人參皂苷Rg5(Rg5)是從天然草本植物人參中提取的三萜類(lèi)皂苷,對(duì)一些癌細(xì)胞具有不同程度的抑制作用,是最有效的抗癌藥物之一。然而,Rg5的治療潛力受其低的生物利用度,短的生物半衰期和差的靶向性等因素的限制。在納米技術(shù)大背景下,研究工作者熱衷于將納米醫(yī)藥和腫瘤學(xué)相結(jié)合。納米藥物傳送系統(tǒng)具有靶向性,可降解性和生物相容性,有望克服Rg5的缺點(diǎn)。因此,我們制備了葉酸(FA)靶向的Rg5負(fù)載的牛血清白蛋白(BSA)納米顆粒,即FA-Rg5-BSA NPs。旨在增強(qiáng)Rg5藥效同時(shí),提高藥物的靶向遞送能力�；诖�,本文主要的實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果如下:(1)通過(guò)采用去溶劑化法制備Rg5-BSA NPs,利用酰胺化反應(yīng)在Rg5-BSA NPs表面的活性氨基上修飾葉酸分子,制備新型的Rg5靶向藥FA-Rg5-BSA NPs。采用單因素實(shí)驗(yàn)優(yōu)化Rg5-BSA NPs和FA-Rg5-BSA NPs的制備工藝。最終優(yōu)化的結(jié)果為:BSA濃度為15 mg/mL、BSA溶液pH值為9,水無(wú)水乙醇體積比1:3,Rg5與BSA摩爾比20:1,滴加乙醇速率為1.5-2.0 mL/min,攪拌轉(zhuǎn)速600 r/min,攪拌時(shí)間24 h,葉酸與BSA反應(yīng)的摩爾比為15:1,加入葉酸后反應(yīng)時(shí)間6 h,離心轉(zhuǎn)速10000 r/min。(2)制備出的FA-Rg5-BSA NPs水合直徑為201.4 nm,PDI為0.081,且zeta電位是負(fù)值。呈小圓球形、外表光滑。載藥量為12.64±4.02%,包封率為73.59±5.50%,葉酸偶聯(lián)量為94.6μg/mg BSA NPs。FA-Rg5-BSA NPs水溶液在4℃下能維持8周左右的穩(wěn)定性。在酸性(pH 5)條件,Rg5從顆粒中釋放速度要快于在中性環(huán)境。(3)體外細(xì)胞MTT毒性實(shí)驗(yàn)證明,與Rg5-BSA NPs和Rg5相比,FA-Rg5-BSA NPs在MCF-7細(xì)胞中具有更高的抑制癌細(xì)胞增殖的能力,而在正常L929細(xì)胞中具通過(guò)有較高的細(xì)胞存活率。說(shuō)明FA-Rg5-BSA NPs對(duì)不同種類(lèi)的細(xì)胞有一定的選擇性。通過(guò)Hoechst 33342及AO/EB熒光染色實(shí)驗(yàn)得出,在乳腺癌MCF-7細(xì)胞中FA-Rg5-BSA NPs比Rg5-BSA NPs和Rg5更能誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡。觀察FITC標(biāo)記Rg5-BSA NPs和FA-Rg5-BSA NPs進(jìn)入MCF-7細(xì)胞的攝取分布情況顯示,細(xì)胞攝取FITC標(biāo)記的FA-Rg5-BSA NPs的量要高于FITC標(biāo)記的Rg5-BSA NPs,提前加入游離葉酸時(shí),細(xì)胞攝取FITC標(biāo)記的FA-Rg5-BSA NPs的量明顯下降。這表明葉酸修飾的納米顆�？梢酝ㄟ^(guò)葉酸受體介導(dǎo)的內(nèi)吞途徑促進(jìn)細(xì)胞攝取。(4)在MCF-7異種移植腫瘤模型中體內(nèi)藥效研究表明,FA-Rg5-BSA NPs比Rg5-BSA NPs和Rg5更能抑制腫瘤生長(zhǎng),有較好的體內(nèi)抗腫瘤活性。體內(nèi)實(shí)時(shí)生物成像表明,FA-Rg5-BSA NPs比Rg5-BSA NPs有更好的腫瘤靶向作用。
【學(xué)位單位】：西北大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類(lèi)】：TQ464;TB383.1;R285
【部分圖文】：

