目的 研究醒腦靜注射液對蛛網(wǎng)膜下腔出血（Subarachnoid Hemorrhage,SAH）大鼠模型海馬區(qū)神經(jīng)細胞自噬的影響。方法 實驗第一部分、選取36只健康清潔級雄性Sprague-Dawley大鼠（350±30g）,依次編號后使用隨機數(shù)字表法將大鼠等分為假手術組（Sham組）、蛛網(wǎng)膜下腔出血組（SAH組）、SAH+醒腦靜注射液治療組（藥物組）三個組。Sham組僅將纖芯插入頸內(nèi)動脈而不刺破血管,SAH模型參考文獻采用頸內(nèi)動脈刺破法制備,藥物組在造模成功后給予醒腦靜注射液腹腔內(nèi)注射干預,選取造模成功后24小時為時間節(jié)點。穿梭箱實驗觀察各組模型大鼠逃到安全區(qū)的時間（ERT）以及逃到安全區(qū)的次數(shù)（ERN）,對比各組大鼠學習記憶等行為學功能的改變;HE染色觀察各組模型大鼠海馬區(qū)神經(jīng)細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)變化;免疫組織化學染色及Western Blot實驗分析Beclin-1和LC3-II蛋白在大鼠海馬區(qū)神經(jīng)細胞的表達情況。實驗第二部分、選取40只健康清潔級雄性Sprague-Dawley大鼠（350±30g）,依次編號后使用隨機數(shù)字表法將大鼠等分為3-MA（3-甲基腺嘌呤）組、3-MA+醒腦靜注... 

【文章來源】：華北理工大學河北省

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

頸部血管及神經(jīng)解剖

破血管后大鼠出現(xiàn)呼吸節(jié)律改變及肢體輕微抽搐；3、大鼠的瞳孔表現(xiàn)出暫時性的擴大；4、解剖腦組織后可見蛛網(wǎng)膜下腔內(nèi)血凝塊，尤其是在基底池和環(huán)池比較明顯[30]，這是金標準。（見圖 7）模型制備過程中的注意事項：1、大鼠在受到刺激后具有很強的攻擊性，在麻醉及腹腔注射的過程中一定要注意防護，要避免被其咬傷、抓傷；2、手術過程盡量在顯微鏡下操作并使用顯微手術器械，嚴格沿肌肉間隙分離，注意避免損傷神經(jīng)血管；3、游離頸叢神經(jīng)時動作要輕柔，避免拉斷頸叢神經(jīng)纖維；4、頸內(nèi)動脈的分離盡量要到達其進入顱內(nèi)的入口處，這樣就可以完全暴露頸內(nèi)動脈于入顱前發(fā)出的分支翼腭支，當纖芯穿入時就能夠使用針式顯微神經(jīng)剝離子協(xié)助纖芯順利進入顱內(nèi)，避免盲穿時穿入翼腭支或因反復穿刺而刺穿血管，從而提高模型的成功率。要避免結(jié)扎翼腭支，而增大模型大鼠的死亡風險；5、穿刺的時間一定要盡量縮短，頸總動脈的阻斷時間最好在 2-3 分鐘內(nèi)[31]，以防出現(xiàn)腦缺血及缺血再灌注損傷，而影響實驗結(jié)果。6、造模后一定要充分復蘇后再送回飼養(yǎng)室，以防大鼠因體溫過低、呼吸抑制等死亡。

圖 3 頸外動脈結(jié)扎 圖 4 剪斷的頸外動脈Fig.3 ligation of external carotid artery Fig.4 The external carotid artery is severed

【參考文獻】：
期刊論文
[1]自噬與中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病研究進展[J]. 李曉瓊,何玲玲,李新毅.  中風與神經(jīng)疾病雜志. 2018(10)
[2]內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激與蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷的相關性研究[J]. 齊文濤,曹德茂,彭愛軍,王友偉,武永康.  醫(yī)學研究雜志. 2018(08)
[3]天麻鉤藤飲對帕金森病模型大鼠紋狀體α-突觸核蛋白含量及自噬相關蛋白Beclin1、LC3B表達的影響[J]. 彭偉,張立娟,張倩,王康鋒,李思毅,楊潔,王海燕.  中醫(yī)雜志. 2018(14)
[4]動脈瘤性蛛網(wǎng)膜下腔出血腦血管痙攣的研究進展[J]. 孫悅?cè)A,韓金濤.  中國微創(chuàng)外科雜志. 2018(06)
[5]醒腦靜注射液對顱腦外傷大鼠腦細胞凋亡及相關凋亡蛋白影響的研究[J]. 趙軍蒼,王獻明,張瑩瑩,郭宏盛.  現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2018(16)
[6]蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷的研究進展[J]. 單宏寬,劉剛.  分子影像學雜志. 2018(01)
[7]雷帕霉素對蛛網(wǎng)膜下腔出血大鼠早期腦損傷的保護作用[J]. 馬仁政,曹守明,賽因巴雅爾,李建民.  腦與神經(jīng)疾病雜志. 2018(02)
[8]大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后海馬區(qū)磷酸化細胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶1/2表達與細胞自噬的關系[J]. 安朝旺,劉瑤,任藝藝,李建民,孫竹梅,趙雅寧.  福建醫(yī)科大學學報. 2017(06)
[9]頸內(nèi)動脈刺破法制作大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血模型[J]. 劉振剛,高建亮,孫林林,郭鑫,王萌,龐智寅,付愛軍,李建民,田景瑞.  中國比較醫(yī)學雜志. 2017(06)
[10]ERK1/2和PI3-K通路在蛛網(wǎng)膜下腔出血大鼠海馬區(qū)對神經(jīng)細胞自噬的調(diào)控作用[J]. 趙雅寧,孫竹梅,趙旭,劉俊杰,李建民,薛承景.  神經(jīng)解剖學雜志. 2017(02)

博士論文
[1]硫化氫對蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷的影響及其機制的研究[D]. 崔永華.蘇州大學 2016

碩士論文
[1]蛛網(wǎng)膜下腔出血大鼠海馬區(qū)ROCK2信號通路對自噬的影響[D]. 孫林林.華北理工大學 2018
[2]mTOR信號通路在蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷中的作用及機制研究[D]. 徐祥.蘇州大學 2015



本文編號：2941940