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東革阿里總黃酮抗氧化活性及多糖結(jié)構(gòu)表征與免疫調(diào)節(jié)活性研究

發(fā)布時間:2020-08-07 05:16
【摘要】:東革阿里(Eurycoma longifolia)為苦木科東革阿里屬植物,產(chǎn)自東南亞地區(qū)的一種傳統(tǒng)草藥。本論文以馬來西亞東革阿里樹根為原料,先提取純化出東革阿里總黃酮和多糖,再進行結(jié)構(gòu)鑒定,最后用不同的生化指標(biāo)和細(xì)胞模型評估其生物活性,即東革阿里總黃酮的化學(xué)和CAA抗氧化活性、多糖的免疫調(diào)節(jié)活性和抗AAPH氧化溶血活性。選用AB-8大孔吸附樹脂分離東革阿里總黃酮,黃酮的吸附率為76.57%,經(jīng)凍干后得到東革阿里總黃酮樣品;然后通過紫外全波長掃描和紅外吸收光譜初步分析了其所含官能團和結(jié)構(gòu)特征;再對東革阿里總黃酮進行的體外化學(xué)抗氧化能力測定,結(jié)果說明:在樣品濃度范圍內(nèi)對DPPH自由基、超氧自由基均具有較好的清除效果,對鐵離子具有較好的還原力;ORAC值和HepG2細(xì)胞抗氧化活性結(jié)果表明:東革阿里總黃酮ORAC值為2302.48μmol TE/g,EC_(50)值為192.27μg/mL,CAA值為為4.10μmol QE/100μmol of total flavonoid,與一般植物黃酮的ORAC值和細(xì)胞抗氧化活性對比,東革阿里總黃酮處于較優(yōu)抗氧化水平。采用水提醇沉法分離東革阿里粗多糖,其得率為6.93%;經(jīng)DEAE-Sepharose Fast Flow離子交換柱層析和G-50凝膠柱層析進一步純化出Ali-1組分,經(jīng)檢測樣品純度為95.42%。高效凝膠滲透色譜法測得Ali-1分子量為14.3Ku;紅外光譜掃描顯示Ali-1含有多糖特征吸收峰;單糖組成分析表明Ali-1其組成主要為阿拉伯糖、木糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸,其摩爾百分比分別為14.31%、57.69%、13.03%和14.86%;核磁共振分析及甲基化結(jié)果表明Ali-1組分的主鏈主要由1,4-Xylp糖苷鍵連接,并以1,2,4-Xylp糖苷鍵為分支點與支鏈相連接,其摩爾百分比分別為31.07%和22.68%;支鏈主要由1,2-GlcpA(12.99%)和1,2-Araf(9.71%)糖苷鍵組成,且支鏈末端以T-GalpA(12.30%)和T-Arap(11.25%)糖苷鍵終止。另外掃描電子顯微鏡觀察到Ali-1具有片狀外觀,并伴隨卵形顆粒隨機分布在其整個微觀結(jié)構(gòu)中。最后采用小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7模型證明Ali-1能促進細(xì)胞分泌免疫因子NO、TNF-α和IL-6并伴隨一定程度的劑量效應(yīng),從而表現(xiàn)出較好的免疫調(diào)節(jié)活性。同時選用體外紅細(xì)胞抗氧化模型來評價Ali-1的抗氧化活性,在一定的樣品濃度范圍內(nèi),Ali-1可以保護人血紅細(xì)胞免受AAPH的損傷,也具有一定的抗氧化活性。
【學(xué)位授予單位】:華南理工大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:R284.2;R285.5;O657.3
【圖文】:

阿里,植物成分,化學(xué)結(jié)構(gòu)式,原子數(shù)


表 1-1 東革阿里苦木素類化合物Table 1-1 The Quassinoids compound in Eurycoma longifoliaC 原子數(shù)目 化合物名稱 化學(xué)結(jié)構(gòu)式C17Laurycolactone 見圖 1-1CC18Eurycolactone B 見圖 1-1DC19EurycomalideA 見圖 1-1EC19Eurylactone 見圖 1-1FC19Longilactone 見圖 1-1GC19Eurycomalactone 見圖 1-1HC20Eurycomanone 見圖 1-1IC20Eurycomanol 見圖 1-1JC20Pasakbumin B 見圖 1-1KC20Hydroxyklaineanone 見圖 1-1L

酮類化合物,基本結(jié)構(gòu)


onoids)是植物經(jīng)光合作用后,植物所的 2-苯基色原酮為基形,見圖 1-2,主其在自然界分布范圍廣,目前文獻報道莖葉,如芹菜、銀杏葉、茶葉等;存在果實的皮中,如柑橘、檸檬皮;存在于黃酮類、異黃酮類、黃酮醇類、黃烷酮系的深入研究,發(fā)現(xiàn)其具有許多重要的增強免疫等[32-33]。

阿里,總黃酮含量,統(tǒng)計軟件,單因素方差分析


取東革阿里純化后黃酮凍干樣品 10mg,壓片后上機掃析。 3 組平行,結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)方差(mean±SD)表示 17.0 統(tǒng)計軟件的單因素方差分析(one-wayANOVA)和)方法進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計。論總黃酮含量的測定l(NO3)3-NaNO2的方法,得到如圖 2-1 所示的標(biāo)曲,同時130,y 為樣液吸光值,x 為總黃酮含量。線性相關(guān)系數(shù)關(guān)系良好。經(jīng)測定,東革阿里粗提液中總黃酮含量為

【參考文獻】

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本文編號:2783540

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