【摘要】：荷葉是睡蓮科蓮屬多年生草本挺水植物蓮荷的葉,荷葉中含有的荷葉堿等生物活性物質(zhì)具有多種功效。本文對(duì)荷葉中荷葉堿的提取分離純化條件,以及荷葉提取物的降血脂功能性進(jìn)行了深入的探究,并研制了一款荷葉功能性飲料,對(duì)荷葉的開(kāi)發(fā)利用具有一定的意義與價(jià)值。本文首先對(duì)比了超聲波輔助提取,索氏提取以及傳統(tǒng)的回流提取對(duì)于荷葉中荷葉堿的得率的影響,確定了較為優(yōu)化的提取方式為超聲波輔助提取,并在此提取方式上進(jìn)一步進(jìn)行乙醇濃度、料液比、提取時(shí)間以及提取溫度的優(yōu)化,確定了荷葉堿的最優(yōu)提取條件。在此提取條件下對(duì)荷葉堿進(jìn)行提取,選用D101大孔吸附樹(shù)脂分離純化荷葉堿得到荷葉提取物。將荷葉提取物作為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)藥劑通過(guò)灌胃方式進(jìn)行小鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)小鼠共分為7組,分別為(1)空白對(duì)照組、(2)空白給藥組、(3)高脂模型組、(4)血脂康組、(5)荷葉提取物低劑量組、(6)荷葉提取物中劑量組、(7)荷葉提取物高劑量組,其中(1)、(2)組采用普通飼料喂養(yǎng),(3)-(7)組采用高脂飼料喂養(yǎng),分別在造模兩周、給藥兩周以及給藥四周時(shí)取血,測(cè)定各組小鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平,并在給藥四周后處死小鼠,取小鼠肝臟組織,進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn),測(cè)定肝臟組織中與膽固醇和脂肪酸相關(guān)代謝基因的表達(dá)情況。最后根據(jù)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果確定荷葉提取物在荷葉飲料中的添加量,確定荷葉飲料配方。實(shí)驗(yàn)結(jié)果為:(1)在最適的提取條件下,超聲波輔助提取的荷葉堿得率比索氏提取高出20%,比傳統(tǒng)的回流提取高出74%,確定了運(yùn)用超聲波輔助提取的最佳提取條件為乙醇濃度70%,料液比1:25,提取時(shí)間2.0 h,提取溫度85℃。(2)確定了荷葉堿的分離純化條件,為運(yùn)用D101大孔吸附樹(shù)脂,選用乙醇作為洗脫劑梯度洗脫,收集50%-70%體積分?jǐn)?shù)的乙醇洗脫液,經(jīng)過(guò)濃縮,可以得到荷葉堿含量為2%的荷葉提取物。(3)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的結(jié)果為荷葉提取物能夠降低小鼠血清TC、TG、LDL-C的水平,對(duì)于小鼠血清HDL-C水平無(wú)顯著性的影響,高劑量的荷葉提取物對(duì)于小鼠血清TC、TG、LDL-C水平的改善與血脂康膠囊相當(dāng),荷葉提取物具有降低血脂的功效。(4)實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果表明,荷葉提取物能夠顯著下調(diào)小鼠肝臟組織細(xì)胞中影響膽固醇合成代謝的蛋白HMGCR與SREBP-2的基因的表達(dá),同時(shí)可以顯著上調(diào)影響膽固醇分解代謝的蛋白LXRα和CYP7a1的基因的表達(dá),達(dá)到降低小鼠血清TC水平的效果。荷葉提取物能夠顯著下調(diào)影響脂肪酸合成代謝的蛋白ACC和SREBP-1c的基因的表達(dá),同時(shí)上調(diào)影響脂肪酸分解代謝的蛋白CPT-1的基因的表達(dá),達(dá)到降低小鼠血清TG水平的效果。(5)確定了荷葉飲料的配方為荷葉、決明子、山楂、甘草按照5:3:2:0.5的比例,經(jīng)過(guò)1:100倍數(shù)稀釋,加入到90℃的水中,保持90℃水溫提取25 min,過(guò)濾,取過(guò)濾后的清液加入5 mL/L的蜂蜜、5 g/L的荷葉提取物、0.08 g/L的檸檬酸、0.04 g/L的蘋果酸、0.02g/L的三氯蔗糖、0.03 g/L的甜菊糖。
【學(xué)位授予單位】：江南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R284.2;R285.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2676452