本文關鍵詞：米非司酮（RU486）下調孕酮誘導阻斷因子的表達抑制乳腺癌MCF-7細胞生長

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【摘要】：孕酮誘導阻斷因子(progesterone induced blocking factor,PIBF)是妊娠期間由孕酮誘導產(chǎn)生,介導孕酮的免疫反應。服用米非司酮,也稱RU486后,孕婦體內(nèi)PIBF水平下降,胎兒流產(chǎn)率增加。PIBF在部分腫瘤細胞及組織中過度表達。RU486可以抑制乳腺癌細胞的生長,但是RU486所引起的腫瘤生物學行為的改變是否與PIBF有關,目前并不清楚。本論文通過RU486作用PR陽性的MCF-7細胞,研究腫瘤細胞生物學行為,探討PIBF的改變,為豐富RU486的抗腫瘤機制提供新的線索。結果顯示,RU486可以改變細胞形態(tài),使細胞胞體變小,凸起變長,貼壁不好且易脫落�？梢砸种芃CF-7細胞增殖,并且有濃度和時間依賴,24h、48h和72h的半數(shù)抑制濃度IC50值分別為:41.15μM、35.47μM和25.74μM�？梢允辜毎芷谧铚贕1期,誘導細胞凋亡。RU486可以下調PIBF m RNA和蛋白,上調p21和Bax蛋白,下調cdk2,cyclin A和WNT1蛋白�？傊�,RU486可以抑制乳腺癌MCF-7的生長,可能是通過下調PIBF來發(fā)揮作用。
【關鍵詞】：RU486 孕酮誘導阻斷因子 乳腺癌
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R737.9
【目錄】：

• 內(nèi)容提要4-5
• 中文摘要5-8
• Abstract8-14
• 第1章 緒論14-19
• 1.1 抑制細胞增殖14-15
• 1.1.1 RU486與PR依賴關系14-15
• 1.1.2 內(nèi)質網(wǎng)應激15
• 1.2 誘導細胞周期G1期阻滯15-16
• 1.3 促進細胞凋亡16-18
• 1.3.1 Bcl-2 和Bax16
• 1.3.2 半胱氨酸蛋白酶caspase家族16
• 1.3.3 線粒體凋亡通路16-17
• 1.3.4 MAPKs信號通路17
• 1.3.5 CHOP蛋白17-18
• 1.4 抑制細胞侵襲和遷移18-19
• 第2章 引言19-20
• 第3章 材料與方法20-31
• 3.1 材料20-23
• 3.1.1 主要儀器和設備20
• 3.1.2 主要試劑盒耗材20-22
• 3.1.3 主要試劑配制22-23
• 3.2 細胞培養(yǎng)23
• 3.3 CCK-8 法測定細胞增殖23
• 3.4 流式細胞術檢測細胞周期23-24
• 3.5 流式細胞術檢測細胞凋亡24-25
• 3.6 RT-qPCR檢測PIBF基因mRNA的表達25-27
• 3.6.1 RNA的提取25
• 3.6.2 逆轉錄反應25-26
• 3.6.3 Real-time PCR26-27
• 3.7 Western blot檢測相關蛋白水平的表達27-30
• 3.7.1 蛋白的提取27
• 3.7.2 BCA法測定蛋白濃度27-28
• 3.7.3 蛋白變性28
• 3.7.4 制膠28-29
• 3.7.5 上樣29
• 3.7.6 電泳29
• 3.7.7 轉膜29
• 3.7.8 封閉29
• 3.7.9 抗體孵育29-30
• 3.7.10 顯色30
• 3.8 統(tǒng)計學處理30-31
• 第4章 結果31-39
• 4.1 RU486改變MCF-7 細胞形態(tài)31-32
• 4.2 RU486抑制MCF-7 細胞增殖32-33
• 4.3 RU486誘導MCF-7 細胞G1期阻滯33-34
• 4.4 RU486促進MCF-7 細胞凋亡34-35
• 4.5 RU486下調PIBF表達35-36
• 4.6 RU486下調WNT1表達36-37
• 4.7 RU486上調p21和Bax，下調cdk2和cyclin A表達37-39
• 第5章 討論39-44
• 5.1 RU486與細胞增殖39-41
• 5.2 RU486與細胞周期41-42
• 5.3 RU486與細胞凋亡42-44
• 第6章 結論44-45
• 參考文獻45-54
• 作者簡介及在學期間所取得的科研成果54-55
• 致謝55

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