圖 1.1 人參皂苷 Rg5 的分子結(jié)構(gòu)式Figure 1.1 Molecular structure of ginsenoside Rg5們對(duì)人參皂苷 Rg5 的理化性質(zhì)研究的較少，主要停留在如何的制備提取方法上。主要制備人參皂苷 Rg5 的方法有高溫蒸輔助提取法[15]，酸堿催化法[16]，酶降解，微生物轉(zhuǎn)化等。制路大致分為兩個(gè)策略：第一個(gè)是將人參研磨成人參粉，提取二轉(zhuǎn)化得到人參皂苷 Rg5；第二個(gè)方法是將人參蒸制成紅參或黑苷 Rg5。常見(jiàn)的分離純化人參皂苷 Rg5 方法有制備型高效液相層析法，大孔吸附樹(shù)脂法，薄層板法等[17]。苷 Rg5 的主要藥理活性 Rg5 具有獨(dú)特的生物學(xué)特性，能夠治療皮膚炎癥，肺部炎癥經(jīng)、肝作用，治療和預(yù)防心腦血管疾病，增強(qiáng)記憶力方面更是抗腫瘤效果更是得到了研究者們的追捧。早些年發(fā)現(xiàn)人參皂

圖 1.2 納米顆粒的基本特點(diǎn)[25]Figure 1.2 Basic characteristics of nanoparticles[25]白載藥納米顆粒的制備質(zhì)主要包括明膠，膠原蛋白，酪蛋白，牛血清白蛋白，人血清白蛋清蛋白和重組蛋白。研究工作者對(duì)基于蛋白質(zhì)的載藥系統(tǒng)研究做了白蛋白是制備納米顆粒的理想候選物。經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的探索，白蛋白

圖 1.3 不同形式的白蛋白納米顆粒[30]Figure 1.3 Different forms of albumin nanoparticles[30]蛋白載藥納米顆粒的優(yōu)勢(shì)目前為止，已經(jīng)報(bào)道了很多水不溶性藥物用白蛋白作為藥物傳送系統(tǒng)略是具有吸引力的，由于其高載藥量，增強(qiáng)藥物的溶解性，保護(hù)藥物腫瘤藥物的功效，非抗原性，生物降解性和無(wú)毒無(wú)害的屬性[33]。Zha的以BSA為載體的超順磁性氧化鐵SPION 雜化納米團(tuán)簇開(kāi)發(fā)用于肝成像，在體內(nèi)和離體實(shí)驗(yàn)中未觀察到毒性，具有生物相容性和穩(wěn)定性。備了兩種載有阿霉素的 HSA 納米顆粒，采用吸附或摻入基質(zhì)中的策略 150nm 和 500nm之間，負(fù)載率為 70-95%，與阿霉素溶液相比，載藥納不同的神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系的抗癌作用增強(qiáng)。白蛋白納米顆粒制劑可射藥物時(shí)產(chǎn)生不好的反應(yīng)。一個(gè)成功的模型是商用 Abraxane 制劑，用
【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張偉云;劉發(fā)貴;鄭毅男;;黑參加工過(guò)程中3種稀有人參皂苷的含量變化[J];時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥;2019年02期

2 劉博;俞婷;陳乃宏;;人參皂苷抗炎分子機(jī)制的研究進(jìn)展[J];神經(jīng)藥理學(xué)報(bào);2018年06期

3 吳曉民;趙丹;朱艷萍;王艷紅;;人參皂苷分析測(cè)定方法的研究進(jìn)展[J];上海中醫(yī)藥雜志;2018年05期

4 鄧碧華;朱俊;馬鶴毓;徐海;盧宇;;高效液相色譜法測(cè)定人參皂苷復(fù)乳中人參皂苷含量[J];中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志;2018年03期

5 方偉;;人參皂苷干預(yù)糖尿病微血管并發(fā)癥研究進(jìn)展[J];人參研究;2018年03期

6 李泰平;人參皂苷藥理活性的研究進(jìn)展[J];生物學(xué)教學(xué);2003年04期

7 崔杰;何正有;李維;劉婧;聶敏奎;;人參皂苷粉、銀杏葉提取物對(duì)雞胚絨毛尿囊膜血管新生的作用[J];成都大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2016年04期

