本實驗以桑根皮素為研究對象,通過對20種癌細(xì)胞進(jìn)行藥物篩選實驗,發(fā)現(xiàn)桑根皮素對大多數(shù)癌細(xì)胞有生長抑制作用,因此作者深入研究了桑根皮素對乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-453、人肺癌細(xì)胞H1299和結(jié)腸癌細(xì)胞HCT116的增殖抑制作用,抗侵襲、浸潤作用和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用,并初步探討其作用機制,為蠶桑業(yè)廢物資源循環(huán)利用、蠶桑業(yè)可持續(xù)發(fā)展以及中藥抗腫瘤作用奠定了基礎(chǔ),為桑枝皮中生物活性物質(zhì)——一桑根皮素的藥用研發(fā)以及臨床應(yīng)用提供了有用的理論和實驗依據(jù)。本文的研究主要涉及以下內(nèi)容:(1)本文以桑根皮素為藥物,對20種癌細(xì)胞進(jìn)行了藥物篩選實驗。實驗分組為對照組(0.5%DMSO)和不同濃度桑根皮素處理組(1.25μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml)。實驗結(jié)果顯示,桑根皮素對20種癌細(xì)胞均有抑制作用,其中高濃度處理組(20μg/ml)的腫瘤抑制率均可達(dá)到84%以上,均呈現(xiàn)濃度依賴。IC50結(jié)果顯示,20種癌細(xì)胞的IC50平均值為6.211μg/ml,其中有80%的細(xì)胞IC50值小于等于6.45μg/ml。由此可以得出桑根皮素對大多數(shù)癌細(xì)胞有很好的抑制作用。(2)本文針對乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-453、人肺癌細(xì)胞H1299和結(jié)腸癌細(xì)胞HCT116進(jìn)行實驗,用不同濃度桑根皮素溶液(1.25μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml)處理以上三種細(xì)胞,處理時間分別為24h,48h,72h。實驗結(jié)果說明,桑根皮素對以上三種細(xì)胞均有生長抑制作用,并呈現(xiàn)時間—濃度依賴性,其中20μg/ml桑根皮素溶液處理以上細(xì)胞48h后,腫瘤抑制率分別高達(dá)94.02%、97.9%和 91.9%。(3)不同濃度桑根皮素溶液(2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml)處理乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-453和結(jié)腸癌細(xì)胞HCT116,Western blotting結(jié)果顯示,桑根皮素可上調(diào)上皮標(biāo)志物E-鈣粘蛋白(E-cadherin),下調(diào)間質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物N-鈣粘蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin),并且均呈現(xiàn)劑量效應(yīng)。說明桑根皮素可逆轉(zhuǎn)EMT,抑制這三種腫瘤的遷移、侵襲和浸潤。(4)不同濃度桑根皮素溶液(5μg/ml、1Oμg/ml、20μg/ml)作用于乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-453、人肺癌細(xì)胞H1299和結(jié)腸癌細(xì)胞HCT116,48h后,實驗結(jié)果顯示細(xì)胞均發(fā)生凋亡,并呈現(xiàn)劑量依賴,其中MDA-MB-453細(xì)胞在高濃度(20μg/ml)桑根皮素溶液處理后,凋亡率高達(dá)77.73%,差異極顯著(P0.01)。Western blotting結(jié)果顯示,桑根皮素可上調(diào)Bax和cleaved caspase-3,下調(diào)Bcl-2和caspase-3,說明桑根皮素可誘導(dǎo)乳腺癌、人肺癌和結(jié)腸癌細(xì)胞發(fā)生凋亡。(5)不同濃度桑根皮素溶液(2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml)作用于乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-453和結(jié)腸癌細(xì)胞HCT116,實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn),桑根皮素濃度為10μμg/ml時,MDA-MB-453細(xì)胞被阻滯于G2期,HCT116細(xì)胞被阻滯于S期。因此說明桑根皮素可擾亂乳腺癌和結(jié)腸癌細(xì)胞的周期。
【學(xué)位單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：R285
【部分圖文】：

．Ｆｉｇ邋３．邋ＩＣ５０邋ｖａｌｕｅ邋ｏｆ邋Ｍｏｒｕｓｉｎ邋ｔｒｅａｔｅｄ邋ｏｎ邋２０邋ｃａｎｃｅｒ邋ｃｅｌｌｓ逡逑桑根皮素處理２０種癌細(xì)胞４８ｈ后，由圖２ＭＴＴ、ＣＣＫ８結(jié)果可以看出，素對所測２０種癌細(xì)胞均有明顯的生長抑制作用，高濃度組的腫瘤抑制率８４％以上，并呈現(xiàn)濃度依賴性。ＩＣ５Ｃ結(jié)果顯示，２０種癌細(xì)胞的ＩＣ５0平１／ｍｌ0逡逑

