目的:腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中,粒細胞樣髓源抑制性細胞（granulocytic myeloid-derived suppressor cells,G-MDSCs）大量擴增并抑制機體的抗腫瘤免疫應答。白藜蘆醇（resveratrol,RES）是一種具有多種生物學活性的天然植物抗毒素,其可通過多種機制防治腫瘤,但對G-MDSCs的作用尚不明確。本論文體內利用小鼠Lewis肺癌細胞構建皮下移植瘤模型,探討白藜蘆醇能否通過抑制G-MDSCs的擴增來延緩腫瘤的生長;體外將白藜蘆醇作用于荷瘤小鼠脾臟G-MDSCs,檢測G-MDSCs凋亡及向腫瘤組織募集的情況,同時觀察其免疫抑制功能的變化,并探討STAT3信號通路在其中發(fā)揮的作用。方法:（1）用Lewis細胞皮下注射C57BL/6小鼠建立肺癌移植瘤模型,荷瘤小鼠隨機分成兩組,分別用PBS和白藜蘆醇連續(xù)灌胃處理3周。測量小鼠皮下腫瘤體積和重量,實時監(jiān)測腫瘤生長情況和小鼠生存率;采用流式細胞術（FCM）檢測各組小鼠脾臟和腫瘤中總MDSCs、G-MDSCs、M-MDSCs、CD8+T細胞比率,以及小鼠引流淋巴結中CD8+T細胞比率。（2）體外通過免疫磁珠分選... 

【文章來源】：江蘇大學江蘇省

【文章頁數】：76 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

骨髓細胞在正常條件和腫瘤誘導條件下的分化過程

的穩(wěn)定性和生物利用度。白藜蘆醇的化學結構導致其在水中的溶解度較低，因而其吸收率也較低[58]。通過靜脈注射進入體內的白藜蘆醇在血漿中將會以與脂蛋白和清蛋白結合的方式進入細胞而發(fā)揮作用。通過口服進入動物和人體內的白藜蘆醇，70%-80%在腸道通過被動擴散被吸收，后與硫酸鹽和葡萄糖醛酸結合，30-60 分鐘后反式白藜蘆醇在循環(huán)系統(tǒng)中的水平將會達到峰值，但其很快在肝臟被代謝。研究證明，白藜蘆醇在體內的生物利用度不高，其在肝臟和小腸的代謝產物僅有1%被利用[59]。白藜蘆醇在體內主要代謝為白藜蘆醇-3-O-硫酸酯/葡糖苷酸和白藜蘆醇-4′-O-硫酸酯/葡糖苷酸等，這些代謝產物在血漿和尿液中的濃度約是天然白藜蘆醇的 20倍[60]。另外，有學者發(fā)現來自紅酒和葡萄果汁中的白藜蘆醇，其生物利用度要明顯高于來自藥片或其他食品中的白藜蘆醇[61]。由于白藜蘆醇在體內的吸收和利用度都相對較低，因此未來要更多地著手于研究提高其吸收率和利用率的方法，以便更好地分析白藜蘆醇在機體內的生物學作用。

細胞培養(yǎng)技術，細胞凋亡檢測技術（Annexin-V/7-AAD），免疫磁珠分選（MACS），蛋白質免疫印跡技術（Western-blot），流式細胞技術（FCM），錄 PCR，實時熒光定量 PCR，Transwell 細胞遷移實驗，CFSE 細胞增殖檢術，酶聯免疫吸附測定技術（ELISA）。.3 實驗設計方案1）體內實驗：利用 Lewis 肺癌細胞系構建小鼠皮下移植瘤模型，在體內驗證白藜蘆醇是夠通過調控 MDSCs 的擴增來影響腫瘤的發(fā)生發(fā)展。當腫瘤細胞皮下注射完，第二天即用相同體積的白藜蘆醇和 PBS 分別灌胃處理兩組模型鼠，連續(xù) 3 周。期間觀察白藜蘆醇對小鼠腫瘤生長進程的影響，檢測腫瘤生長相關的變化、并記錄各組小鼠的存活情況，同時進一步分析兩組荷瘤小鼠體內各DSCs 和 CD8+T 細胞比率的差異（圖 1.3）。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]洛伐他汀對谷氨酸誘導的興奮性毒性損害的神經保護作用[J]. 馬濤,陳耀民,趙永波.  實用臨床醫(yī)藥雜志. 2008(09)



本文編號：3383836