目的:建立髓核細(xì)胞退變的細(xì)胞模型,在前期研究基礎(chǔ)上進(jìn)一步驗(yàn)證miRNA-125a-5p的表達(dá)與椎間盤(pán)退變性疾病的關(guān)系,并檢測(cè)髓核細(xì)胞中miRNA-125a-5p介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的表達(dá)變化。通過(guò)黃芪甲苷干預(yù)IL-1誘導(dǎo)退變的髓核細(xì)胞,探討黃芪甲苷對(duì)miRNA-125a-5p及其靶基因介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的表達(dá)影響,揭示黃芪甲苷對(duì)髓核細(xì)胞凋亡的影響。方法:采用IL-1誘導(dǎo)髓核細(xì)胞的退變,試驗(yàn)共分為五組:（1）正常對(duì)照組;（2）IL-1β模型組;（3）IL-1β+20mg/L黃芪甲苷組;（4）IL-1β+40mg/L黃芪甲苷組;（5）IL-1β+80mg/L黃芪甲苷組;CCK-8法檢測(cè)黃芪甲苷對(duì)人髓核細(xì)胞增殖的作用;RT-PCR檢測(cè)黃芪甲苷對(duì)miRNA-125a-5p及其靶基因介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的表達(dá)影響;Western blot檢測(cè)髓核細(xì)胞中P21、Caspase-3、Bcl-2及Bax的蛋白表達(dá)變化結(jié)論:黃芪甲苷對(duì)促進(jìn)人髓核細(xì)胞增殖作用明顯,且這種增殖作用受到黃芪甲苷的濃度及干預(yù)時(shí)間的影響,其中以IL-1β+80mg/L黃芪甲苷組干預(yù)72h后對(duì)髓核細(xì)胞的增殖作用最明顯。黃芪甲苷可以調(diào)控m... 

【文章來(lái)源】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：55 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
第一章 文獻(xiàn)研究
    第一節(jié) 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)椎間盤(pán)退變性疾病的認(rèn)識(shí)
        一、椎間盤(pán)退變理論起源、發(fā)展及流行病學(xué)
        二、椎間盤(pán)組織結(jié)構(gòu)與功能概要
        三、椎間盤(pán)退變的病因的研究進(jìn)展
        四、椎間盤(pán)退變疾病治療的研究進(jìn)展
        五、現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)椎間盤(pán)退變性疾病的防治展望
    第二節(jié) 中醫(yī)對(duì)椎間盤(pán)退變性疾病的認(rèn)識(shí)
        一、中醫(yī)對(duì)椎間盤(pán)退變性疾病的病因病機(jī)認(rèn)識(shí)
        二、中醫(yī)藥對(duì)椎間盤(pán)退變性疾病的防治
        三、小結(jié)與展望
    第三節(jié) MICRORNA的研究進(jìn)展
        一、MiRNA的生物學(xué)起源
        二、miR-125a的生物學(xué)作用
        三、基于MiRNA的前期研究進(jìn)展
        四、小結(jié)與展望
    第四節(jié) 黃芪甲苷的研究進(jìn)展
        一、中藥黃芪的藥理作用及臨床運(yùn)用
        二、黃芪甲苷的研究進(jìn)展
        三、小結(jié)與展望
第二章 實(shí)驗(yàn)研究
    第一節(jié) 研究背景
    第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)材料
        一、實(shí)驗(yàn)對(duì)象
        二、主要試驗(yàn)試劑與材料（見(jiàn)表2）
        三、主要實(shí)驗(yàn)儀器
    第三節(jié) 試驗(yàn)方法
        一、人髓核細(xì)胞株的復(fù)蘇、傳代及模型構(gòu)建
        二、CCK-8檢測(cè)細(xì)胞活力
        三、Westernblot檢測(cè)相關(guān)蛋白
        四、PCR檢測(cè)相關(guān)基因表達(dá)
        五、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    第四節(jié) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        一、CCK-8檢測(cè)細(xì)胞活力
        二、髓核細(xì)胞中miRNA-125a-5p的表達(dá)變化
        三、髓核細(xì)胞中基因表達(dá)變化
        四、髓核細(xì)胞中蛋白表達(dá)變化
    第五節(jié) 討論與小結(jié)
結(jié)語(yǔ)
參考文獻(xiàn)
附錄
在校期間發(fā)表論文情況
致謝
附件


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]黃芪甲苷治療慢性腎臟疾病研究進(jìn)展[J]. 韓海燕.  長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2017(04)
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[4]miR-21通過(guò)下調(diào)ADAMTS-1表達(dá)促進(jìn)大鼠肺纖維化[J]. 劉理靜,尹輝明,黃民江,賀兼斌,易高眾,王在巖,錢紅.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2016(12)
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[8]椎旁神經(jīng)阻滯對(duì)中醫(yī)綜合治療腰椎間盤(pán)突出癥的增效作用[J]. 張曉磊,薛小軍,楊智強(qiáng),鄭文亮.  牡丹江醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2016(01)
[9]黃芪甲苷聯(lián)用維生素D3對(duì)二維回轉(zhuǎn)培養(yǎng)大鼠原代成骨細(xì)胞增殖的影響[J]. 王婷梅,梅其炳,曲麗娜,李瑩輝.  化學(xué)與生物工程. 2016(02)
[10]用中藥離子導(dǎo)入療法和中醫(yī)正骨手法治療腰椎間盤(pán)突出癥的效果探析[J]. 劉繼巍.  當(dāng)代醫(yī)藥論叢. 2015(23)



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