目的:本課題通過(guò)創(chuàng)立慢性疲勞大鼠模型,研究CFS發(fā)病的病因及發(fā)病機(jī)制。歸納升陽(yáng)益胃顆粒影響造模大鼠一般情況和行為學(xué)指標(biāo)如力竭游泳時(shí)間、直立運(yùn)動(dòng)次數(shù)和跨格運(yùn)動(dòng)次數(shù)的影響;通過(guò)檢測(cè)不同組別大鼠骨骼肌中的SDH和細(xì)胞色素c的含量,探討升陽(yáng)益胃顆粒治療CFS的機(jī)制,為該方在臨床上治療CFS提供實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù)。方法:(1)分組、造模:將60只雄性SPF級(jí)SD大鼠,適應(yīng)性喂養(yǎng)3d后,開(kāi)始造模。然后隨機(jī)將大鼠分為正常組、模型組、諾迪康膠囊組、升陽(yáng)益胃顆粒低、中、高劑量組,每組各10只。正常組不進(jìn)行造模,其余5組根據(jù)改良的尹喜玲法進(jìn)行造模,時(shí)間為14天。(2)灌胃方法與劑量:諾迪康膠囊組按0.182g/(kg·d)給以諾迪康膠囊混懸液灌胃,升陽(yáng)益胃顆粒低、中、高劑量組分別按1.625g/(kg·d)、3.25g/(kg·d)、6.5g/(kg·d)給予升陽(yáng)益胃顆粒混懸液灌胃。連續(xù)14天,1次/天。每隔3天測(cè)量一次大鼠體重,實(shí)時(shí)調(diào)整給藥量。(3)取材:大鼠成功經(jīng)局部麻醉后,快速取出各組大鼠左后肢股四頭肌,稱(chēng)取1g在生理鹽水中漂洗,制備骨骼肌組織勻漿和線粒體懸浮液,分裝標(biāo)號(hào)置于-20℃的冰柜中保存。(4)指標(biāo)測(cè)定:造模前、造模后以及末次灌胃后均測(cè)量一次大鼠體重、力竭游泳時(shí)間、跨格運(yùn)動(dòng)次數(shù)及直立運(yùn)動(dòng)次數(shù)。運(yùn)用ELISA法測(cè)定大鼠骨骼肌中SDH和Cyt-c的含量。所得數(shù)據(jù)采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。結(jié)果:(1)一般情況:造模前,各組大鼠一般情況無(wú)差異。造模開(kāi)始后,正常組大鼠進(jìn)食飲水量、活動(dòng)情況、皮毛色澤、二便情況無(wú)異常表現(xiàn)。隨著造模時(shí)間的推移,模型組和給藥組大鼠進(jìn)食飲水量減少,皮毛失去色澤,活動(dòng)量減少,糞便稀,尾巴臟。給藥后,升陽(yáng)益胃顆粒低、中、高劑量組大鼠、諾迪康膠囊組進(jìn)食量和飲水量增加明顯,活動(dòng)量明顯加大,皮毛漸漸有光澤,大便稀溏漸恢復(fù)至正常,升陽(yáng)益胃顆粒中、高劑量組變化更明顯。(2)體重及行為學(xué)指標(biāo):造模前:各組大鼠體重及行為學(xué)指標(biāo)對(duì)比P0.05,無(wú)顯著性差異。造模后:各造模組大鼠體重及行為學(xué)指標(biāo)與正常組相比P0.05,有顯著性差異,造模各組間比較P0.05,無(wú)顯著差異。給藥后:模型組大鼠體重及各行為學(xué)指標(biāo)明顯低于其余5組(P0.05),有顯著性差異;正常組大鼠體重及各行為學(xué)指標(biāo)高于諾迪康膠囊組和升陽(yáng)益胃顆粒低劑量組(P0.05),有顯著性差異,而與升陽(yáng)益胃顆粒中、高劑量組相比(P0.05),則無(wú)顯著性差異;升陽(yáng)益胃顆粒中劑量組與升陽(yáng)益胃顆粒高劑量組相比(P0.05),無(wú)明顯差異。