【摘要】：黃芩苷是中藥傳統(tǒng)藥物黃芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的有效活性成分之一,并具有廣泛的藥理作用,清除氧自由基,保護(hù)心腦血管,保護(hù)神經(jīng)系統(tǒng)。由于較差的溶解性,導(dǎo)致黃芩苷口服制劑對(duì)于腦部疾病的治療,不但生物利用度較低,并缺乏一定的腦靶向性。目的:為改善黃芩苷脂溶性,增加透膜特性,將其制備成具有特定體外表征的脂質(zhì)體,試圖提高生物利用度,提高腦靶向性;通過(guò)黃芩苷脂質(zhì)體(BA-LP)在急性腦缺血模型大鼠體內(nèi)的生物藥劑學(xué)行為,驗(yàn)證腦缺血損傷時(shí),缺血組織存在類(lèi)似于腫瘤的高滲透、長(zhǎng)滯留(Enhanced Permeability and Retention effect,EPR)效應(yīng)“炎癥靶向”作用。方法:1建立黃芩苷脂質(zhì)體(BA-LP)包封率的測(cè)定方法�？疾觳煌闹苽浞椒▽�(duì)BA-LP包封率的影響。采用SPSS17.0相關(guān)性分析法,對(duì)黃芩苷脂質(zhì)體工藝的影響因素進(jìn)行分析,然后通過(guò)Box-behnken Design優(yōu)化黃芩苷脂質(zhì)體制備工藝。2用馬爾文粒徑測(cè)定儀測(cè)定黃芩苷脂質(zhì)體粒徑和Zeta電位,透射電鏡觀察BA-LP的外觀形態(tài)。采用不同方程模型對(duì)BA-LP與黃芩苷(BA)進(jìn)行體外釋放擬合。3藥代動(dòng)力學(xué)及分布學(xué)研究實(shí)驗(yàn):采用栓線法制備急性腦缺血再灌注模型,采用HPLC對(duì)生物樣品中黃芩苷進(jìn)行分析,對(duì)比正常及急性腦缺血再灌注模型大鼠,靜脈注射BA-LP及BA后的藥代動(dòng)力學(xué)及組織靶向性情況。4采用TTC染色、腦水腫及神經(jīng)功能評(píng)分指標(biāo)探討黃芩苷脂質(zhì)體對(duì)急性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。采用DAS3.1.1軟件中的散點(diǎn)相關(guān)法(Y=a+b?lnx)建立黃芩苷濃度-時(shí)間-藥效之間的量效相關(guān)性研究方法。結(jié)果:1通過(guò)單因素相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)水化體積對(duì)包封率的影響極顯著(P0.01),Box-behnken Design優(yōu)化確定黃芩苷脂質(zhì)體最優(yōu)處方為:磷脂藥物比例3.81:1,磷脂膽固醇比例為5.70:1,水化體積為1.02 mL,超聲功率60 W,超聲時(shí)間10 min,超聲溫度20±5°C。2 BA-LP外部形態(tài)為球形顆粒,粒徑為160-190 nm,PDI值為0.190-0.224,電位為-5.7 mV,其體外釋放符合雙相動(dòng)力模型,具有緩釋作用。3藥代動(dòng)力學(xué)及分布學(xué)研究實(shí)驗(yàn)結(jié)果:本研究對(duì)比了正常及急性腦缺血再灌注模型大鼠,靜脈注射BA-LP及BA后的藥代動(dòng)力學(xué)及組織分布情況:BA-LP正常組血漿中AUC_((0-∞))明顯高于BA正常組(P0.01),半衰期t_(1/2z)延長(zhǎng)1.62倍,BA-LP正常組Vz,CLz明顯降低(P0.01);與BA-LP正常組相比,BA-LP模型組大鼠血漿AUC_((0-t))、MRT_((0-t))、Cmax顯著升高(P0.01),表觀分布容積Vz與清除率CLz,明顯降2.632、2.333倍(P0.01),黃芩苷脂質(zhì)體靜脈注射的生物利用度為4.728%。