炎癥是機(jī)體受到PM_2.5刺激時發(fā)生的防御性應(yīng)激反應(yīng),在PM_2.5所致肺損傷的發(fā)生和發(fā)展中扮演關(guān)鍵作用。鷹嘴豆芽素A(biochanin A)是具有抗炎、抗氧化活性的異黃酮類化合物,能夠有效干預(yù)PM_2.5所致肺損傷。本論文通過建立體外細(xì)胞模型,并結(jié)合計算機(jī)模擬分子對接理論和方法,探究鷹嘴豆芽素A緩解PM_2.5有機(jī)提取物所致炎癥的作用機(jī)制�；贏549人肺腺癌細(xì)胞,評價PM_2.5有機(jī)提取物致炎效果及biochanin A抗炎活性。結(jié)果表明,biochanin A(10μM和20μM)能顯著抑制PM_2.5有機(jī)提取物(150μg/mL)引起的炎癥因子IL-8、IL-6、IL-1β、TNFα的表達(dá)及釋放,促進(jìn)NO和PGE₂的合成及其對應(yīng)的關(guān)鍵合成酶基因iNOS和COX2的轉(zhuǎn)錄。通過GC-MS技術(shù)對PM_2.5有機(jī)提取物主要成分進(jìn)行分析,結(jié)果顯示:PM_2.5樣品有機(jī)溶出物成分復(fù)雜,共分離出13個色譜峰,鑒...

【文章頁數(shù)】：93 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 PM_2.5概述
        1.1.1 PM_2.5成分及危害
        1.1.2 PM_2.5作用機(jī)制
        1.1.3 PM_2.5損傷干預(yù)
    1.2 炎癥信號通路
        1.2.1 NF-κB信號通路概述
        1.2.2 NF-κB信號與PM_2.5所致炎癥
        1.2.3 MAPK信號與PM_2.5所致炎癥
        1.2.4 MEK5/ERK5信號概述
        1.2.5 MEK5/ERK5信號調(diào)控炎癥與免疫
        1.2.6 MEK5/ERK5信號調(diào)控NF-κB
    1.3 鷹嘴豆芽素A
    1.4 研究目的及意義
    1.5 研究內(nèi)容和技術(shù)路線
        1.5.1 研究內(nèi)容
        1.5.2 技術(shù)路線
第2章 鷹嘴豆芽素A對PM_2.5有機(jī)提取物所致炎癥作用研究
    2.1 材料與儀器
        2.1.1 細(xì)胞株
        2.1.2 實驗試劑與耗材
        2.1.3 實驗儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 PM_2.5采集及有機(jī)組分提取
        2.2.2 PM_2.5有機(jī)提取物成分分析
        2.2.3 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.4 細(xì)胞分組及處理
        2.2.5 MTT實驗
        2.2.6 LDH實驗
        2.2.7 炎癥因子/介質(zhì)的測定
        2.2.8 基因表達(dá)測定
        2.2.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
    2.3 實驗結(jié)果與討論
        2.3.1 PM_2.5有機(jī)提取物致細(xì)胞損傷作用評價
        2.3.2 biochanin A安全作用劑量考察
        2.3.3 PM_2.5暴露-biochanin A保護(hù)體外細(xì)胞模型的建立
        2.3.4 biochanin A抗炎作用評價
        2.3.5 PM_2.5有機(jī)提取物化學(xué)成分分析結(jié)果
        2.3.6 PM_2.5有機(jī)提取物化學(xué)成分與炎癥反應(yīng)相關(guān)性
    2.4 本章小結(jié)
第3章 鷹嘴豆芽素A緩解PM_2.5有機(jī)提取物所致炎癥作用機(jī)制
    3.1 材料與儀器
        3.1.1 細(xì)胞株
        3.1.2 實驗試劑與耗材
        3.1.3 實驗儀器
    3.2 實驗方法
        3.2.1 細(xì)胞總蛋白提取
        3.2.2 細(xì)胞核蛋白提取
        3.2.3 蛋白濃度測定及變性處理
        3.2.4 蛋白質(zhì)免疫印記實驗
        3.2.5 基因表達(dá)測定
        3.2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
    3.3 實驗結(jié)果與討論
        3.3.1 biochanin A抑制MEK5/ERK5信號通路
        3.3.2 biochanin A抑制NF-κB信號通路
        3.3.3 biochanin A通過抑制MEK5/ERK5和NF-κB通路緩解炎癥
    3.4 本章小結(jié)
第4章 鷹嘴豆芽素A與MEK5靶點分子互作機(jī)制研究
    4.1 分子模擬平臺
    4.2 分子對接
        4.2.1 準(zhǔn)備文件
        4.2.2 biochanin A與MEK5的分子對接
    4.3 結(jié)果與討論
    4.4 本章小結(jié)
第5章 全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄A
發(fā)表論文和參加科研情況說明
致謝



本文編號：3769015