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鎖陽多糖體外免疫活性及多糖提取工藝優(yōu)化研究

發(fā)布時(shí)間:2020-06-11 12:57
【摘要】:鎖陽(CYNOMORII HERBA)是常用蒙中藥材,以干燥肉質(zhì)莖入藥,具有益精血、補(bǔ)腎陽、潤腸通便的功效。鎖陽富含多糖等多種物質(zhì),研究表明鎖陽多糖(Cynomorium songaricum polysaccharide,CSP)具有抗衰老和抗氧化等作用,而對其免疫活性研究甚少。B細(xì)胞是生命機(jī)體免疫的重要細(xì)胞之一,其通過分泌抗體在適應(yīng)性免疫系統(tǒng)的體液免疫組分中起作用。本研究以鎖陽為實(shí)驗(yàn)材料,通過酶解不同時(shí)間(1-5 h)得到鎖陽多糖樣品(CSP1-CSP5),在小試條件基礎(chǔ)上,結(jié)合化學(xué)性質(zhì)分析、紅外光譜及掃描電鏡對鎖陽多糖中試提取工藝進(jìn)行初步研究,為鎖陽多糖中試生產(chǎn)提供理論依據(jù)。其次用得到樣品(CSP1-CSP5)的不同濃度處理小鼠脾淋巴細(xì)胞,檢測其對祖B細(xì)胞(Pro-B cell)、前B細(xì)胞(Pre-B cell)和未成熟B細(xì)胞(immature B cell)的增殖的影響。結(jié)果如下:(1)不同酶解時(shí)間獲得的鎖陽多糖對Pro-B、Pre-B、immature B細(xì)胞均有促進(jìn)增殖的作用。CSP5對B細(xì)胞的作用較為明顯,其中Pro-B細(xì)胞數(shù)量增幅在0.14%~0.29%,immature B細(xì)胞數(shù)量增幅在0.05~0.08%;而Pre-B細(xì)胞在低濃度處理下細(xì)胞數(shù)量下降了0.03%~0.36%,這可能是低濃度會(huì)促進(jìn)Pre-B細(xì)胞向immature B細(xì)胞的發(fā)育。(2)隨著酶解時(shí)間增加,鎖陽多糖含量增加,與CSP1相比,其它鎖陽多糖樣品多糖含量分別增加了10.77%、19.88%、26.17%、32.38%;初步分離之后水淋洗部分多糖含量比粗多糖中多糖含量升高了。(3)鎖陽多糖中試生產(chǎn)提取條件:酶解10 h、提取3次、提取3 h、酶用量5%;在此條件提取鎖陽多糖得率為17.18%~20.26%,多糖含量為78.54%~89.76%,蛋白質(zhì)含量為1.22%~1.8%;電鏡掃描后發(fā)現(xiàn)原材料被破壞較為嚴(yán)重。
【圖文】:

洗脫曲線,酶解,洗脫曲線


圖 3.1 酶解 1 h 鎖陽多糖 CSP1 的 DEAE-52 纖維素柱分離洗脫曲線Fig.3.1 Elution profiles of CSP1 by DEAE-52cellulose column酶解1 h用DEAE-52纖維素柱分離CSP1得到兩個(gè)組分(圖3.1),即水淋洗部分CSP1-D0和 0.1 mol/L NaCl 淋洗部分 CSP1-D1。圖 3.2 酶解 2 h 鎖陽多糖 CSP2 的 DEAE-52 纖維素柱分離洗脫曲線Fig.3.2 Elution profiles of CSP2 by DEAE-52 cellulose column

洗脫曲線,酶解,洗脫曲線,鎖陽


用不同濃度 NaCl 溶液洗脫得到的酸性多糖。以下是對不同處理鎖陽粗多糖分離的結(jié)果圖 3.1 酶解 1 h 鎖陽多糖 CSP1 的 DEAE-52 纖維素柱分離洗脫曲線Fig.3.1 Elution profiles of CSP1 by DEAE-52cellulose column酶解1 h用DEAE-52纖維素柱分離CSP1得到兩個(gè)組分(圖3.1),即水淋洗部分CSP1- 0.1 mol/L NaCl 淋洗部分 CSP1-D1。
【學(xué)位授予單位】:內(nèi)蒙古大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:R284.2

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本文編號(hào):2707940

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