【摘要】：杏貝止咳顆粒(XZK)由麻黃、苦杏仁、前胡、浙貝母、桔梗、木蝴蝶、百部、北沙參和甘草九味藥材組成,具有清宣肺氣、止咳化痰之功效。中藥質(zhì)量標志物是存在于中藥材和中藥產(chǎn)品中固有的或加工制備過程中形成的、與中藥功能屬性相關的化學物質(zhì),作為反映中藥安全性和有效性的標示性物質(zhì)進行質(zhì)量控制。目前,杏貝止咳顆粒物質(zhì)基礎研究相對薄弱,現(xiàn)行質(zhì)量標準控制成分較單一,本課題采用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)闡釋杏貝止咳顆粒化學成分,通過對處方各藥材主要成分生源途徑分析,明確杏貝止咳顆�；瘜W成分的來源和結(jié)構(gòu)的特異性;進一步結(jié)合XZK中的大鼠入血成分研究以及小鼠氨水引咳模型,明確該復方中與鎮(zhèn)咳活性相關的成分。綜合研究結(jié)果確定杏貝止咳顆粒質(zhì)量標志物,為質(zhì)量標準提升提供依據(jù)。以杏貝止咳顆粒質(zhì)量標志物為基礎進行薄層鑒別、含量測定以及指紋圖譜研究,以提升杏貝止咳顆粒質(zhì)量標準,為有效控制產(chǎn)品質(zhì)量、保證批間一致性提供技術(shù)支持。具體研究內(nèi)容如下:1、杏貝止咳顆粒質(zhì)量標志物的確定1.1杏貝止咳顆�；瘜W物質(zhì)組辨識采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技術(shù),對杏貝止咳顆粒的化學成分進行系統(tǒng)的分析,共鑒定和推測出92個化學成分,包括黃酮類21個,香豆素類20個,生物堿類36個,三萜皂苷類7個,其他類成分5個以及未知成分3個;并對主要成分進行生源途徑和特異性分析,為質(zhì)量標志物的篩選提供依據(jù)。1.2杏貝止咳顆粒鎮(zhèn)咳活性相關的質(zhì)量標志物的發(fā)現(xiàn)與確定基于杏貝止咳顆�；瘜W成分研究,采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技術(shù)分析杏貝止咳顆粒入血成分,通過與空白血漿、化學成分譜進行對比分析,檢測到入血成分共28個,包括18個原型成分和10個代謝產(chǎn)物,明確杏貝止咳顆粒發(fā)揮止咳平喘作用的可能活性成分。綜合杏貝止咳顆粒化學成分譜、化學成分生源途徑和特異性分析以及入血成分研究,初步篩選出17個成分進行鎮(zhèn)咳活性研究。本實驗采用小鼠氨水引咳模型對黃芩素、白楊素、貝母辛、異甘草素、木蝴蝶苷A共5個成分進行鎮(zhèn)咳活性評價,結(jié)果表明除木蝴蝶苷A以外的4個成分均具有鎮(zhèn)咳活性,結(jié)合課題組前期對其他12個成分鎮(zhèn)咳作用篩選結(jié)果,最終確定1 1個成分為杏貝止咳顆粒質(zhì)量標志物,包括君藥麻黃中的鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿,君藥苦杏仁中的苦杏仁苷,臣藥浙貝母中貝母素甲和貝母素乙,臣藥前胡中的白花前胡甲素、白花前胡乙素、白花前胡丙素,佐藥木蝴蝶中的黃芩素、黃芩苷,使藥甘草中的甘草酸。2、杏貝止咳顆粒質(zhì)量標準提升研究2.1薄層鑒別研究..對現(xiàn)行標準中6個薄層鑒別方法的展開劑、供試品溶液制備等進行優(yōu)化,并新建立了苦杏仁的薄層鑒別方法,對7個薄層鑒別方法進行耐用性考察,結(jié)果表明7個薄層鑒別方法耐用性和專屬性良好,適用于杏貝止咳顆粒中浙貝母、前胡、甘草、木蝴蝶、麻黃、百部和苦杏仁的薄層鑒別,完善杏貝止咳顆粒薄層鑒別定性研究。