四葉參(Codonopsis lanceolata Benth.et Hook.f.)是一種民間的常用草藥,大量中藥古籍記載四葉參的確是具有下乳通經、治療產后缺乳的功效。多糖作為其中最主要的生物活性之一,被廣泛進行研究。而大量臨床數(shù)據(jù)表明肥胖降低了女性的母乳喂養(yǎng)成功率和哺乳期的母乳質量。但是,所涉及的機制和更好的預防性治療方案尚未完全了解�；诖�,本論文以四葉參總多糖(PCL)為實驗材料,主要研究PCL通過干預青春期6周、成熟期10周、懷孕7-9天、懷孕12-14天、泌乳第1天和泌乳第7天共六個時期來抑制由于高脂飲食誘發(fā)產生的導管發(fā)育緩慢、乳腺細胞增殖分化減弱、產后缺乳和乳汁成分質量下降的病狀。論文獲得的實驗結果主要有:(1)長時間的高脂飲食的確會影響小鼠乳腺導管生長,包括乳腺脂肪墊的過多堆積,以及乳腺導管的分布不均勻和發(fā)育受限的情況。通過全組織胭脂紅染色的實驗結果表明PCL可以顯著改善由于高脂飲食造成的小鼠乳腺導管密度下降、分支變少和分布不均勻的病狀。另外HE染色結果更進一步表明了PCL可以改善由于高脂飲食造成的小鼠乳腺導管上皮層厚度減少的現(xiàn)象。這些結果均表明PCL可以顯著改善由于高脂飲食造成的乳腺導管密度下降、分布不均勻以及發(fā)育受限的情況。(2)PCL可以改善由于高脂飲食誘導造成的小鼠乳腺導管上皮細胞增殖分化減弱的癥狀,從而達到促進小鼠乳腺發(fā)育的作用。通過α-SMA、KI67免疫組化的實驗結果表明PCL可以提高模型組小鼠乳腺肌上皮細胞和腔管內皮細胞線性包裹的完整性以及乳腺細胞的增殖程度。流式實驗結果表明對比低脂組小鼠乳腺,高脂飲食會造成乳腺基底細胞和腔管細胞比例發(fā)生異常變化,并且出現(xiàn)腔管祖細胞增多的現(xiàn)象。但是PCL可以明顯改善乳腺基底細胞和腔管細胞比例,并且降低腔管祖細胞數(shù)量進而達到促進腔管細胞發(fā)育成熟的作用。同時β-casein免疫組化結果進一步證明模型組腔管細胞在泌乳前期出現(xiàn)分化延遲以及泌乳后期出現(xiàn)分化程度偏低的現(xiàn)象,而PCL可以明顯提高腔管細胞在泌乳前期和泌乳后期的分化程度。這些結果均表明PCL可以顯著改善由于高脂飲食造成的導管上皮細胞增殖分化減弱的癥狀,同時促進腔管細胞的分化成熟,進而達到促進小鼠乳腺發(fā)育完成泌乳的過程。(3)PCL可以改善由于高脂飲食誘導造成的產后泌乳量降低、乳汁成分質量下降和后代仔鼠生長緩慢且存活率低的現(xiàn)象。通過統(tǒng)計泌乳量多少、產后仔鼠體重變化以及仔鼠存活率,發(fā)現(xiàn)高脂飲食誘導的小鼠產后泌乳量明顯低于低脂組和加糖干預組,并且模型組仔鼠體重也遠低于低脂組和加糖干預組,同時還造成后代仔鼠一定程度的死亡率。另外對產后乳汁主要成分甘油三酯、乳糖和酪蛋白進行含量分析,發(fā)現(xiàn)模型組乳汁的甘油三酯、乳糖和酪蛋白都低于低脂組和加糖干預組。這些結果均表明PCL可以改善由于高脂飲食誘導造成的小鼠產后缺乳、乳汁成分質量下降和后代仔鼠生長緩慢且存活率低的現(xiàn)象。(4)高脂飲食誘導造成的產后缺乳可以通過PCL干預產后泌乳調控的相關信號通路來進行改善。高脂飲食會導致小鼠血液中催乳素含量下降,進而影響下游一系列關鍵蛋白的基因表達和活性轉變,最后造成產后缺乳。本次實驗結果表明,對比模型組,發(fā)現(xiàn)PCL可以提高血清中催乳素的含量。并且通過Western-blot分析,發(fā)現(xiàn)PCL可以提高小鼠乳腺中pJAK2(磷酸化JAK2)、PRLR(催乳素受體)、p63的蛋白表達量,并且降低Nrg1的蛋白表達量。另外免疫組化結果表明,PCL可以提高pSTAT5(磷酸化STAT5)的表達,PCR結果顯示加糖干預組的ERBB4、p63和Gata-3的mRNA表達量都比模型組組要高,而加糖干預組的Nrg1的mRNA表達量比模型組要低。這些結果均表明,高脂飲食誘導造成的產后缺乳可以通過PCL干預產后泌乳調控的相關信號通路,從而促進乳腺細胞的增殖、分化、成熟達到最終可以分泌乳汁的效果。以上結果表明,PCL通過減少高脂飲食誘導造成的小鼠乳腺脂肪墊堆積過多,促進乳腺細胞的增殖和腔管細胞的分化成熟,最后達到改善產后缺乳的目的。
【學位單位】：合肥工業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：R285.5
【部分圖文】：

