【摘要】：目的針對(duì)發(fā)病率逐年增高且呈年輕化的卵巢早衰,使用國(guó)產(chǎn)瑪咖、不同劑量的秘魯進(jìn)口瑪咖和中藥淫羊藿飲片對(duì)SD大鼠腎陽(yáng)虛證卵巢早衰模型進(jìn)行研究,實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)瑪咖溫補(bǔ)腎陽(yáng)、養(yǎng)護(hù)卵巢的作用和機(jī)制,探討瑪咖性味歸經(jīng)的趨向,豐富新資源食品瑪咖在中醫(yī)養(yǎng)生本草的理論研究,填補(bǔ)瑪咖養(yǎng)護(hù)卵巢的實(shí)驗(yàn)空白,以期加強(qiáng)關(guān)于瑪咖的養(yǎng)生產(chǎn)品的研發(fā)和瑪咖的產(chǎn)業(yè)化發(fā)展、助力海外本草瑪咖在中國(guó)的本土化研究,進(jìn)一步探索養(yǎng)護(hù)卵巢、防治卵巢早衰的養(yǎng)生本草。方法1.分組：24只空白對(duì)照組(A組)為未注射氫化可的松的雌性SD大鼠。120只造模組大鼠在造模結(jié)束后隨機(jī)分為7組,其中模型對(duì)照組(B組)24只、進(jìn)口秘魯瑪咖低劑量組(C組)16只、進(jìn)口秘魯瑪咖中劑量組(D組)16只、進(jìn)口秘魯瑪咖高劑量組16只(E組)、淫羊藿破壁飲片組(F組)16只、國(guó)產(chǎn)瑪咖粉組(G組)16只、國(guó)產(chǎn)瑪咖代用茶組(H組)16只。2.造模：以144只8-9周齡SPF級(jí)成年性成熟雌性SD大鼠(未孕未產(chǎn))為研究對(duì)象,模型組120只每日上午在后下肢肌注氫化可的松32mg. kg-1, d-1,連續(xù)12d,建立。腎陽(yáng)虛證大鼠卵巢早衰模型。3.灌胃：以上六組分別按對(duì)應(yīng)藥品(淫羊藿)或試驗(yàn)用瑪咖進(jìn)行灌胃,進(jìn)口LMC組、進(jìn)口MMC組、進(jìn)口HMC組大鼠分別以2.5g-kg-1-d-1、5gkg-1·-d-1、10kg·kg-1·d-1劑量進(jìn)行灌胃秘魯瑪咖粉,淫羊藿組大鼠以1g·kg-1·d-1劑量灌胃淫羊藿,國(guó)產(chǎn)MC粉組大鼠以2.5g·kg-1·d-1劑量給予灌胃國(guó)產(chǎn)瑪咖粉,國(guó)產(chǎn)MC茶組大鼠以2.5g·kg-1·d-1劑量給予灌胃國(guó)產(chǎn)瑪咖代用茶,模型組與空白組分別給予灌胃2.5ml·kg-1·d-1體積的純凈水。4.取材：第一階段取材：造模結(jié)束后空白組和模型組中各取8只大鼠進(jìn)行取材完成第一次取材,取血液、卵巢、子宮、腎臟、腎上腺。在造模結(jié)束后分別連續(xù)灌胃14天和28天后的次日,每組分別各取材8只,完成第二階段和第三階段的取材。5.觀察：分別觀察各組大鼠體質(zhì)量、大體外觀情況、注射部位情況,每日陰道涂片觀察動(dòng)情周期、取材后計(jì)算臟器指數(shù)(卵巢、子宮、腎臟、腎上腺),檢測(cè)血清生殖激素水平：孕激素P、雌二醇E2、睪酮T、卵泡刺激素FSH、黃體生成素LH及FSH/LH比值的變化,光鏡評(píng)估卵巢組織學(xué)狀態(tài),特別是卵泡發(fā)育(重點(diǎn)計(jì)數(shù)各級(jí)卵泡數(shù)),電鏡觀察評(píng)估卵巢卵泡發(fā)育狀態(tài)(重點(diǎn)評(píng)估原始卵泡和初級(jí)卵泡超微結(jié)構(gòu))。結(jié)果結(jié)果中恢復(fù)、改善等明顯差異的表訴均指有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)或(P0.01)：1.