【摘要】：第一部分轉(zhuǎn)錄因子SLAP2調(diào)控基因預測乳腺癌患者的生存率目的:本部分旨在探討乳腺癌患者腫瘤發(fā)生相關(guān)分子的表達改變與乳腺癌患者生存率的相關(guān)性。方法:本部分研究中的基因表達與臨床信息資料來源于GSE62944庫中1119例乳腺癌標本和113例正常乳腺標本。本次研究通過Cox得分來評價表達顯著改變的蛋白,從而探討基因表達與患者生存率的相關(guān)性。結(jié)果:首先,獲得最大Cox評分的mRNAs進一步將患者分為4個亞組。在本次研究中,我們共獲得了 12019個差異表達的基因,通過共表達分析揭示各模塊之間不同亞群的改變情況�；谝陨涎芯�,我們構(gòu)建了轉(zhuǎn)錄因子(TF)調(diào)控網(wǎng)絡,進而發(fā)現(xiàn)與癌癥生存相關(guān)的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子。按照Cox評分最高的25個基因,我們將所有樣本分為4個亞組。這4個亞組的生存曲線有顯著差異,根據(jù)不同的存活曲線,我們篩選了將1、2、4亞組來進一步探討下游的分子機制。然后,共表達模塊分析表明,其適應性免疫反應的基因可以用于分析三個亞組之間的生存差異。結(jié)果顯示差異表達最明顯的25個基因都可以被轉(zhuǎn)錄因子SLAP2所調(diào)節(jié)。SLAP2在預測乳腺癌的發(fā)生發(fā)展中有較強的靈敏性。結(jié)論:結(jié)果表明,參與適應性免疫應答的轉(zhuǎn)錄因子SLAP2所調(diào)節(jié)的基因與乳腺癌患者的生存率相關(guān)。第二部分SLAP2通過抑制mTOR通路調(diào)控乳腺癌的惡性發(fā)展目的:近些年來,乳腺癌的治療技術(shù)已經(jīng)發(fā)生了很大的提高和進步,大多數(shù)乳腺癌患者通過手術(shù)、放療、化療、內(nèi)分泌治療及分子靶向治療等手段,預后得到了極大的改善。但是,仍然有很多乳腺癌患者遭受腫瘤復發(fā)和轉(zhuǎn)移的困擾。積極尋求新的乳腺癌治療的方法及克服腫瘤耐藥性等問題,成為當前乳腺癌治療的焦點。Src類似接頭蛋白(Src-like adaptor protein,SLAP)在各種類型細胞中廣泛表達,但在淋巴細胞中研究最為深入。SLAP主要包含兩個異構(gòu)體,SLAPl和SLAP2�；谏弦徽碌难芯拷Y(jié)果,SLAP2可以更好的預測乳腺癌的生存率,因此,本文主要探討SLAP2在乳腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用機制。方法:首先,我們用real time PCR和western blot的方法檢測了乳腺癌組織與正常對照中SLAP2的mRNA和蛋白水平。同時,在MDA-MB-231細胞中,通過腺病毒載體高低表達SLAP2,檢測其對腫瘤細胞惡性增殖、遷移、侵襲、凋亡的影響。此外,我們還進一部探討了 SLAP2表達異常對mTOR信號通路活化的影響。結(jié)果:首先,與正常對照相比,在乳腺癌樣本中,SLAP2的mRNA和蛋白水平都明顯降低。進一步的研究發(fā)現(xiàn),乳腺癌細胞中降低SLAP2的表達,可以顯著促進mTOR信號通路的活化,從而引起乳腺癌細胞MDA-MB-231的惡性增殖、遷移和侵襲,并降低乳腺癌細胞的凋亡水平。與此相反,乳腺癌細胞中過表達SLAP2可以顯著抑制mTOR通路的活化,降低MDA-MB-231細胞的增殖、遷移和侵襲能力,并誘導乳腺癌細胞發(fā)生凋亡。結(jié)論:結(jié)果表明,在乳腺癌的發(fā)生與發(fā)展過程中,SLAP2是一個抑癌因子,其作用機制主要通過抑制mTOR信號通路活化,從而阻礙乳腺癌的惡性發(fā)展。這些結(jié)果提示我們,SLAP2可能是未來乳腺癌治療的一個潛在靶標。
【學位授予單位】：武漢大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R737.9
【圖文】：

