為深入了解海南島熱帶野生植物的保健功能及其活性成分,用CCK-8法檢測山地五月茶(Antidesma montanum)果和葉的乙醇提取物對MDA-MB-231乳腺癌細胞增殖的抑制活性。結果表明,山地五月茶果和葉的乙醇提取物作用72 h對細胞的半數(shù)抑制濃度(IC_(50))分別為483μg/mL和306μg/mL。葉的乙醇提取物分別經(jīng)石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,比較各有機溶劑萃取相及剩余水相對乳腺癌細胞抑制增殖活性,結果顯示乙酸乙酯相表現(xiàn)出較高的活性,其處理細胞72 h的IC50為150.5μg/mL。劃痕實驗和Transwell檢測結果表明,乙酸乙酯相提取物具有抑制MDA-MB-231細胞遷移和侵襲的能力。流式細胞儀檢測結果表明,乙酸乙酯相提取物能夠使MDA-MB-231細胞周期S期顯著延長。UPLC-MS/MS分析結果顯示,乙酸乙酯相含有穗花杉雙黃酮活性成分。穗花杉雙黃酮處理MDA-MB-231細胞72 h的抑制增殖IC_(50)為192.6μg/mL,表明其是山地五月茶抑癌活性成分之一。
【部分圖文】：

分別將山地五月茶的果和葉乙醇提取物用DMSO溶解，DMEM培養(yǎng)基稀釋至一定濃度，測試其對MDA-MB-231乳腺癌細胞的增殖抑制活性，結果見圖1。乙醇提取物抑制MDA-MB-231細胞增殖的活性，隨濃度增加而增強。果和葉的乙醇提取物對MDA-MB-231細胞72 h的IC50分別為483、306μg/mL，葉提取物的抑制增殖活性高于果的提取物。分別將山地五月茶葉乙醇提取物的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取相及水相提取物的濃度稀釋至200μg/mL，檢測其對MDA-MB-231細胞增殖的抑制活性。結果表明，在幾種萃取相中，乙酸乙酯萃取相的抑制細胞增殖活性最高，水相的活性最低（圖1C）。進一步分析乙酸乙酯萃取相在不同濃度時對MDA-MB-231細胞增值的抑制作用（圖1D），計算得出其作用72 h的IC50為150.5μg/mL。

考察山地五月茶葉乙醇提取物的乙酸乙酯萃取相對MDA-MB-231細胞遷移活性的影響，結果表明100μg/mL的乙酸乙酯萃取相處理MDA-MB-231細胞24 h后，與對照相比提取物對細胞遷移的平均抑制率達86%（圖2）。本研究還考察了更低濃度提取物處理對細胞遷移活性的影響，結果顯示隨著提取物濃度的降低，其對細胞遷移的抑制率也逐漸減小。2.3 提取物對細胞侵襲的影響

Transwell實驗結果
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本文編號：2841995