目的:1、探討脂肪代謝障礙導(dǎo)致的胰島素抵抗aP2-SREBP1c轉(zhuǎn)基因小鼠模型的脂肪萎縮狀態(tài)對脂肪組織巨噬細(xì)胞極化的影響。2、給予冷刺激干預(yù),探討aP2-SREBP1c小鼠脂肪代謝障礙引起的脂肪萎縮狀態(tài)下脂肪組織巨噬細(xì)胞極化的變化。3、給藥FTZ干預(yù),基于脂肪組織巨噬細(xì)胞極化探討FTZ對改善aP2-SREBP1c小鼠脂肪萎縮狀態(tài)胰島素抵抗的作用。4、在冷刺激環(huán)境下,探討FTZ改善aP2-SREBP1c小鼠脂肪萎縮狀態(tài)胰島素抵抗的影響及其可能機(jī)制。方法:將aP2-SREBP1c小鼠確認(rèn)基因型后并根據(jù)體重、GLU、TG、TC等指標(biāo)隨機(jī)分組,每組分為2部分,分為4℃環(huán)境刺激部分(每天給予冷刺激4小時(shí))和25℃常溫室溫環(huán)境部分(環(huán)境溫度25±2℃)。每周觀察體重變化,每隔2周取禁食血,動態(tài)觀察GLU、TG、TC、HDL-C、LDL-C的水平;給藥10周后利用小動物核磁共振全身成分分析儀檢測小鼠脂肪含量;給藥11周后,做口服糖耐量實(shí)驗(yàn)(OGTT);給藥12周后取材,通過線粒體耗氧量實(shí)驗(yàn)檢測棕色脂肪組織SVF細(xì)胞的細(xì)胞呼吸率;通過流式細(xì)胞術(shù)檢測皮下脂肪組織SVF細(xì)胞中巨噬細(xì)胞的M1、M2型極化表型...

【文章頁數(shù)】：98 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 序言
    1.1 研究背景
        1.1.1 糖脂代謝病
        1.1.2 中醫(yī)藥復(fù)方防治糖脂代謝病
    1.2 文獻(xiàn)綜述
        1.2.1 脂肪組織對胰島素敏感性的影響
        1.2.2 脂肪組織適應(yīng)性產(chǎn)熱與巨噬細(xì)胞相關(guān)的機(jī)制研究
        1.2.3 脂肪代謝障礙模型的研究進(jìn)展
    1.3 研究路線
    1.4 小結(jié)
第二章 aP2-SREBP1c小鼠的表型研究
    2.1 前言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)動物
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.2.3 實(shí)驗(yàn)試劑
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 轉(zhuǎn)基因動物繁殖
        2.3.2 動物分組
        2.3.3 脂肪組織含量檢測
        2.3.4 口服糖耐量實(shí)驗(yàn)(OralGlucoseToleranceTest,OGTT)
        2.3.5 胰島素抵抗指數(shù)
        2.3.6 HE染色
        2.3.7 糖原PAS染色
        2.3.8 流式細(xì)胞術(shù)檢測脂肪組織SVF細(xì)胞
        2.3.9 Trizol法提取總RNA
        2.3.10 總RNA逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)
        2.3.11 RT-PCR
        2.3.12 引物序列
        2.3.13 棕色脂肪細(xì)胞線粒體耗氧量實(shí)驗(yàn)
        2.3.14 GC-MS法分析肝臟脂肪酸組分方法
        2.3.15 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.4.1 aP2-SREBP1c小鼠的糖脂代謝狀況
        2.4.2 aP2-SREBP1c小鼠的體脂水平
        2.4.3 aP2-SREBP1c小鼠的糖耐量
        2.4.4 aP2-SREBP1c小鼠的胰島素水平、HOMA-IR
        2.4.5 aP2-SREBP1c小鼠體內(nèi)的脂肪酸含量
        2.4.6 aP2-SREBP1c脂肪組織特異性過表達(dá)對小鼠棕色脂肪的影響
        2.4.7 aP2-SREBP1c脂肪組織特異性過表達(dá)對肝臟的影響
        2.4.8 aP2-SREBP1c脂肪組織特異性過表達(dá)對小鼠脂肪組織巨噬細(xì)胞極化的影響
        2.4.9 aP2-SREBP1c脂肪組織特異性過表達(dá)對小鼠脂肪組織炎癥狀態(tài)的影響
    2.5 小結(jié)
第三章 冷刺激對aP2-SREBP1c小鼠的影響
    3.1 前言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)動物
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.2.3 實(shí)驗(yàn)試劑
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 動物分組
        3.3.2 冷刺激干預(yù)方法
        3.3.3 脂肪組織含量檢測
        3.3.4 口服糖耐量實(shí)驗(yàn)(OralGlucoseToleranceTest,OGTT)
        3.3.5 胰島素抵抗指數(shù)
        3.3.6 HE染色
        3.3.7 RT-PCR檢測實(shí)驗(yàn)
        3.3.8 引物序列
        3.3.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法