2.2含量測定研究在現(xiàn)行標準苦杏仁苷含量控制的基礎上,新增加鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿、貝母素甲和貝母素乙含量控制,并利用二維超高效液相色譜技術(shù)對杏貝止咳顆粒整體質(zhì)量控制進行研究。(1)采用HPLC-UV技術(shù)建立同時測定制劑中鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿含量的分析方法,方法學考察結(jié)果良好,以10批次樣品累積數(shù)據(jù)結(jié)合生產(chǎn)實際情況制定適宜的限度,擬納入質(zhì)量標準。(2)采用HPLC-ELSD技術(shù)建立同時測定制劑中貝母素甲和貝母素乙含量的分析方法,方法學考察結(jié)果良好,需累積更多批次數(shù)據(jù)結(jié)合生產(chǎn)實際情況制定適宜的限度,并進一步考慮是否納入質(zhì)量標準。(3)采用二維超高效液相色譜技術(shù)建立同時測定制劑中9個質(zhì)量標志物以及木蝴蝶苷A和木蝴蝶苷B的含量,方法學考察精密度、重復性、加樣回收率等均符合分析方法要求,可行性較好,為深入研究并提升杏貝止咳顆粒整體質(zhì)量標準提供參考。2.3指紋圖譜研究采用HPLC-UV技術(shù)建立了杏貝止咳顆粒指紋圖譜分析方法,以10批杏貝止咳顆粒的指紋圖譜為參考共標定26個共有峰。結(jié)合處方藥材及UPLC-Q-TOF-MS對26個共有峰進行歸屬和指認,結(jié)果表明該方法可用于杏貝止咳顆粒整體質(zhì)量評價。對10批杏貝止咳顆粒指紋圖譜進行主成分分析和正交偏最小二乘法判別分析,結(jié)果表明批次之間產(chǎn)生差異的主要成分共5個,主要歸屬于制劑中百部、前胡和木蝴蝶三味藥材,提示生產(chǎn)中需重點關注這三味藥材的質(zhì)量,可以更加科學、高效地控制杏貝止咳顆粒批次質(zhì)量。
【學位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R286.0
【圖文】：

［９６］通過結(jié)合化學成分生源途徑特性分析、藥理藥效活性、化學計量學分析等研究，定量測逡逑定２２種活性成分，篩選出不同類別物質(zhì)的質(zhì)量標志物。綜合上述研宄，尋找中藥質(zhì)量標志逡逑物的基本思路見圖１－１。逡逑中藥材、中藥制劑逡逑邐，邋’邐逡逑化學物１組辨識邐，邐＾、逡逑ｊ邋（ＵＰＬＣ－Ｑ＊ＴＯＦ－ＭＳＭＳ、核磁等）逡逑＾＾邐入血成分研究逡逑，邐邐邐＊邐邋（ＵＰＬＣ－Ｑ－ＴＯＦ－ＭＳ／ＭＳ）逡逑生源途徑及成分特異性分祈邐、邐ｊ逡逑＼邐邐逡逑Ｔ逡逑初步篩選中藥質(zhì)逯標志物逡逑丨邐ｍｍ％邐｜丨邐藥動＋學研究逡逑：：邋Ｌ：．二＝二：：：．１．邐Ｉ邋：：……二邋… …：：］：邋＝：：：逡逑甩子古、電子琢、邐格亡、邐丨體內(nèi)過程研究邋＜：藥時曲線．逡逑藥勒分子與味（嗅）覺受邐離體器莒、邐達}犈ǘ�、存}槭奔淶齲╁義咸宥越由稈�、逦伕胞纺[鈾�、辶x希澹塹埃崤劑芴逕稈″危賞繅├礤危哄邋五澹卞義希叔義先范ㄖ幸┲剩楸曛疚镥義賢跡保敝幸┲柿勘曛疚锏幕狙繡乘悸峰義希疲椋紓酰潁邋澹保卞澹攏幔螅椋沐澹潁澹螅澹幔潁悖楨澹媯潁幔恚澹鰨錚潁脲澹錚鑠澹瘢酰幔歟椋簦澹恚幔潁耄澹潁簀義現(xiàn)幸┲柿勘曜嫉鬧貧ㄊ且桓霾歡閑薅┯臚晟頻墓�，中药质量标志物的提秤z欣阱義轄⒑屯晟浦幸┤討柿靠刂萍爸柿克菰刺逑擔Ｖぶ幸┝俅擦菩�，能更好的实戏N幸┫皺義洗凸駛�。辶x先合嗌準際踉謚幸┝煊虻撓τ緬義現(xiàn)幸┘捌渲萍粱С煞值慕銜叢櫻峁瓜嗨啤⑿災氏嗨�、同分异箿夏成芳埾多，常辶x瞎嬪追擲胗惺輩荒藶閼廡└叢踴銜锏姆擲胗爰觳�。近年�

本文編號：2760925