8 魯文慧;楊辛欣;劉會(huì);曹麗珠;張嘯環(huán);;不同蒸制時(shí)間對(duì)紅參中人參皂苷及農(nóng)藥殘留的影響[J];人參研究;2016年04期

9 郭楓;劉煥煥;邱智東;王偉楠;;稀有人參皂苷的酶轉(zhuǎn)化研究進(jìn)展[J];生物技術(shù)進(jìn)展;2017年04期

10 丁苗苗;楊凱倫;王東亮;汝文文;黃瑞;劉志東;李楠;張兵;;超微粉碎對(duì)西洋參中人參皂苷體外溶出的影響研究[J];天津中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào);2016年05期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 劉彥楠;人參皂苷Rg5的制備及其抗胃癌和乳腺癌活性研究[D];西北大學(xué);2019年

2 洪一楠;人參皂苷Rk1抗乳腺癌作用及其分子機(jī)制[D];西北大學(xué);2019年

3 紀(jì)瑞鋒;內(nèi)外源性人參皂苷對(duì)人參端粒長(zhǎng)度的影響及其機(jī)制初探[D];中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院;2019年

4 褚文麗;人參皂苷Rg3干預(yù)實(shí)驗(yàn)性脈絡(luò)膜新生血管形成的作用研究[D];中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院;2019年

5 陳粼波;人參皂苷Rg1延緩Nestin-GFP轉(zhuǎn)基因小鼠衰老及調(diào)控神經(jīng)干細(xì)胞衰老機(jī)制的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2017年

6 陳衛(wèi)文;人參皂苷Rh2抑制肝癌細(xì)胞HepG2的增殖和遷移及機(jī)制研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2018年

7 楊鶴;人參莖葉皂苷對(duì)幾種蔬菜主要病蟲(chóng)害的抑菌驅(qū)蟲(chóng)活性研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2018年

8 劉佳;運(yùn)用代謝組和轉(zhuǎn)錄組解析人參皂苷組織和發(fā)育特異性的代謝差異[D];東北林業(yè)大學(xué);2017年

9 王國(guó)麗;人參皂苷Rb1對(duì)抑郁CUMS模型小鼠的保護(hù)作用及其BDNF-TrkB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制的研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2018年

10 劉迎;稀有人參皂苷的制備方法及其抗過(guò)敏活性研究[D];吉林大學(xué);2018年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 占潔潔;20(s)-人參皂苷Rg3去甲基化促進(jìn)P16表達(dá)抑制肝細(xì)胞癌[D];南昌大學(xué);2019年

2 呂晴;人參皂苷Rk1與Rg5誘導(dǎo)人肝癌MHCC-97H細(xì)胞凋亡及其機(jī)制研究[D];吉林大學(xué);2019年

3 程哲康;人參皂苷及其腦靶向脂質(zhì)體對(duì)缺血性腦卒中治療作用研究[D];中央民族大學(xué);2019年

4 牟寧;稀有人參皂苷的鎮(zhèn)靜催眠作用及機(jī)制探究[D];西北大學(xué);2019年

5 董亞楠;葉酸靶向的人參皂苷Rg5牛血清白蛋白納米顆粒的制備及生物學(xué)研究[D];西北大學(xué);2019年

6 安西寧;人參皂苷Rk1的抗肺鱗癌作用及其機(jī)制研究[D];西北大學(xué);2019年

7 張敏霞;三醇組人參皂苷對(duì)腸道菌的調(diào)節(jié)及腸道的保護(hù)作用[D];西北大學(xué);2019年

8 劉換換;人參皂苷Rk3的抗食管癌作用及機(jī)制研究[D];西北大學(xué);2019年

9 劉偉新;W/O/W型人參皂苷復(fù)乳的制備及質(zhì)量研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2017年

10 張譯丹;人參皂苷Rh1通過(guò)DDX5抑制HER2陽(yáng)性乳腺癌細(xì)胞惡性生物學(xué)行為的研究[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2018年

本文編號(hào)：2861733