目的本研究通過體內(nèi)與體外實(shí)驗(yàn)。探討了何首烏生品及不同炮制品“時(shí)（炮制時(shí)間）-效-毒”的相關(guān)性,采用HPLC技術(shù)、細(xì)胞流式儀并且結(jié)合血液生化指標(biāo)、免疫組化及PCR技術(shù),對何首烏生品及不同時(shí)間炮制品的主要成分以及一些相關(guān)性指標(biāo)的變化進(jìn)行研究,并為臨床正確用藥提供理論支持。方法1.采用HPLC的方法,用色譜柱:HYPERSIL GOLD AQ 5UM（250*4.6MM）COLUMN。甲醇為A相,0.1%的甲酸水為B相進(jìn)行梯度洗脫,0¹9min,10%³6%A,90%⁶3%B;19³0min,36%⁷1%A,63%²9%B;30⁵0min,71%¹00%A,29%⁰%B;50⁶0min,100%A。色譜柱溫度:35℃;檢測波長:254 nm;流速:1.0 ml/min;進(jìn)樣量為10μL的方法對何首烏不同炮制品中蒽醌類、沒食子酸及二苯乙烯苷成分的含量進(jìn)行檢測。2.取42只SD大... 

【文章來源】：陜西中醫(yī)藥大學(xué)陜西省

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

何首烏幾種不同炮制品4中成分色譜圖（1.沒食子酸2.二苯乙烯苷3.大黃素4.大黃素甲醚）

陜西中醫(yī)藥大學(xué) 2019 屆碩士學(xué)位論文表 1 含藥血清對 HepG2 細(xì)胞存活率的影響別 OD 值 存活率（%血清組 0.504±0.122 98.67白組 0.482±0.069 95.46烏組 0.246±0.107**48.90 8h 組 0.285±0.063**56.60 16h 組 0.318±0.028**#63.13 32h 組 0.329±0.071**#65.39 48h 組 0.373±0.067**#74.18 72h 組 0.395±0.075**#78.41比較，**P<0.01，*P<0.05；與生首烏組比較，##P<0.01，#P<0.05。

A.空白對照組；B.生首烏組；C-G.清蒸 8h、16h、32h、48h、72h 組圖 1 含藥血清對 HepG2 細(xì)胞形態(tài)學(xué)的影響3.3 何首烏不同炮制品含藥血清對 HepG2 細(xì)胞凋亡的影響在給藥培養(yǎng) 24h 后的六孔板中，用不含 EDTA 的胰酶將照 AnnexinV-PI 試劑盒說明書進(jìn)行操作后進(jìn)行檢測。細(xì)胞流式現(xiàn)不同程度的早期和晚期凋亡還有細(xì)胞壞死，空白大鼠血清組統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05），說明 10%的胎牛血清和 15%的空白大鼠而生首烏組、清蒸清蒸 8h、16h、32h、48h 及 72h 組與空白組學(xué)的差異（P<0.01），主要出現(xiàn)在 AV+、PI-區(qū)域，說明清蒸血清都會(huì)使 HepG2 細(xì)胞產(chǎn)生相應(yīng)的凋亡。清蒸組與生首烏組統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01）。流式儀檢測的標(biāo)準(zhǔn)：AV-、PI-區(qū)域表示PI-區(qū)域表示的早期凋亡的細(xì)胞；AV-、PI+區(qū)域表示的是壞死的表示的晚期凋亡的細(xì)胞。如圖 2 所示：

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]何首烏中相關(guān)蒽醌類化合物抗癌作用的研究進(jìn)展[J]. 朱藝,李琛,李洪亮,汪選斌.  中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2019(18)
[2]何首烏的臨床應(yīng)用及其相關(guān)肝損傷的研究進(jìn)展[J]. 陶麗宇,高月求,王建茹,周昕.  湖南中醫(yī)雜志. 2018(11)
[3]Cocktail法評價(jià)敵敵畏對大鼠CYP450亞型酶活性的影響[J]. 李君樺,吳海亞,陳東鑫,耿培武,莊開贊,周華.  中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志. 2018(16)
[4]何首烏不同提取物致大鼠肝損傷的血清生物標(biāo)志物研究[J]. 段小芳,段思明,李賀芝,王茜.  河北中醫(yī)藥學(xué)報(bào). 2018(04)
[5]川芎嗪誘導(dǎo)小鼠肝藥酶Cyp3a11的作用及其機(jī)制研究[J]. 張軼雯,鐘里科,樓倩雯,潘宗富,方羅,黃萍.  中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué). 2018(07)
[6]大黃蒽醌類化學(xué)成分和藥理作用研究進(jìn)展[J]. 王亦君,馮舒涵,程錦堂,陳莎.  中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2018(13)
[7]何首烏化學(xué)成分和藥理作用[J]. 趙明宇.  北方藥學(xué). 2018(03)
[8]何首烏不同炮制品水提物對小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)研究[J]. 王燕青,石亮,呂莉莉,黃娜娜,郭欣,蔡濤濤,李曉宇,孫蓉.  中國藥物警戒. 2017(10)
[9]肝臟藥物代謝酶CYP450與中藥肝毒性的關(guān)系[J]. 侯健,孫娥,宋捷,楊蕾,張振海,寧青,賈曉斌.  中國中藥雜志. 2016(15)
[10]何首烏下調(diào)1型糖尿病大鼠MLCK表達(dá)及其對認(rèn)知功能的影響[J]. 任智晶,羅武,朱麗英,何玉,常嘯,潘衛(wèi),李興.  時(shí)珍國醫(yī)國藥. 2015(06)

博士論文
[1]何首烏致肝損傷成分及作用機(jī)制研究[D]. 林龍飛.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2016

碩士論文
[1]基于肝細(xì)胞毒價(jià)檢測的何首烏質(zhì)量控制方法研究[D]. 呂旸.北京化工大學(xué) 2013
[2]廣西何首烏中蒽醌類化合物GXHSWAQ-1單體對鼻咽癌的放射增敏作用及其機(jī)制[D]. 劉瑛.廣西醫(yī)科大學(xué) 2009



本文編號(hào)：3324012