目的:黃芪甲苷（As-IV）是黃芪中的一種小分子的活性三萜皂苷成分,目前,已經(jīng)證明對(duì)許多心血管疾病有保護(hù)作用。本實(shí)驗(yàn)主要目的是研究As-IV在抗心肌缺氧/復(fù)氧損傷中的作用機(jī)制,以闡明As-IV對(duì)抗心肌缺氧/復(fù)氧損傷的保護(hù)作用主要是否通過(guò)14-3-3η蛋白介導(dǎo)。方法:在本實(shí)驗(yàn)中,大鼠H9c2心肌細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)載體,通過(guò)體外心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧（A/R）損傷模型模擬體內(nèi)心肌缺血再灌注（I/R）損傷模型。實(shí)驗(yàn)隨機(jī)分成7組,每組重復(fù)4次:（1）正常組（control組）;（2）A/R組;（3）25μM AS-IV+A/R組;（4）50μM AS-IV+A/R組;（5）100μM AS-IV+A/R組;（6）50μM As-IV+AD14-3-3ηRNAi+A/R組;（7）50μM As-IV+ADscrRNAi+A/R組。MTS法檢測(cè)細(xì)胞存活率;分光光度法檢測(cè)LDH活性;蛋白免疫印跡法（western blotting）檢測(cè)14-3-3η蛋白的表達(dá);JC-1檢測(cè)細(xì)胞線粒體膜電位（Δψm）;DCFH-DA法檢測(cè)心肌細(xì)胞內(nèi)ROS水平;Annexin V-FITC/PI雙染法檢測(cè)細(xì)胞凋亡。結(jié)果:1.與A... 

【文章來(lái)源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：48 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
對(duì)照表：英文縮寫(xiě) 英文全稱 中文全稱
第1章 引言
第2章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
    2.2 主要材料和試劑
    2.3 主要儀器和設(shè)備
    2.4 實(shí)驗(yàn)方法
        2.4.1 培養(yǎng)H9c2心肌細(xì)胞
        2.4.2 心肌缺氧/復(fù)氧（A/R）損傷模型的構(gòu)建
        2.4.3 MTS法檢測(cè)H9c2心肌細(xì)胞存活率
        2.4.4 分光光度法檢測(cè)乳酸脫氫酶（LDH）的活性
        2.4.5 蛋白免疫印跡法 (Western blotting)檢測(cè) 1433η 蛋白的表達(dá)
        2.4.6 DCFH-DA法檢測(cè)H9c2心肌細(xì)胞內(nèi)ROS的含量
        2.4.7 JC-1 檢測(cè)H9c2心肌細(xì)胞線粒體膜電位(△Ψm)
        2.4.8 Annexin V-FITC/PI雙染法檢測(cè)H9c2心肌細(xì)胞凋亡
        2.4.9 數(shù)據(jù)處理
第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 AS-IV等中藥單體預(yù)處理對(duì) 1433η 蛋白表達(dá)的影響
    3.2 AS-IV最佳濃度的確定
        3.2.1 不同劑量的AS-IV組預(yù)處理對(duì)細(xì)胞存活率的影響
        3.2.2 不同劑量的AS-IV組預(yù)處理對(duì)LDH活性的影響
    3.3 AS-IV預(yù)處理對(duì)細(xì)胞存活率和LDH活性的影響
    3.4 AS-IV預(yù)處理對(duì) 1433η 蛋白表達(dá)的影響
    3.5 AS-IV預(yù)處理對(duì)ROS生成的影響
    3.6 AS-IV預(yù)處理對(duì)細(xì)胞線粒體膜電位（△Ψm）的影響
    3.7 AS-IV預(yù)處理對(duì)細(xì)胞凋亡的影響
第4章 討論
第5章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Astragaloside IV prevents lipopolysaccharide-induced injury in H9C2 cardiomyocytes[J]. WANG Shi-Guang,XU Yan,XIE Hao,WANG Wei,CHEN Xiao-Hu.  Chinese Journal of Natural Medicines. 2015(02)
[2]14-3-3參與apelin-13促進(jìn)大鼠血管平滑肌細(xì)胞增殖ERK1/2信號(hào)途徑研究（英文）[J]. 潘偉男,李峰,毛小環(huán),秦旭平,鄧水秀,封芬,陳鋒,李蘭芳,廖端芳,陳臨溪.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2011(12)
[3]Astragaloside IV Regulates Expression of ATP-sensitive Potassium Channel Subunits after Ischemia-reperfusion in Rat Ventricular Cardiomyocytes[J]. 韓向暉,劉萍,章怡祎,張娜,陳富榮,蔡玨峰.  Journal of Traditional Chinese Medicine. 2011(04)

碩士論文
[1]黃芪甲苷抗心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧損傷的保護(hù)機(jī)制研究[D]. 許旻.南昌大學(xué) 2013



本文編號(hào)：3367851