目的:探析青藤堿對(duì)DC細(xì)胞TLR2、TLR4受體的作用和對(duì)MyD88依賴信號(hào)途徑或MyD88非依賴信號(hào)途徑的影響,進(jìn)而明確青藤堿對(duì)DC細(xì)胞活化的抑制機(jī)制。從而推斷青藤堿在治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎過(guò)程中的關(guān)鍵作用點(diǎn),為類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的治療以及新藥的開(kāi)發(fā)提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。方法:1、利用Western-Blot檢測(cè)DC2.4細(xì)胞TLR2、TLR4、MyD88和TRIF的表達(dá)變化;2、qPCR實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)DC2.4細(xì)胞TLR2 mRNA、TLR4 mRNA、MyD88 mRNA和TRIF mRNA的表達(dá)變化。結(jié)果:1、通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),LPS刺激后的DC2.4細(xì)胞模型組內(nèi)TLR2、TLR4、MyD88和TRIF蛋白的表達(dá)與空白組比較均有明顯的升高,而青藤堿干預(yù)后的藥物組上述相關(guān)蛋白的表達(dá)均有不同程度的下降;2、LPS刺激DC2.4細(xì)胞過(guò)高地表達(dá)TLR2、TLR4、MyD88和TRIF相應(yīng)的mRNA,青藤堿作用于藥物處理組后,其使得上述相關(guān)蛋白隨之降低,如2^{-（35）（35）Ct}值TLR2 mRNA模型組表達(dá)量是空白組的3.50倍,青藤堿藥物處理組是空白對(duì)照組的1.40倍,TLR4 ... 

【文章來(lái)源】：成都中醫(yī)藥大學(xué)四川省

【文章頁(yè)數(shù)】：103 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

BCA標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖 4、倒置顯微鏡下小鼠 DC2.4 細(xì)胞，(40Xt 法檢測(cè) TLR2 蛋白的表達(dá)，內(nèi)參照β-Actin 蛋白在空白對(duì)照組、LPS 模在 DC2.4 細(xì)胞中均有表達(dá)，其在空白對(duì)照組、異，其顯影成相結(jié)果如下圖（圖 5，圖 6），各β-Actin 蛋白顯影灰度值作比值，其灰度比值結(jié)。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng) SPISS 19 均值比較單因素統(tǒng)計(jì)具有差異，其 P<0.05；LPS 模型組和 LPS+SP<0.05。

內(nèi)參蛋白β-Actin顯影成相圖

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]青藤堿對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者外周血單核細(xì)胞TLR4、MyD88及NF-κB表達(dá)的影響[J]. 姚茹冰,王圓圓,蔡輝.  中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào). 2016(24)
[2]TLR4信號(hào)通路及其負(fù)調(diào)控研究進(jìn)展[J]. 吳疑,匡梅,周紅,潘夕春.  現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生. 2016(18)
[3]Toll樣受體的研究進(jìn)展[J]. 王晶晶,楊宇萍.  世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘. 2016(43)
[4]肺腺癌患者與健康人體外培養(yǎng)DC細(xì)胞的比較[J]. 鈕洪艷,王曉麗,席雪芹,金躍,朱逸.  現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2016(11)
[5]青藤堿抑制類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎骨破壞的研究進(jìn)展[J]. 張群燕,姚茹冰,蔡輝.  安徽醫(yī)藥. 2016(01)
[6]艾灸對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎大鼠關(guān)節(jié)滑膜組織Toll樣受體4-骨髓樣分化因子88-核轉(zhuǎn)錄因子-κB信號(hào)通路的影響[J]. 袁娟,胡玲,宋小鴿,唐照亮,張傳英,余爽,尤元梅.  針刺研究. 2015(03)
[7]青藤堿抑制體外培養(yǎng)DC2.4樹(shù)突狀細(xì)胞的生物學(xué)活性并減少炎癥因子分泌[J]. 王竹,王冰冰,官菊梅,張欣悅,王憶梅,高永翔.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2015(05)
[8]青藤堿對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細(xì)胞MyD88、TRAF-6表達(dá)的影響[J]. 張洪長(zhǎng),劉明昕,張瑩,王恩鵬,陳港,姜鴻遠(yuǎn).  中國(guó)免疫學(xué)雜志. 2015(04)
[9]青藤堿對(duì)佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠TLR4/MyD88信號(hào)通路的影響[J]. 姚茹冰,牟慧,趙智明,蔡輝.  蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2015(04)
[10]類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中醫(yī)證候分類臨床文獻(xiàn)研究[J]. 侯雷,馬武開(kāi).  中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2014(03)

博士論文
[1]青藤堿對(duì)肺癌細(xì)胞系NCI-H460增殖、凋亡的影響及其機(jī)制的研究[D]. 姜廷樞.中國(guó)醫(yī)科大學(xué) 2010

碩士論文
[1]青藤堿抗兔頸動(dòng)脈粥樣硬化的環(huán)氧化酶-2通路機(jī)制研究[D]. 姚潔.成都中醫(yī)藥大學(xué) 2012
[2]青藤堿抑制Hela細(xì)胞增殖與誘導(dǎo)凋亡的PI3K/Akt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路研究[D]. 唐宋琪.成都中醫(yī)藥大學(xué) 2009
[3]青藤堿的結(jié)構(gòu)修飾及其抗炎活性研究[D]. 羅娟.四川大學(xué) 2007
[4]青藤堿衍生物的合成及鎮(zhèn)痛抗炎作用的定量構(gòu)效關(guān)系研究[D]. 羅烈.武漢大學(xué) 2005



本文編號(hào)：3124831