目的:基于Caco-2細(xì)胞模型對(duì)蒼術(shù)中的三種單體化合物的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)行研究,明確三種單體化合物的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)理,為蒼術(shù)藥材的吸收機(jī)制的深入研究提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。材料與方法:材料:蒼術(shù)藥材:為湖北英山產(chǎn),經(jīng)遼寧中醫(yī)藥大學(xué)藥用植物教研室王冰教授鑒定為菊科植物茅蒼術(shù)（Atractylodes lancea（Thunb.）DC.）的根莖。方法:蒼術(shù)藥材采用80%乙醇滲漉提取,依次采用石油醚（60-90℃）、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取,采用柱色譜、制備薄層、制備液相等手段對(duì)蒼術(shù)石油醚層中的化學(xué)成分進(jìn)行系統(tǒng)分離,制備與純化,并采用理化性質(zhì)、1H-NMR、13C-NMR譜數(shù)據(jù)等方法鑒定化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu);采用“21天造模法”建立Caco-2細(xì)胞單層模型,并通過(guò)細(xì)胞形態(tài)學(xué)考察,堿性磷酸酶活性測(cè)定,測(cè)量跨膜電阻值,標(biāo)志物測(cè)漏檢查的方法對(duì)Caco-2細(xì)胞模型的完整性進(jìn)行考察與評(píng)價(jià)。采用CCK-8法檢測(cè)不同濃度的炮制前后蒼術(shù)水煎液,乙醇提取液以及幾種蒼術(shù)單體化合物對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞Caco-2增殖活性的抑制作用,分別計(jì)算不同藥物對(duì)人結(jié)腸癌Caco-2細(xì)胞存活率的影響。采用Caco-2細(xì)胞模型對(duì)蒼術(shù)中三種單體化合物進(jìn)行了... 

【文章來(lái)源】：遼寧中醫(yī)藥大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】：97 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

Caco-2細(xì)胞生長(zhǎng)至21d的顯微鏡照片

圖 2-1 Caco-2 細(xì)胞生長(zhǎng)至 21d 的顯微鏡照片2.跨膜電阻的測(cè)定結(jié)果：于第 4、7、10、14、21 d，用細(xì)胞電阻儀測(cè)定 TEER，Caco-2 細(xì)胞電阻值逐漸增加，培養(yǎng)至 21d 時(shí)，TEER 為 367±24 Ω/cm-2，大于 300 Ω/cm-2，表明 Caco-2細(xì)胞模型足夠的完整，且緊密連接。（圖 2-2）

Caco-2細(xì)胞對(duì)生蒼術(shù)乙醇提取液的敏感程度

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號(hào)：3111065