產率為 9.6%。由圖3.1 可得到回歸方程：A=0.0144C+0.1343，r=0.9926。A－吸光度，C－葡萄糖濃度(μg/ml)測得多糖含量為 58.9%。圖 3.1 總多糖含量測定標準曲線Fig 3.1 Standard curve for determination of total polysaccharide content3.2 四葉參總多糖 PCL 對小鼠體重、肝重以及腸系膜脂肪的影響從圖 3.2A 可以看出，喂養(yǎng)到不同時間段的小鼠因為飲食的不同，體重發(fā)生不同的變化。其中模型組因為采用 HFD 飼料喂養(yǎng)，體重在青春期 6 周、成熟期 10 周、懷孕 7-9 天(P7-9)、懷孕 12-14(P12-14)和泌乳第 1 天(L1)都是最大的，而 PCL 的干預能減輕這五個時期小鼠的體重。到泌乳第 7 天(L7)時，模型組因為產后缺乳而造成體重遠低于 LFD 喂養(yǎng)的低脂組，而 PCL 的干預能緩解這個現(xiàn)象。從圖 3.2B 也可以更直觀地看出

22圖 3.2 四葉參總多糖對小鼠體重、肝重以及腸系膜脂肪的影響Fig 3.2 Effect of PCL in body weight,Liver weight and Mesenteric adipose tissue weight of the mice

第三章 結果與分析3.3 肝臟以及腸系膜脂肪的 HE 染色從圖 3.3 可以看出，模型組通過高脂喂養(yǎng)后，肝臟產生了很多空泡。并且模型組小鼠的腸系膜脂肪細胞的尺寸明顯要大于低脂組，但是 PCL 干預組小鼠的肝臟空泡明顯少于模型組，并且 PCL 干預組的腸系膜脂肪細胞的尺寸也比模型組的小。
【參考文獻】

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1 錢學艷;彭曉娉;周三;李英霞;劉占濤;劉明;;不同產地四葉參對產后缺乳大鼠的催乳作用研究[J];食品與藥品;2015年05期

2 董世起;李歡歡;卞藝斐;范迎賽;Nawras Hamdan;王婷婷;高宗勤;劉鐘杰;;催乳湯對產后缺乳大鼠乳腺的影響[J];中獸醫(yī)學雜志;2014年06期

3 李富英;;按摩治療產后缺乳98例[J];中國中醫(yī)藥現(xiàn)代遠程教育;2014年14期

4 彭巧;;推拿治療產后缺乳50例[J];中國中醫(yī)藥現(xiàn)代遠程教育;2013年13期

5 陶莉莉;孫冬梅;陳玉興;陳小平;;“姜醋”對產后缺乳大鼠的治療作用[J];江西中醫(yī)學院學報;2013年01期

6 陳寶芳;畢研文;楊永恒;宮俊華;劉政波;;泰山四葉參的研究進展[J];山東農業(yè)科學;2012年09期

7 張峰;高永峰;張繼國;;四葉參多糖對糖尿病大鼠血糖及免疫功能的影響[J];中國實驗方劑學雜志;2012年02期

8 王琪;李鳳英;;產后缺乳的辨證施治[J];內蒙古中醫(yī)藥;2011年16期

9 林巖;;產后抑郁對母乳喂養(yǎng)的影響[J];中國誤診學雜志;2011年13期

10 王德才;邱玉玉;張顯忠;高麗君;;泰山四葉參多糖對幼年小鼠和免疫抑制小鼠的免疫調節(jié)作用[J];時珍國醫(yī)國藥;2009年11期

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1 成翔飛;自擬化痰通乳湯治療產后缺乳的臨床療效觀察[D];黑龍江中醫(yī)藥大學;2015年

2 田娟;自擬疏解泌乳湯治療肝氣郁滯型產后缺乳的臨床觀察[D];黑龍江中醫(yī)藥大學;2013年

3 祁慧;補益氣血通絡下乳方治療產后缺乳（氣血虛弱型）的臨床觀察[D];湖北中醫(yī)藥大學;2012年

4 汪琴;低頻超聲促進哺乳期大鼠泌乳的實驗研究[D];重慶醫(yī)科大學;2012年

本文編號：2880690