    3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.4.1 冷刺激對aP2-SREBP1c小鼠糖脂代謝的影響
        3.4.2 冷刺激對aP2-SREBP1c小鼠中心體溫的影響
        3.4.3 冷刺激對aP2-SREBP1c小鼠體脂的影響
        3.4.4 冷刺激對aP2-SREBP1c小鼠糖耐量的影響
        3.4.5 冷刺激對aP2-SREBP1c小鼠胰島素水平、HOMA-IR的影響
        3.4.6 冷刺激對aP2-SREBP1c小鼠脂肪組織狀態(tài)的影響
        3.4.7 冷刺激對aP2-SREBP1c小鼠脂肪組織巨噬細(xì)胞極化的影響
        3.4.8 冷刺激對aP2-SREBP1c小鼠脂肪組織脂肪因子的影響
    3.5 小結(jié)
第四章 基于脂肪組織巨噬細(xì)胞極化,復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂方改善aP2-SREBP1c小鼠胰島素抵抗的藥效及機(jī)制研究
    4.1 前言
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)動物
        4.2.2 干預(yù)藥物
        4.2.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        4.2.4 實(shí)驗(yàn)試劑
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 動物分組
        4.3.2 給藥干預(yù)方法
        4.3.3 脂肪組織含量檢測
        4.3.4 口服糖耐量實(shí)驗(yàn)(OralGlucoseToleranceTest,OGTT)
        4.3.5 胰島素抵抗指數(shù)
        4.3.6 HE染色
        4.3.7 流式細(xì)胞術(shù)檢測脂肪組織SVF細(xì)胞
        4.3.8 Trizol法提取總RNA
        4.3.9 總RNA逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)
        4.3.10 RT-PCR
        4.3.11 引物序列
        4.3.12 棕色脂肪細(xì)胞線粒體耗氧量實(shí)驗(yàn)
        4.3.13 GC-MS法分析肝臟脂肪酸組分方法
        4.3.14 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法
    4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.4.1 FTZ對aP2-SREBP1c小鼠糖脂代謝的影響
        4.4.2 FTZ對aP2-SREBP1c小鼠糖耐量的影響
        4.4.3 FTZ對aP2-SREBP1c小鼠胰島素水平、HOMA-IR的影響
        4.4.4 FTZ對aP2-SREBP1c小鼠脂質(zhì)異位沉積的影響
        4.4.5 FTZ對aP2-SREBP1c小鼠棕色脂肪細(xì)胞呼吸率的影響
        4.4.6 FTZ對aP2-SREBP1c小鼠脂肪組織巨噬細(xì)胞極化的影響
        4.4.7 FTZ對aP2-SREBP1c小鼠脂肪組織炎癥因子水平的影響
        4.4.8 FTZ對aP2-SREBP1c小鼠脂肪組織脂肪調(diào)節(jié)因子的影響
    4.5 小結(jié)
第五章 冷刺激條件下,FTZ改善aP2-SREBP1c小鼠胰島素抵抗的藥效研究
    5.1 前言
    5.2 實(shí)驗(yàn)材料
        5.2.1 實(shí)驗(yàn)動物
        5.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    5.3 實(shí)驗(yàn)方法
        5.3.1 動物分組
        5.3.2 給藥干預(yù)方法
        5.3.3 冷刺激干預(yù)方法
        5.3.4 脂肪組織含量檢測
        5.3.5 口服糖耐量實(shí)驗(yàn)(OralGlucoseToleranceTest,OGTT)
        5.3.6 胰島素抵抗指數(shù)
        5.3.7 HE染色
        5.3.8 RT-PCR檢測實(shí)驗(yàn)
        5.3.9 引物序列
        5.3.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法
    5.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.4.1 冷刺激條件下,FTZ對aP2-SREBP1c小鼠體溫變化的影響
        5.4.2 冷刺激條件下,FTZ對aP2-SREBP1c小鼠體脂的影響
        5.4.3 冷刺激條件下,FTZ對aP2-SREBP1c小鼠脂肪組織的影響
        5.4.4 冷刺激條件下,FTZ對aP2-SREBP1c小鼠脂肪組織巨噬細(xì)胞極化的影響
        5.4.5 冷刺激條件下,FTZ對aP2-SREBP1c小鼠脂肪組織炎癥因子的影響
        5.4.6 冷刺激條件下,FTZ對aP2-SREBP1c小鼠脂肪組織脂肪調(diào)節(jié)因子的影響
    5.5 小結(jié)
第六章 結(jié)論與展望
    6.1 結(jié)論
    6.2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝



本文編號：3800331