基�；�-tRNA生物合成、組氨酸代謝、谷氨酰胺和谷氨酸代謝、糖基磷脂酰肌醇生物合成、丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代謝、鞘脂代謝、纈草堿、亮氨酸和異亮氨酸的生物合成、谷胱甘肽代謝、精氨酸與脯氨酸代謝、纈草堿、亮氨酸和異亮氨酸降解。結(jié)論:1.2型糖尿病上熱下寒組(S組)與健康對照組(N組)之間共鑒定出35種差異性代謝物,13種物質(zhì)上調(diào),差異性代謝物:神經(jīng)酰胺(d18:11/24:1(15Z))、溶血磷脂酰膽堿(16:0/14:0)、乙醇胺(22:6(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)/16:0)、乙醇胺(20:4(8Z,11Z,14Z,17Z)/16:0)、乙 醇 胺(18:0/18:1(11Z))、乙 醇 胺(18:0/22:6(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z))、乙醇胺(20:4(8Z,11Z,14Z,17Z)/18:0)、戊酰肉堿、丁酰肉堿、丙酰肉堿、氨基辛酸、異亮氨酸、谷氨酸。22種差異性代謝物下調(diào),差異性代謝物:溶血磷脂酰膽堿(18:3(9Z,12Z,15Z))、溶血磷脂酰膽堿(16:1(9Z))、溶血磷脂酰乙醇胺(18:2(9Z,12Z)/0:0)、溶血磷脂酰膽堿(18:2(9Z,12Z))、溶血磷脂酰膽堿(20:4(8Z,11Z,14Z,17Z))、溶血磷脂酰膽堿(16:0)、溶血磷脂酰乙醇胺(18:1(11Z)/0:0)、溶血磷脂酰膽堿(P-16:0)、溶血磷脂酰膽堿(18:1(11Z))、溶血磷脂酰膽堿(P-18:0)、溶血磷脂酰膽堿(20:2(11Z,14Z))、溶血磷脂酰膽堿(18:0)、溶血磷脂酰膽堿(0-18:0)、溶血磷脂酰膽堿(20:0)、乙醇胺(18:2(9Z,12Z)/18:1(11Z))、磷脂酸膽堿(0-16:0/16:1(9Z))、磷脂酰膽堿(0-16:1(9Z)/18:2(9Z,12Z))、磷脂酰膽堿(0-16:0/18:2(9Z,12Z))、磷脂酰膽堿(P-18:0/18:2(9Z,12Z))、磷脂酰膽堿(P-18:0/18:1(11Z))、乙醇胺(P-18:0/18:2(9Z,12Z))、組氨酸;其中差異性代謝產(chǎn)物乙醇胺(22:6(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)/16:0和溶血磷脂酰膽堿(18:2(9Z,12Z))可作為2型糖尿病上熱下寒證的潛在生物標(biāo)志物以及與其他證型相區(qū)別的生物學(xué)基礎(chǔ);3.2型糖尿病上熱下寒證涉及多種代謝途徑,有甘油脂代謝、氨基�；�-tRNA生物合成、組氨酸代謝、谷氨酰胺和谷氨酸代謝、糖基磷脂酰肌醇生物合成、丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代謝、鞘脂代謝、纈草堿、亮氨酸和異亮氨酸的生物合成、谷胱甘肽代謝、精氨酸與脯氨酸代謝、纈草堿、亮氨酸和異亮氨酸降解等重要代謝途徑。
【學(xué)位單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R259
【部分圖文】：

反相色譜正離子典型色澹圖

圖２親水色譜正離子典型色譜圖?

反相色譜正離子(QC)
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本文編號：2881055