目的觀察活血通督湯對大鼠急性脊髓損傷后肢功能的恢復及檢測損傷區(qū)腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)、神經(jīng)生長因子(NGF)和膠質膠質纖維酸性蛋白(GFAP)表達的影響,以探討該方的作用機制。方法將96只成年雌性SD大鼠按隨機數(shù)字法分為假手術組、模型組和活血通督湯組,每組32只,每組中再分為術后1d、3d、5d、7d四個亞組,每個亞組8只,造模前、后7d連續(xù)灌胃,活血通督湯組灌服活血通督湯,余兩組灌服等量生理鹽水,一日2次,假手術組只切開椎板顯露脊髓,余兩組采用改良Allen' s法制備脊髓損傷模型,術后8h、1d、3d、5d、7d行為學評分后,處死大鼠取材,采用尼氏染色法觀察脊髓及神經(jīng)元形態(tài)改變、免疫熒光法檢測脊髓損傷區(qū)BDNF、NGF和GFAP陽性細胞的表達、Western blot法和PCR法檢測損傷區(qū)BDNF、NGF和GFAP的表達情況。結果1、實驗動物行為學評分:脊髓損傷后模型組和活血通督湯組感覺和運動功能較假手術組差(P0.01),與模型組比較,術后5-7d,活血通督湯組感覺及運動功能的恢復較好(P0.05 或 P0.01);2、實驗動物形態(tài)學觀察:假手術組脊髓結構完整,灰白質界限清楚呈蝴蝶狀,神經(jīng)細胞內可見虎斑樣尼氏體,與模型組比較,活血通督湯組脊髓瘀血灶小,神經(jīng)細胞腫脹較輕,神經(jīng)元形態(tài)較好,未見空泡樣改變;3、實驗動物檢測結果:①與假手術組比較,模型組和活血通督湯組免疫熒光檢測BDNF、NGF和GFAP表達較高(P0.01),與模型組比較,活血通督湯組BDNF、NGF陽性細胞數(shù)表達較高(P0.01),GFAP陽性表達較低(P0.01);②脊髓損傷后BDNF、NGF和GFAP蛋白均有不同程度表達,在相同時間點,術后3-7d,模型組和活血通督湯組表達量較假手術組高(P0.01),與模型組比較,活血通督湯組BDNF、NGF蛋白表達較高(P0.05或P0.01),而GFAP蛋白表達較模型組低(P0.01);③PCR結果顯示,脊髓損傷后,BDNF mRNA、NGF mRNA和GFAP mRNA相對表達量均有不同程度升高,在相同時間點,術后3-7d,其表達量較假手術組高(P0.05或P0.01),與模型組比較,活血通督湯組GFAPmRNA相對表達量較低(P0.05或P0.01),余兩個指標表達量較高,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05或P0.01)。結論1、活血通督湯能促進急性脊髓損傷早期后肢感覺及運動功能的恢復;2、活血通督湯通過促進NGF、BDNF的分泌、抑制GFAP的表達,減少膠質瘢痕形成,從而有利于急性脊髓損傷的修復。
【學位單位】：福建中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：R285.5
【部分圖文】：

２實驗結果??２．?１感覺Ｒｅｕｔｅｒ評分和運動ＢＢＢ評分??脊髓損傷后的行為學評分方法包括運動ＢＢＢ評分法、斜板實驗評分法、感覺功能??Ｒｅｕｔｅｒ評分法、改良Ｔａｒｌｏｖ評分法以及聯(lián)合評分法，其中感覺Ｒｅｕｔｅｒ評分和運動ＢＢＢ??評分是研究脊髓損傷后常用的評分方法，國內外學者多采用該方法對脊髓損傷后功能恢??復進行評估，可初步觀察到受傷雌性大鼠功能恢復的一般狀況。成年雌性實驗大鼠急性??脊髓損傷后，因假手術組只摘除椎板，脊髓未受打擊損傷，其后肢感覺及運動功能正常，??基本不受手術創(chuàng)傷影響，而其余兩組實驗大鼠后肢均出現(xiàn)不同程度的感覺和運動功能障??礙；在脊髓損傷后的相同時間點與假手術組比較，模型組和活血通督湯組大鼠后肢感覺??及運動功能障礙差異明顯（Ｐ＜０．０１），與模型組比較，術后５ｄ和術后７ｄ活血通督湯組??感覺及運動功能的恢復較為明顯（Ｐ＜〇．〇５或Ｐ＜０．０１），詳見下表。??Ｉ??

成空泡樣結構，而用活血通督湯進行灌胃治療后，該組的脊髓橫斷面內表現(xiàn)為瘀血面積??較小、神經(jīng)元水腫較輕以及神經(jīng)元形態(tài)較好、未見空泡樣改變等特點，而在脊髓神經(jīng)細??胞受損修復過程中，仍可見部分脊髓神經(jīng)細胞核腫大以及核仁消失等表現(xiàn)。（見圖２）??１５??

少（Ｐ＜０．０１），與實驗大鼠中的模型組比較，用活血通督湯治療組腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子??和神經(jīng)生長因子陽性細胞數(shù)表達高于模型組，在數(shù)目上有明顯差異（Ｐ＜０．０１），但活血??通督湯組膠質纖維酸性蛋白陽性細胞表達數(shù)量比模型組低（Ｐ＜〇．〇ｌ）。（詳見下圖３、圖??４）??１６??
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本文編號：2872252