桑根皮素對ＭＤＡ－ＭＢ－４５３、ＨＣＴ１１６和Ｈ１２９９癌細(xì)胞的抑制瘤抑制率已達(dá)到８３．５７％，４８小時時腫瘤抑制率達(dá)到９４．０２°／。；在桑根皮素濃度為２０ｐｇ／ｍｌ，處理時間為１２ｈ時，細(xì)胞抑制率抑制生長作用。逡逑桑根皮素對癌細(xì)胞凋亡的影響逡逑？邐．ＡＰＯＰＴＯＳＩＳ邋ＰＲＯＦＩＬＥ邐ＡＰＯＰＴＯＳＩＳ邋ＰＲＯＦＩＬＥ逡逑＊＊＇

ＭＤＡ－ＭＢ－４５３細(xì)胞經(jīng)ＡｎｎｅｘｉｎＶ／７－ＡＡＤ染色后流式細(xì)抱檢測細(xì)胞凋亡；（Ｂ）－４５３細(xì)胞４８ｈ后的凋亡率。（＊表示與正常對照組相比０．０１＜ｐ＜０．０５，差異顯對照組相比ｐ＜０．０１，差異極顯著）逡逑ＭＤＡ－ＭＢ－４５３ｃｅｌｌｓ邋ｗｅｒｅ邋ｄｅｔｅｃｔｅｄ邋ｂｙ邋Ａｎｎｅｘｉｎ邋Ｖ／７－ＡＡＤ邋ｓｔａｉｎｉｎｇ邋ａｎｄ邋ａｐｏｐｔｏｓｉｓ邋ｗａｓ；邋（Ｂ）邋Ｔｈｅ邋ａｐｏｐｔｏｓｉｓ邋ｒａｔｅ邋ｏｆ邋ＭＤＡ－ＭＢ－４５３邋ｃｅｌｌｓ邋ｔｒｅａｔｅｄ邋ｗｉｔｈ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ（＊０．０１邋＜邋ｐ邋＜邋０．０５．邋ｃｏｍｐａｒｅｄ邋ｗｉｔｈ邋ｔｈｅ邋ｃｏｎｔｒｏｌ；邋＊＊邋ｐ邋＜邋０．０１．邋ｃｏｍｐａｒｅｄ邋ｗｉｔｈ邋ｔｈｅ邋ｃｏｎ３７逡逑

【參考文獻(xiàn)】

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1 周昱岐;葉敏;張映城;魏品康;;桑根白皮素調(diào)控人結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞周期阻滯及其抑制細(xì)胞增殖的體外研究[J];中國中醫(yī)藥信息雜志;2015年05期

2 黃果;王佑權(quán);譚米多;謝海輝;李偉;劉國文;;姜黃素抗腫瘤作用機制的研究進(jìn)展[J];腫瘤藥學(xué);2014年05期

3 沈迪;李崇慧;周晉華;徐�；�;周鵬飛;;復(fù)方守宮散對Lewis肺癌小鼠JAK2-STAT3信號通路的影響[J];中國醫(yī)藥科學(xué);2014年09期

4 羅輝燕;馮冬冬;于偉娜;丁陳波;李靜;馮繼紅;;槲皮素對結(jié)直腸癌細(xì)胞SW480增殖與Bcl-2、C-myc表達(dá)的影響[J];中國藥房;2014年11期

5 詹啟敏;陳杰;;細(xì)胞周期與腫瘤轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)[J];中國腫瘤臨床;2014年01期

6 何曉松;王文華;易世江;栗子芳;宣廣旭;張偉;范才文;;表沒食子兒茶素沒食子酸酯對鼻咽癌細(xì)胞及STAT3表達(dá)的影響[J];廣東醫(yī)學(xué);2013年23期

7 張曉;周琴;陳清;林國楨;;2003～2007年中國惡性腫瘤發(fā)病率水平的聚類分析[J];中國腫瘤;2013年01期

8 劉忠紅;;蠶桑綜合利用現(xiàn)狀與建議[J];蠶桑通報;2012年04期

9 張敏璐;黃哲宙;鄭瑩;;中國2008年女性乳腺癌發(fā)病、死亡和患病情況的估計及預(yù)測[J];中華流行病學(xué)雜志;2012年10期

10 路學(xué)文;解邦杰;李新明;岳增文;蔡留意;;核因子-κB/p65表達(dá)下調(diào)對舌鱗狀細(xì)胞癌裸鼠移植瘤中bcl-2和bax表達(dá)的影響[J];腫瘤;2011年01期

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1 劉鵬;以STAT3信號通路為靶點探索半枝蓮提取物的抗癌分子機制[D];蘭州大學(xué);2014年

2 馬斌;桑樹枝條韌皮部桑根皮素的制備及其對小鼠H_(22)細(xì)胞株移植性腫瘤的抑制作用[D];蘇州大學(xué);2013年

本文編號：2834041