目的采用脂多糖(LPS)誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞的炎癥模型,考察炎癥相關(guān)指標(biāo),探討毛蕊花苷的抗炎作用及其機(jī)制。方法用MTT比色法檢測(cè)毛蕊花苷對(duì)RAW264.7細(xì)胞活性的影響;Griess法檢測(cè)NO的含量;Westernblotting檢測(cè)核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)通路相關(guān)蛋白的表達(dá),ELISA試劑盒檢測(cè)腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)的釋放,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)、一氧化氮(NO)、Ca²⁺的釋放情況。結(jié)果毛蕊花苷濃度為20、40、80μmol/L時(shí)對(duì)RAW264.7細(xì)胞沒(méi)有毒性。不同濃度的毛蕊花苷對(duì)LPS誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞導(dǎo)致的NO、TNF-α、IL-6的釋放,細(xì)胞內(nèi)ROS、NO、Ca²⁺釋放的增加均有很好的抑制效果,對(duì)誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(i NOS)、環(huán)氧化酶-2(COX-2)、p-IKKα/β、p-p65、p-IκBα蛋白的表達(dá)也有抑制作用。結(jié)論毛蕊花苷具有明顯的抗炎作用,其作用機(jī)制是通過(guò)抑制NF-κB信號(hào)通路而發(fā)揮抗炎作用。

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料
    1.1 細(xì)胞、藥物與試劑
    1.2 儀器
2 方法
    2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
    2.2 毛蕊花苷的細(xì)胞毒性檢測(cè)
    2.3 毛蕊花苷對(duì)NO釋放的影響
    2.4 毛蕊花苷對(duì)TNF-α、IL-6炎癥因子釋放的影響
    2.5 毛蕊花苷對(duì)ROS/NO/Ca2+產(chǎn)生的影響
    2.6 毛蕊花苷對(duì)i NOS/COX-2蛋白表達(dá)的影響
    2.7 毛蕊花苷對(duì)核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB）通路的影響
    2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
    3.1 細(xì)胞生長(zhǎng)情況
    3.2 毛蕊花苷對(duì)RAW264.7細(xì)胞活性的影響
    3.3 毛蕊花苷對(duì)LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞釋放NO的影響
    3.4 毛蕊花苷對(duì)LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞釋放ROS/Ca2+的影響
    3.5 ELISA檢測(cè)毛蕊花苷對(duì)LPS誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞分泌IL-6、TNF-α的影響
    3.6 毛蕊花苷對(duì)LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞中i NOS、COX-2蛋白表達(dá)的影響
    3.7 毛蕊花苷對(duì)LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞中NF-κB信號(hào)通路的影響
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