(3)骨骼肌SDH含量的測(cè)定:與模型組比較,正常組、諾迪康膠囊組、升陽(yáng)益胃顆粒低、中、高劑量組骨骼肌SDH含量增加,均有顯著性差異(P0.05);與諾迪康膠囊組比較,升陽(yáng)益胃顆粒低劑量組骨骼肌SDH含量減少,升陽(yáng)益胃顆粒中、高劑量組骨骼肌SDH含量增加,有顯著性差異(P0.05);與升陽(yáng)益胃顆粒低劑量組比較,升陽(yáng)益胃顆粒中、高劑量組骨骼肌SDH含量增加,有顯著性差異(P0.05);與升陽(yáng)益胃顆粒中劑量組比較,升陽(yáng)益胃顆粒高劑量組骨骼肌SDH含量增加,有顯著性差異(P0.05)。(4)線粒體細(xì)胞色素c含量的測(cè)定:與模型組相比較,正常組、諾迪康膠囊組、升陽(yáng)益胃顆粒低、中、高劑量組骨骼肌線粒體Cyt-c的含量明顯增加,均有顯著性差異(P0.05);與諾迪康膠囊組比較,升陽(yáng)益胃顆粒低劑量組骨骼肌線粒體Cyt-c的含量減少,升陽(yáng)益胃顆粒高劑量組骨骼肌線粒體Cyt-c的含量增加,均有顯著性差異(P0.05),升陽(yáng)益胃顆粒中劑量組骨骼肌線粒體Cyt-c的含量無(wú)顯著性差異(P0.05);與升陽(yáng)益胃顆粒低劑量組相比,升陽(yáng)益胃顆粒中、高劑量組骨骼肌線粒體Cyt-c的含量增加,有顯著性差異(P0.05);與升陽(yáng)益胃顆粒中劑量組相比,升陽(yáng)益胃顆粒高劑量組骨骼肌線粒體Cyt-c的含量增加,有顯著性差異(P0.05)。結(jié)論:(1)本實(shí)驗(yàn)采用復(fù)合因素構(gòu)建大鼠慢性疲勞模型,重復(fù)性和可操作性都比較好,因?yàn)槠涫悄茉斐缮眢w疲勞和精神疲勞均有的動(dòng)物模型,能較好的模擬人類(lèi)長(zhǎng)期身體和心理刺激導(dǎo)致患病的病理過(guò)程。(2)升陽(yáng)益胃顆粒能恢復(fù)大鼠體重漸至正常,延長(zhǎng)大鼠力竭游泳時(shí)間,提高跨格運(yùn)動(dòng)次數(shù)和直立運(yùn)動(dòng)次數(shù);升陽(yáng)益胃顆粒能改善慢性疲勞大鼠疲勞狀態(tài),為臨床上應(yīng)用其治療慢性綜合征提供了實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。(3)升陽(yáng)益胃顆粒能明顯增加造模大鼠骨骼肌中SDH和cyt-c的含量,從而調(diào)節(jié)機(jī)體組織線粒體能量代謝,提高機(jī)體利用氧的能力,發(fā)揮其抗疲勞作用。這從一方面解釋了其升陽(yáng)益胃顆粒的抗疲勞機(jī)制。
【學(xué)位單位】：河南中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類(lèi)】：R285.5
【部分圖文】：

圖 1 各組大鼠造模前、造模后及給藥后體重的比較注：A 組為正常組，B 組為模型組，C 組為諾迪康膠囊組，D 組為升陽(yáng)益胃顆粒低劑量組，E 組為升陽(yáng)益胃顆粒中劑量組，F(xiàn) 組為升陽(yáng)益胃顆粒高劑量組。3 行為學(xué)指標(biāo)3.1 力竭游泳時(shí)間造模前：各組大鼠力竭游泳時(shí)間無(wú)顯著性差異（P>0.05）。造模后：與正常組相比，造摸各組大鼠力竭游泳時(shí)間均明顯減少，有顯著性差異（P<0.05），造模各組間比較無(wú)顯著差異（P>0.05）。