本文關(guān)鍵詞：人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞裂解液對(duì)食管癌EC9706細(xì)胞中uPA、MMP-2的影響

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【摘要】：背景食管癌是消化道常見(jiàn)的惡性腫瘤,發(fā)病率高,占世界惡性腫瘤中第八位,在中國(guó)居第四位。盡管人們對(duì)其進(jìn)行了長(zhǎng)期的研究,包括手術(shù)切除、化學(xué)治療及放射治療等一系列的治療方案,但其5年生存率仍?xún)H為15%。導(dǎo)致食管癌術(shù)后死亡率高的原因很多,術(shù)后轉(zhuǎn)移是重要的原因之一。尿激酶型纖溶酶原激活物(urokinase plasminogen activator, uPA)能激活纖溶酶及其他多種蛋白溶解酶。它們?cè)谀[瘤的侵襲及轉(zhuǎn)移過(guò)程中也具有促進(jìn)作用,因?yàn)榭梢越到庾璧K細(xì)胞轉(zhuǎn)移的天然屏障細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix, ECM)等,給腫瘤細(xì)胞清除了轉(zhuǎn)移過(guò)程中的阻力�；|(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases, MMPs)具有降解ECM,破壞基膜(basement membranae, BM)完整性的酶系統(tǒng),在腫瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移中起著非常關(guān)鍵的作用。實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證實(shí),人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells, hUCMSCs)裂解液對(duì)食管癌細(xì)胞EC9706的增殖和遷移均有抑制作用。目的本實(shí)驗(yàn)重點(diǎn)是探索hUCMSCs裂解液對(duì)食管癌EC9706細(xì)胞中uPA、MMP-2的表達(dá)的影響。為進(jìn)一步研究抑制作用機(jī)理奠定理論基礎(chǔ)。為臨床應(yīng)用干細(xì)胞抑制食管癌腫瘤轉(zhuǎn)移的治療方法提供理論依據(jù)。方法1.培養(yǎng)食管癌EC9706細(xì)胞；2.采用組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)hUCMSCs,待細(xì)胞傳至第3代后流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞表型；3.收集hUCMSCs,用反復(fù)凍融法制備hUCMSCs裂解液；4.各個(gè)組擁有相同數(shù)量的食管癌EC9706細(xì)胞,向每組加入不同數(shù)量的hUCMSCs裂解液,然后培養(yǎng)60h。使用Western-blot法檢測(cè)食管癌EC9706細(xì)胞中uPA、MMP-2的表達(dá)變化。結(jié)果食管癌細(xì)胞EC9706在倒置顯微鏡下觀察其呈多邊形,形態(tài)多樣,細(xì)胞核質(zhì)比較大,細(xì)胞核形態(tài)不規(guī)則,細(xì)胞群體排列不規(guī)則。hUCMSCs組織塊培養(yǎng)法原代培養(yǎng)7-12d后,顯微鏡下可見(jiàn)梭形或多角形成纖維細(xì)胞。隨后可以發(fā)現(xiàn)hUCMSCs呈成纖維狀,漩渦狀排列。流式細(xì)胞儀分析第3代hUCMSCs可檢測(cè)到實(shí)驗(yàn)組各組細(xì)胞CD90、CD 166等MSCs標(biāo)志物高表達(dá),不表達(dá)造血細(xì)胞表面特異性標(biāo)志CD34、CD45。當(dāng)用hUCMSCs裂解液處理過(guò)食管癌EC9706細(xì)胞后,uPA在對(duì)照組中的表達(dá)為0.28075±0.00233,在1/2倍組中的表達(dá)為0.28790±0.00176,在1倍組中的表達(dá)為0.13782±0.00542,在2倍組中的表達(dá)為0.12465±0.01277。MMP-2在對(duì)照組中的表達(dá)為0.27051±0.01956,在1/2倍組中的表達(dá)為0.26698±0.00231,在1倍組中的表達(dá)為0.13017±0.01529,在2倍組中的表達(dá)為0.11755±0.00982。當(dāng)加入hUCMSCs數(shù)小于食管癌細(xì)胞數(shù)的裂解液時(shí)uPA、MMP-2的表達(dá)變化不明顯(P0.05),當(dāng)加入hUCMSCs數(shù)大于或等于食管癌細(xì)胞數(shù)的裂解液時(shí)uPA、MMP-2的表達(dá)顯著降低(P0.05)。結(jié)論人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞裂解液對(duì)食管癌細(xì)胞EC9706的遷移的抑制作用可能與尿激酶型纖溶酶原激活物、基質(zhì)金屬蛋白酶-2有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：尿激酶型纖溶酶原激活物 基質(zhì)金屬蛋白酶-2 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 食管癌
【學(xué)位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R735.1
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 前言10-14
• 1. 材料14-16
• 2 實(shí)驗(yàn)方法16-21
• 3 結(jié)果21-26
• 4 討論26-31
• 5 結(jié)論31-32
• 參考文獻(xiàn)32-36
• 綜述：間充質(zhì)干細(xì)胞與腫瘤之間的關(guān)系36-53
• 參考文獻(xiàn)46-53
• 附錄53-54
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況54-55
• 致謝55-56
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷56

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 吳清泉;吳健;陳亮;;MMP-2蛋白在食管磷狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義[J];南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2012年09期

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本文編號(hào)：761346