目的腫瘤疾病是一種嚴(yán)重危害人類健康的疾病。美洲大蠊活性部位C-Ⅱ 3在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方面都表現(xiàn)出良好的細(xì)胞毒和腫瘤抑制活性;潰瘍性結(jié)腸炎具有病程遷移、易反復(fù)發(fā)作、癌變傾向等特點(diǎn),被世界衛(wèi)生組織列為現(xiàn)代難治疾病之一。同樣源于美洲大蠊的活性部位TF在整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中顯示了對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎的治療有良好的效果。本課題以美洲大蠊粗浸膏為實(shí)驗(yàn)原料,分別對(duì)抗腫瘤肽類活性部位C- Ⅱ3和抗?jié)冃越Y(jié)腸炎活性部位TF進(jìn)行化學(xué)成分研究,并探討其主要成分肽類物質(zhì)的分離純化方法,為其后續(xù)純化工藝優(yōu)化和藥效學(xué)評(píng)價(jià)提供參考和物質(zhì)基礎(chǔ)。方法采用了系統(tǒng)分離純化方法,探索抗腫瘤活性部位CⅡ-3中多肽物質(zhì)的最佳分離純化方案,包括:采用電泳方法對(duì)C-Ⅱ3進(jìn)行實(shí)驗(yàn),初步確定樣品分子量區(qū)間;采用凝膠色譜法對(duì)樣品C-Ⅱ1 3進(jìn)行實(shí)驗(yàn),探索分離樣品C-Ⅱ 3使用的凝膠色譜填料及其分離條件;將葡聚糖凝膠初步分離的樣品進(jìn)行脫鹽處理,采用離子交換柱進(jìn)行試驗(yàn),探索其最佳分離純化條件;采用反相高壓液相色譜對(duì)樣品C - Ⅱ 3用葡聚糖凝膠分離后的組分再次分離,研究樣品反相高壓液相的分離工藝。先采用茚三酮顯色法和福林酚法分別測(cè)定美洲大蠊抗?jié)冃越Y(jié)... 

【文章來(lái)源】：大理大學(xué)云南省

【文章頁(yè)數(shù)】：90 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－２?Ｃ－ＩＩ?３在分離膠濃度為１２％，濃縮膠濃度為３．５％的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ電泳圖??

Ｃ－Ｉｔ３（ｔＤＴＴ）?Ｃ－ＩＩ３（不含?ＤＴＴ）??圖１－３?Ｃ－ＩＩ３在分離膠濃度為１５％，濃縮膠濃度為３．５％的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ電泳圖??由圖１－３可得，在考馬斯亮藍(lán)Ｒ－２５０的染色條件下，即使上樣濃度增加一倍??也沒(méi)有較大分子量的蛋白多肽條帶顯出，含有ＤＴＴ的樣品和不含ＤＴＴ的樣品也??保持一致。??圖１－２和圖１－３均表明，樣品Ｃ－ＩＩ?３的分子量大部分都在ｌＯＫＤａ以下，僅??有很少量的蛋白多肽分子量在２５ＫＤａ左右，這個(gè)結(jié)果顯示樣品可以用反相高??壓液相色譜進(jìn)行分離而不會(huì)引起蛋白多肽得結(jié)構(gòu)變化，從而導(dǎo)致樣品失活。但??此結(jié)果并不足確定用來(lái)進(jìn)行分離純化實(shí)驗(yàn)的葡聚糖凝膠，如需進(jìn)一步確定樣品??多肽分子量區(qū)間，就要運(yùn)用Ｔｒｉｃｉｎｅ－ＳＤＳ－ＰＡＧＥ電泳體系。??２０．１ＫＤ３?ｎｍｍ??１４．４ＫＤａ?—??７．８ＫＤａ??５．８ＫＤａ??３．３ＫＤａ??Ｍａｒｋｅｒ?粗浸音?Ｃ－ＩＩ３??圖１－４?Ｃ－ＩＩ３在分離膠濃度２０％，間隙膠濃度為１０％，濃縮膠濃度為３．５％的??Ｔｒｉｃｉｎｅ－ＳＤＳ－ＰＡＧＥ?電泳圖??樣品上樣量為２０ＵＬ

?ｉ〇ｉｉｔ??Ｃ－Ｉｔ３（ｔＤＴＴ）?Ｃ－ＩＩ３（不含?ＤＴＴ）??圖１－３?Ｃ－ＩＩ３在分離膠濃度為１５％，濃縮膠濃度為３．５％的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ電泳圖??由圖１－３可得，在考馬斯亮藍(lán)Ｒ－２５０的染色條件下，即使上樣濃度增加一倍??也沒(méi)有較大分子量的蛋白多肽條帶顯出，含有ＤＴＴ的樣品和不含ＤＴＴ的樣品也??保持一致。??圖１－２和圖１－３均表明，樣品Ｃ－ＩＩ?３的分子量大部分都在ｌＯＫＤａ以下，僅??有很少量的蛋白多肽分子量在２５ＫＤａ左右，這個(gè)結(jié)果顯示樣品可以用反相高??壓液相色譜進(jìn)行分離而不會(huì)引起蛋白多肽得結(jié)構(gòu)變化，從而導(dǎo)致樣品失活。但??此結(jié)果并不足確定用來(lái)進(jìn)行分離純化實(shí)驗(yàn)的葡聚糖凝膠，如需進(jìn)一步確定樣品??多肽分子量區(qū)間，就要運(yùn)用Ｔｒｉｃｉｎｅ－ＳＤＳ－ＰＡＧＥ電泳體系。??２０．１ＫＤ３?ｎｍｍ??１４．４ＫＤａ?—??７．８ＫＤａ??５．８ＫＤａ??３．３ＫＤａ??Ｍａｒｋｅｒ?粗浸音?Ｃ－ＩＩ３??圖１－４?Ｃ－ＩＩ３在分離膠濃度２０％


本文編號(hào)：3026034