我國是乙型肝炎高地方性流行區(qū),并且每年死于肝硬化和肝細(xì)胞癌等乙型肝炎相關(guān)疾病的患者在不斷增多,肝纖維化是慢性乙型肝炎發(fā)展到肝硬化的必經(jīng)階段,如何防治乙肝已經(jīng)成為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的重要問題。慢性乙型肝炎患者大多數(shù)合并有肝鐵代謝紊亂,過量的鐵在肝臟中沉積,加重肝臟功能損害,從而加快慢性乙型肝炎肝纖維化向肝硬化、肝癌轉(zhuǎn)化的進(jìn)程。如果能有效地抑制這個(gè)過程,也就延緩了患者病情惡化的進(jìn)程,以此達(dá)到提高患者生活質(zhì)量,延長患者生命的目的。芪珠方是臨床驗(yàn)方,用于治療慢性乙型肝炎具有良好的療效,但其治療慢性乙型肝炎的機(jī)制尚不明確。有文獻(xiàn)報(bào)道芪珠方對慢性肝病抗肝纖維化作用機(jī)理之一可能在于通過減輕肝細(xì)胞損傷,保護(hù)肝細(xì)胞,減輕炎癥反應(yīng),從而減少了肝纖維化的激發(fā)因素,抑制了膠原合成。本文選取方中重要組成成分黃芪的有效成分黃芪甲苷,分別對芪珠方和黃芪甲苷進(jìn)行研究,以鐵右旋糖苷作為誘導(dǎo)劑,建立肝鐵超載小鼠模型和細(xì)胞模型,研究芪珠方及黃芪甲苷對鐵超載所致肝細(xì)胞損傷的保護(hù)作用。在小鼠體內(nèi)模型中,給予芪珠方組與陽性對照相比較,總鐵結(jié)合力上升,血清轉(zhuǎn)鐵蛋白及ALT、AST下降,芪珠方可抑制肝臟中鐵含量的升高,緩解由鐵超載引起的肝臟鐵聚積現(xiàn)象,鐵超載導(dǎo)致肝損傷可能跟脂質(zhì)過氧化、蛋白質(zhì)硝化密切相關(guān)而芪珠方表現(xiàn)出良好的抗氧化及抗硝化作用,從而有效地逆轉(zhuǎn)鐵超載引起的肝損傷。體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中,給予芪珠方后,GSH水平隨著芪珠方劑量的增加而顯著升高;ALT、AST、MDA水平隨著芪珠方劑量的增加而顯著降低;說明芪珠方可有效抑制鐵超載引起的脂質(zhì)過氧化。T-BIL水平隨著芪珠方劑量的增加而顯著降低;結(jié)果說明鐵含量過多會(huì)造成肝細(xì)胞損傷,而芪珠方可改善鐵超載引起的肝細(xì)胞損傷。最后再利用黃芪甲苷作用于鐵超載所致肝損傷小鼠模型,鐵超載模型組小鼠血清中AST、ALT的含量均顯著高于空白對照組,血清鐵含量較鐵超載模型組顯著降低,而TIBC顯著升高;MDA大幅上升,GSH明顯降低,說明鐵超載的肝臟組織有嚴(yán)重的脂質(zhì)過氧化損傷;不同劑量黃芪甲苷組的肝臟中MDA的濃度有不同程度的下降,而GSH的活性則顯著升高,可初步推斷肝臟的脂質(zhì)過氧化損傷減輕。說明不同濃度的黃芪甲苷對于鐵超載引起的脂質(zhì)過氧化損傷的緩解作用呈現(xiàn)一定的劑量趨勢,據(jù)此推測黃芪甲苷的保肝作用機(jī)制很可能與其抗氧化作用有關(guān)。
【學(xué)位單位】：江蘇大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R285.5
【部分圖文】：

芪珠方及其有效單體黃芪甲苷抗乙肝肝纖維化鐵代謝紊亂機(jī)制研究點(diǎn)，沒有出現(xiàn)纖維結(jié)蹄組織，也未觀察到水樣變性或者脂肪變性的現(xiàn)象，無組織增生以及細(xì)胞浸潤。在注射不同劑量的右旋糖酐鐵之后，可以觀察到不同程度上的肝細(xì)胞紊亂現(xiàn)象，出現(xiàn)變形或者壞死等情況，這說明鐵的代謝紊亂成功的導(dǎo)致了小鼠的纖維化模型。芪珠方給藥組可明顯改善上述病理改變，結(jié)果見圖 1。

Table 2 Determination of iron content in liver of mice in each group對照組 150-Fe 組 300-Fe 組 500-Fe Ironontent(μg/g)206.66±85.04443.33±40.41963.87±127.32**1433.60102.73*LBa 組 MBa 組 HBa 組Ironntent(μg/g)900.45±110.12&&703.33±134.28&&450.16±75.49&&&：與對照組相比，**P<0.01；***P<0.001；與模型組（500-Fe）相比，&P<0.&P<0.01，&&&P<0.001。

芪珠方及其有效單體黃芪甲苷抗乙肝肝纖維化鐵代謝紊亂機(jī)制研究2.4.4 免疫組化法檢測蛋白硝化的表達(dá)如下圖所示，采用化學(xué)方法對小鼠的肝臟組織進(jìn)行檢測，如圖 3 所示，圖中血管膜周圍棕黃色顆粒即為 3-NT，模型組中 3-NT 的含量明顯較正常組顯著增加，檢測結(jié)果說明鐵超載的現(xiàn)象會(huì)導(dǎo)致體內(nèi)的蛋白出現(xiàn)硝化的情況，給與芪珠方之后，硝化程度明顯下降。結(jié)果說明了鐵超載會(huì)導(dǎo)致肝臟內(nèi)部的蛋白硝化，而芪珠方可以改善這種癥狀。
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2888890