給藥后：與正常組比較，升陽(yáng)益胃顆粒中、高劑量組大鼠力竭游泳時(shí)間無(wú)顯著性差異（P>0.05），模型組、諾迪康膠囊組與升陽(yáng)益胃顆粒低劑量組大鼠力竭游泳時(shí)間明顯減少，有顯著性差異（P<0.05）；與模型組比較，諾迪康膠囊組、升陽(yáng)益胃顆粒低、中、高劑量組力竭游泳時(shí)間明顯延長(zhǎng)，均有顯著性差異（P<0.05）；與諾迪康膠囊組比較，升陽(yáng)益胃顆粒低劑量組力竭游泳時(shí)間無(wú)顯著性差異（P>0.05），升陽(yáng)益胃顆粒中、高劑量組力竭游泳時(shí)間明顯延長(zhǎng)，有顯著性差異（P<0.05）；與升陽(yáng)益胃顆粒低劑量組相比，升陽(yáng)益胃顆粒中、高劑量組

表 2 各組大鼠造模前、造模后及給藥后力竭游泳時(shí)間比較(min， x ± s)組別 n 造模前 造模后 給藥后正常組 10 63.38±6.60▲63.82±4.62 68.15±5.37★模型組 9 62.70±5.67▲21.01±3.20●23.98±2.96諾迪康膠囊組 8 61.41±6.09▲19.99±3.01●54.34±3.94★△升陽(yáng)益胃顆粒低劑量組 10 61.97±6.38▲21.27±4.10●56.31±5.14★△升陽(yáng)益胃顆粒中劑量組 10 63.38±6.61▲21.46±3.87●71.21±7.69★○升陽(yáng)益胃顆粒高劑量組 10 62.40±5.94▲20.42±4.64●72.17±6.89★○注：▲ 造模前，各組間比較 P>0.05�！裨炷：螅c正常組比較 P<0.05。給藥后，★與模型組比較 P<0.05；△與正常組比較 P<0.05；○與正常組比較P>0.05；◆與諾迪康膠囊組比較 P>0.05；■與升陽(yáng)益胃顆粒中劑量組比較P>0.05。

跨格運(yùn)動(dòng)次數(shù)明顯增加，有顯著性差異（P<0.05）；與升陽(yáng)益胃顆粒中劑量組相比，升陽(yáng)益胃顆粒高劑量組跨格運(yùn)動(dòng)次數(shù)雖稍有增加，但無(wú)顯著性差異（P>0.05）。（表 3、圖 3）表 3 各組大鼠造模前、造模后及給藥后跨格運(yùn)動(dòng)次數(shù)比較(次， x ± s)組別 n 造模前 造模后 給藥后正常組 10 85.70±8.17▲86.40±8.56 86.90±6.24★模型組 9 84.67±6.44▲44.33±5.68●45.56±6.29諾迪康膠囊組 8 85.50±6.95▲42.63±4.57●78.88±7.47★升陽(yáng)益胃顆粒低劑量組 10 84.40±8.03▲42.30±5.14●79.20±7.79★△升陽(yáng)益胃顆粒中劑量組 10 83.90±8.28▲42.10±6.29●88.70±6.16★升陽(yáng)益胃顆粒高劑量組 10 85.30±6.90▲42.50±5.93●90.40±6.54★○注：▲ 造模前，各組間比較 P>0.05�！裨炷：螅c正常組比較 P<0.05。給藥后，★與模型組比較 P<0.05；△與正常組比較 P<0.05；○與正常組比較 P>0.05；◆與諾迪康膠囊組比較 P>0.05；■與升陽(yáng)益胃顆粒中劑量組比較 P>0.05。

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2809989