本文主要分為兩部分,第一部分為理論探析,具體研究內(nèi)容如下:目的:研究脾和腦之間的聯(lián)系,發(fā)現(xiàn)其相關性,探討腦病從脾論治的理論性、科學性和臨床應用的合理性,為健脾益氣法治療腦缺血再灌注的臨床應用提供理論依據(jù),也為腦血管病的臨床防治提供新思路和新方法。方法:通過研究《內(nèi)經(jīng)》中對脾與腦的認識以及后世醫(yī)家對脾、腦的研究,挖掘脾和腦之間的聯(lián)系,并在此基礎上提出“脾腦相關”思想,進一步提出“腦病從脾論治”這一新理念。結果:脾與腦生理上密切相關,脾與腦病理上也密切相關。結論:從《內(nèi)經(jīng)》以及后世醫(yī)家對“脾腦相關”“腦病從脾論治”的認識,可以推斷出健脾益氣法治療中風具有有力的辨證性、獨特性與可行性。從脾論治腦病也為現(xiàn)代諸多腦病的治療展現(xiàn)出了新的思路與方法。對于有效改善腦病的治愈率和提高患者的生存質(zhì)量有著較為深遠的影響。第二部分為實驗研究,具體研究內(nèi)容如下:目的:觀察健脾益氣方大鼠腦缺血再灌注(I/R)損傷后腦組織神經(jīng)細胞外基質(zhì)Fibulin-5、P-Akt、P-BAD及凋亡因子Bcl-2、caspase-3表達情況的影響,探討健脾益氣法組方對大鼠腦缺血再灌注損傷后神經(jīng)細胞凋亡的干預機理。方法:將120只雄性SD大鼠隨機分為Sham組(假手術組)24只、MCAO組(模型制備組)96只。采用線栓法制備MCAO模型,造模成功后按大鼠神經(jīng)功能缺損評分進行隨機分層,根據(jù)分層結果隨機分為MCAO組、陽性藥物組(依達拉奉組)、健脾益氣方高劑量組、低劑量組4組。分3天、7天后分批處死大鼠,處死前進行神經(jīng)功能缺損評分,運用HE染色法進行病理組織學觀察,免疫組化法檢測腦組織神經(jīng)細胞外基質(zhì)Fibulin-5、P-Akt、P-BAD及凋亡因子Bcl-2、caspase-3的表達,采用Tunel染色法檢測凋亡的神經(jīng)細胞。結果:3天組:與Sham組相比,MCAO組大鼠神經(jīng)功能評分明顯增加(P0.01),神經(jīng)細胞凋亡指數(shù)(AI)明顯升高,Fibulin-5蛋白表達減少,caspase-3蛋白表達顯著增加,P-Akt、P-BAD、Bcl-2蛋白表達明顯減少,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05或P0.01);與MCAO組相比,陽性藥物組和健脾益氣方各劑量組大鼠神經(jīng)功能評分無明顯降低(P0.05),神經(jīng)細胞凋亡指數(shù)(AI)無降低。陽性藥物組和健脾益氣方各劑量組腦組織Fibulin-5,P-Akt,Bcl-2蛋白表達無明顯增高,caspase-3蛋白表達無明顯減少,差異不具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。同MCAO組比較,依達拉奉和健脾益氣方各劑量組腦組織P-BAD蛋白含量明顯增高,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。7天組:與Sham組相比,MCAO組大鼠神經(jīng)功能評分明顯增加(P0.01),神經(jīng)細胞凋亡指數(shù)(AI)明顯升高,Fibulin-5表達減少,caspase-3表達顯著增加,P-Akt、P-BAD、Bcl-2表達明顯減少,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05或P0.01);與MCAO組相比,陽性藥物組和健脾益氣方各劑量組大鼠神經(jīng)功能評分降低(P0.05),神經(jīng)細胞凋亡指數(shù)(AI)明顯降低。陽性藥物組和健脾益氣方各劑量組腦組織Fibulin-5蛋白表達增高,caspase-3蛋白表達顯著減少,P-Akt、P-BAD、Bcl-2蛋白表達明顯增高,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.01或P0.05)。結論:健脾益氣方可以改善(I/R)大鼠神經(jīng)功能缺損情況,促進神經(jīng)功能的恢復,減少神經(jīng)細胞損傷。健脾益氣方上調(diào)細胞外基質(zhì)Fibulin-5的表達,減少caspase-3蛋白表達,增加P-Akt、P-BAD、Bcl-2蛋白表達,降低凋亡指數(shù)AI,提示健脾益氣方可能通過穩(wěn)定神經(jīng)元細胞外基質(zhì),從而抑制細胞發(fā)生凋亡,起到保護腦缺血損傷的作用。健脾益氣方對腦缺血的保護和治療作用從實驗結果來看與給藥時間之間有明顯的時效關系,3天組多無統(tǒng)計學意義,而7天組出現(xiàn)明顯改善。因而健脾益氣方用于治療時用藥時間不宜過短,建議不少于7天為宜。
【學位單位】：湖南中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：R285.5
【部分圖文】：

注 ：1Sham 組 ， 2Mcao 組 ， 3 低 劑 量 組， 4 高 劑 量 組 ， 5 陽 性 藥 物 組圖 1 病 理 組 織 形 態(tài) 觀 察 （ HE 染 色 法 × 400）七天組 ：光學顯微鏡下觀察，可見 Sham 組神經(jīng)細胞形態(tài) 、排列度、胞核位置正常，核仁深染，呈現(xiàn)藍紫色，胞漿呈粉紅色、核膜清見，均未見炎性細胞浸潤現(xiàn)象。Mcao 組腦組織缺血皮質(zhì)區(qū)大量神經(jīng)細

注 ：1Sham 組 ， 2Mcao 組 ， 3 低 劑 量 組， 4 高 劑 量 組 ， 5 陽 性 藥 物 組圖 2 病 理 組 織 形 態(tài) 觀 察 （ HE 染 色 法 × 400）5.3 健脾益氣法組方對腦缺血再灌注大鼠 Fibulin-5，P-AP-BAD，Bcl-2 和 caspase-3 蛋白表達水平的影響

注 ：1Sham 組 ， 2Mcao 組 ， 3 低 劑 量 組， 4 高 劑 量 組 ， 5 陽 性 藥 物 組圖 2 三 天 組 Fibulin-5 蛋 白 的 表 達 （ 免 疫 組 化 ×400）

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本文編號：2830082