體質(zhì)量：B組在第一、第二、第三階段低于A組和注射前；2.攝食量：B組第一階段低于A組；3.大體情況(腎陽(yáng)虛證外觀、動(dòng)情周期、注射部位潰瘍)：在第一階段、第二階段B組比A組優(yōu)；在第一階段、第二階段C、D、E、F、G、H各灌胃組比B組優(yōu)。4.臟器指數(shù)：①卵巢指數(shù)：B組在第一階段、第二階段低于A組和注射前；C、D、F、G、H組高于B組；②子宮指數(shù)：各組及各階段間無(wú)明顯差異；③腎臟指數(shù)：第一、二階段B組高于A組,在第二階段C、D、F組低于B組。④腎上腺指數(shù)：第一、二階段明顯B組比A組低,二階段C組、D組、E組、F組比B組高。5.光鏡檢測(cè)卵巢形態(tài)：①第一階段：A組比B組動(dòng)物卵巢結(jié)構(gòu)完好,卵泡計(jì)數(shù)未見顯著差異。②第二階段：B組、C組比A組生長(zhǎng)卵泡數(shù)量顯著減少,B組動(dòng)物卵巢退行性變化,次級(jí)生長(zhǎng)卵泡、成熟卵泡及黃體數(shù)量減少,閉鎖卵泡及囊狀卵泡數(shù)量增多。D組、E組、F組、H組比B組生長(zhǎng)卵泡顯著增多,H組黃體明顯增多。③第三階段：B組比A組卵巢退行性變化,生長(zhǎng)卵泡減少。E組比B組生長(zhǎng)卵泡、閉鎖卵泡數(shù)量明顯減少,F組比B組閉鎖卵泡明顯減少,C組黃體數(shù)量比B組顯著減少。6.電鏡檢測(cè)卵泡超微結(jié)構(gòu)：①第一階段：卵母細(xì)胞：B組比A組出現(xiàn)較多自噬體現(xiàn)象,卵泡細(xì)胞變性或凋亡。②第二階段：.卵母細(xì)胞,B組比A組可見多個(gè)自噬體和自噬溶酶體,部分細(xì)胞核固縮,核膜不整,有深切跡,偶見凋亡,可見核裂,染色質(zhì)邊聚。D組比B組明顯恢復(fù)；卵泡細(xì)胞：F組、C組比B組明顯改善。③三階段：卵母細(xì)胞,B組比A組可見多個(gè)自噬體,卵泡細(xì)胞部分細(xì)胞凋亡。F組、C組、D組比B組恢復(fù)。卵泡細(xì)胞：F組、C組、D組比B組明顯恢復(fù)。7.生殖激素：①血清睪酮(T)：在第二階段H組比B組低。②雌二醇(E2)：在第一階段、第二階段B組比A組低,其余四組高于B組；③孕酮(P)：在第三階段B組比A組低,在第二階段、第三階段D、F組比B組高；④促黃體生成素(LH)：第一階段、二階段B組比A組高,第二階段灌胃組均低于B組。⑤血清促卵泡生成素(FSH)和FSH/LH:第一階段、第二階段B組比A組高,第二階段D組、F組比B組低；結(jié)論1.腎陽(yáng)虛證POF造模成功,進(jìn)口瑪咖和國(guó)產(chǎn)瑪咖均能較好改善SD雌性大鼠腎陽(yáng)虛證、養(yǎng)護(hù)卵巢；在灌胃瑪咖二周后有效,灌胃四周后效果更明顯。D組與F組療效接近,C組、G組、H組有效,但略弱于F組和D組,E組無(wú)明顯效果。2.瑪咖改善腎陽(yáng)虛證養(yǎng)護(hù)卵巢機(jī)制與瑪咖溫補(bǔ)腎陽(yáng),健脾益氣的功效相關(guān),對(duì)腎-天癸-沖任-胞宮軸和下丘腦-垂體-卵巢-子宮生殖軸均能起到調(diào)節(jié)的雙軸調(diào)節(jié)相關(guān)。3.瑪咖性味歸經(jīng)：辛、甘、微咸,溫。歸脾、腎經(jīng)。功效：溫補(bǔ)腎陽(yáng),健脾益氣。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R271.9

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6 孫金s，

本文編號(hào)：2466863