３．２共表達分析發(fā)現(xiàn)與不同預后相關(guān)的模塊逡逑為／找到與患者牛存相關(guān)的井表達模塊，我們進行／邋ＤＥＧＳ和共表達分析。逡逑首先，ＤＥＧｓ分析了丨，２和４亞俎，共〖２０１９個ＤＥＧｓ被發(fā)現(xiàn)（圖２－２Ａ）。在構(gòu)逡逑建／共表達網(wǎng)絡在差異表達基因中共發(fā)現(xiàn)／邋２３個共表達功能模塊。這些功逡逑能模塊包括㈣種細胞質(zhì)膜－膜粘附模塊、肽類激素分泌調(diào)節(jié)模塊、免疫砬答自適逡逑應模塊和脂肪酸的生物合成模塊（圖２－２Ｂ）。其中，有５６０個基因參與適應性免逡逑疫應答，３６個基因?qū)儆谕N細胞黏附分子，６３個基因負責脂肪酸生物合成過程逡逑中，５９個基因調(diào)節(jié)肽激素分泌（圖２－２Ｃ）。總之，研究結(jié)果提示，差異表達基因逡逑共表達網(wǎng)絡綜合分析可以進一步縮小搜索范圍并有助于發(fā)現(xiàn)有意義的模塊空間。逡逑１９逡逑

我們構(gòu)建了基于整個數(shù)據(jù)集的轉(zhuǎn)錄因子網(wǎng)絡。上述四個模塊中的基因己成為關(guān)注逡逑的焦點。在適應性免疫應答基因的共表達分析模塊中，有２９個轉(zhuǎn)錄因子與至少逡逑１０個靶基因調(diào)控的信號通路相關(guān)（圖２－３Ａ）。有趣的是，其中兩個轉(zhuǎn)錄因子，即逡逑ＳＬＡＰ２和干擾素調(diào)節(jié)因子（ＩＲＦ），可以獨立調(diào)節(jié)大部分基因。在脂肪酸生物合逡逑成過程的模塊中，３２個轉(zhuǎn)錄因子可以共同調(diào)控這一模塊（圖２－３Ｂ）。然而，３２逡逑個轉(zhuǎn)錄因子中的２６個轉(zhuǎn)錄因子可以在這一模塊中控制２－３個靶基因。通過富集逡逑分析轉(zhuǎn)錄因子共同調(diào)節(jié)基因分析發(fā)現(xiàn)，６個肽激素的分泌調(diào)節(jié)模塊和９個在細胞逡逑膜粘附分子中具有調(diào)節(jié)作用的轉(zhuǎn)錄因子被發(fā)現(xiàn)（圖２－３Ｃ和２－３Ｄ）�？偟膩碚f，逡逑結(jié)果表明，轉(zhuǎn)錄因子可以調(diào)控的共表達模塊可能在患者生存率中起著重要作用。逡逑２０逡逑

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 Joycelyn JX Lee;Kiley Loh;Yoon-Sim Yap;;PI3K/Akt/mTOR inhibitors in breast cancer[J];Cancer Biology & Medicine;2015年04期

2 劉民鋒;郭昭澤;董建宇;楊翼鵬;嵇健;劉潤奇;延艷;葉長生;;pcDNA3.1-mTOR質(zhì)粒體外轉(zhuǎn)染對乳腺癌細胞生長的影響[J];南方醫(yī)科大學學報;2015年02期

本文編號：2720990