DNA復(fù)制叉(DNAreplication fork)是DNA復(fù)制的基本結(jié)構(gòu),它的完整性對(duì)基因組穩(wěn)定性的維持至關(guān)重要,直接決定了細(xì)胞的命運(yùn)。在機(jī)體內(nèi)外各種復(fù)制壓力的作用下,DNA復(fù)制叉極易受到干擾,產(chǎn)生損傷,導(dǎo)致DNA復(fù)制停滯。嚴(yán)重者可以影響基因組的穩(wěn)定性,誘發(fā)細(xì)胞的癌變、凋亡、壞死等。DNA復(fù)制叉穩(wěn)定性的維持是一個(gè)錯(cuò)綜復(fù)雜的過(guò)程,需要多種DNA損傷修復(fù)蛋白的參與。X 線修復(fù)交錯(cuò)互補(bǔ)基因 1(X-ray repair cross complementing gene 1,XRCC1)是一個(gè)重要的DNA損傷修復(fù)基因。它的編碼蛋白XRCC1主要由3個(gè)結(jié)構(gòu)域組成,即氨基端的結(jié)構(gòu)域(NTD,1-183氨基酸區(qū)域)、羧基端的乳腺癌易感基因羧基端2結(jié)構(gòu)域(BRCT II)、中間的乳腺癌易感基因羧基端1結(jié)構(gòu)域(BRCT I)。XRCC1可以借助其結(jié)構(gòu)域與DNA聚合酶β、DNA連接酶3α等多種DNA損傷修復(fù)蛋白結(jié)合。XRCC1主要參與DNA的單鏈損傷修復(fù)(Single strand break repair,SSBR)和堿基切除修復(fù)(Base excision repair,BER)。已有研究表明,X...

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１．３．１在ＤＮＡ復(fù)制壓力作用下，ＸＲＣＣＩ募集到ＤＮＡ復(fù)制叉停滯處

圖１．３．１在ＤＮＡ復(fù)制壓力作用下，ＸＲＣＣＩ募集到ＤＮＡ復(fù)制叉停滯處。（Ａ）在??ＨＵ的作用下，ＧＦＰ－ＸＲＣＣ１焦點(diǎn)陽(yáng)性的細(xì)胞百分比增加；（Ｂ）?ＸＲＣＣ１焦點(diǎn)與??ＥｄＵ共定位情況；（Ｃ）?Ｘ民ＣＣ１焦點(diǎn)只在Ｃｙｃｌｉｎ－Ａ陽(yáng)性的細(xì)胞中表達(dá)。??１９??

圖１．３．２?ＸＲＣＣｌ的募集受ＰＡＲＰｌ的調(diào)控

浙江大學(xué)博±學(xué)位論文?第一部分??１．３．２在ＰＡＲＰ１的調(diào)控作用下，ＸＲＣＣ１聚集到ＤＮＡ復(fù)制叉停滯處??在ＤＮＡ單鏈損傷修復(fù)通路中，ＰＡＲＰ１酶居于ＸＲＣＣ１的上游；旦己有研表明，ＰＡＲＰ１可Ｗ保護(hù)停滯的ＤＮＡ復(fù)制叉。為了探討ＸＲＣＣ１在ＤＮＡ復(fù)制叉滯處的聚集是否受ＰＡＲＰ１....

圖１．３．３?ＸＲＣＣｌ保護(hù)ＤＮＡ復(fù)制叉的穩(wěn)定性，促進(jìn)ＤＮＡ復(fù)制叉停滯的重新后動(dòng)

浙江大學(xué)博±學(xué)位論文?第一部分??的重新啟動(dòng)情況。如果停滯的ＤＮＡ復(fù)制叉無(wú)法重啟，當(dāng)我們棄去ＨＵ，不會(huì)再有??新的綠色巧光標(biāo)記的ＤＮＡ復(fù)制出現(xiàn)（如圖１．３．３Ａ）。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：與ＥＭ９－Ｖ細(xì)胞??相比，ＥＭ９－ＸＨ細(xì)胞的ＤＮＡ復(fù)制叉停滯百分比顯著降低；反之，說(shuō)明與ＥＭ９－Ｖ??細(xì)胞....

圖１．３．４?ＸＲＣＣｌ在ＤＮＡ復(fù)制叉停滯處的聚集促進(jìn)細(xì)胞的存活

±學(xué)位論文?第ＨＵ的作用下，ＸＲＣＣ１促進(jìn)細(xì)胞的存活??檢測(cè)ＸＲＣＣ１在ＤＮＡ復(fù)制叉停滯處的聚集對(duì)細(xì)胞存活的影響。我１００，?２００?ｕＭ?）干預(yù)ＥＭ９－Ｖ細(xì)胞和ＥＭ９－ＸＨ細(xì)胞２４ｈ，然后進(jìn)行克測(cè)細(xì)胞的增殖。結(jié)果發(fā)現(xiàn)；與ＥＭ９－ＸＨ細(xì)胞先比，隨著藥物濃度的細(xì)胞的克隆形成受到的抑....

本文編號(hào)：3897817