靶向性評(píng)價(jià)結(jié)果:對(duì)于BA-LP模型組,在各組織中Te由大到小依次為:紋狀體(26.610%)嗅球(15.210%)海馬(12.379%)腎(9.246%)皮層(8.558%)小腦(7.161%)肝(6.390%)脾(5.660%)心(4.572%)肺(4.213%);對(duì)于BA模型組,TE在各組織的由大到小依次為:腎(20.988%)紋狀體(17.814%)嗅球(15.716%)海馬(14.241%)皮層(11.358%)小腦(5.611%)肝(5.667%)肺(5.538%)心(2.407%)脾(0.634%)。與BA模型相比,BA-LP模型組腦組織的靶向性增強(qiáng),尤其靶向于紋狀體、嗅球、海馬,而對(duì)腎的選擇性降低了2.296倍。4藥效學(xué)及PK-PD相關(guān)性研究實(shí)驗(yàn):從TTC染色、腦水腫及神經(jīng)功能評(píng)分結(jié)果可知黃芩苷脂質(zhì)體對(duì)急性腦缺血具有一定的保護(hù)作用。通過(guò)PK-PD模型擬合,結(jié)果靜脈注射BA后血漿中黃芩苷濃度與SOD擬合方程為Y_(SOD)=224.859-2.34?lnX,(r=-0.861,p=0.006);黃芩苷濃度與LDH擬合方程為:Y_(LDH)=7319.867+53.096?lnX,(r=0.924,P=0.001)。給予BA-LP后血漿中黃芩苷濃度與SOD擬合方程為Y_(SOD)=185.248+15.605?lnX,(r=0.691,P=0.027);黃芩苷濃度與LDH擬合方程為:Y_(LDH)=5513.347+64.377?lnX,(r=0.856,P=0.002)。血漿中SOD、LDH的變化可能與黃芩苷藥效的發(fā)揮具有時(shí)間滯后性有關(guān)。結(jié)論:采用逆向蒸發(fā)法制備BA-LP包封率最高、粒徑最小,其方法具有可行性;BA-LP體外釋放過(guò)程符合雙相動(dòng)力學(xué)特征;體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)及組織分布表明黃芩苷脂質(zhì)體具有緩釋作用,可延長(zhǎng)黃芩苷在體內(nèi)的滯留時(shí)間,具有分布范圍窄、提高生物利用度、靶向于腦組織的特點(diǎn);通過(guò)急性腦缺血模型證實(shí)了腦損傷時(shí)存在類(lèi)似于腫瘤“EPR”效應(yīng)的“炎癥靶向”作用,可靶向腦組織。
【學(xué)位授予單位】：成都中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：R285.5
【圖文】：

發(fā)現(xiàn)空白脂質(zhì)體在 276 nm 處有吸收[40]，造成干擾，因此，本研究選擇 315.5 nm 為黃芩苷檢測(cè)波長(zhǎng)。結(jié)果如圖1-1。圖 1-1 黃芩苷及空白脂質(zhì)體全波長(zhǎng)掃描圖2.1.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立精密稱取黃芩苷對(duì)照品 14.46 mg，置 100 mL 容量瓶中，加 pH7.0 的 PBS 溶液配制成濃度為 144.60 μg/mL 的儲(chǔ)備液。精密量取上述儲(chǔ)備液用 pH7.0 的 PBS液進(jìn)一步稀釋得到系列質(zhì)量濃度的黃芩苷標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別為 2.892、5.784、8.676、空白脂質(zhì)體黃芩苷脂質(zhì)體

圖 1-10 各因素對(duì)響應(yīng)值包封率的三維效應(yīng)面和二維等高線圖2.6 處方優(yōu)化工藝的確定及驗(yàn)證依據(jù)效應(yīng)面法優(yōu)化的工藝條件范圍，最終確定磷脂藥物比例 3.81:1，磷脂膽

黃芩苷脂質(zhì)體透射電鏡圖

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2792500