【摘要】：石榴果皮為石榴最外層硬殼部分和內(nèi)部不可食用的薄膜層,是石榴汁加工過程中的副產(chǎn)物,含有70多種活性物質(zhì),主要包括多酚、黃酮、有機酸等,研究證實部分物質(zhì)具有抗氧化、降血脂、防癌抗腫瘤、抑菌消炎等功效,能夠預防及緩解多種慢性疾病如心腦血管疾病、白血病、阿爾茨海默氏病等。本研究對石榴皮結合型植物化學物質(zhì)進行分離鑒定,并初步評價了石榴皮游離型、結合型及分離得到的單體化合物的抑菌活性。(1)結合型多酚化合物提取條件優(yōu)化。以多酚為指標,在單因素的基礎上,采用響應曲面法優(yōu)化了石榴皮結合酚的酸降解條件,得到最佳參數(shù):鹽酸濃度6.10 mol/L、酸解時間2.01 h、酸解溫度44.17 ℃℃,料液比1:20,在此條件下結合酚濃度為 30.76 μM GAE/g,模型回歸方程:y = 30.60 +0.95 A +0.27 B +2.07 C +0.62 D-0.13 AB-0.63 AC-1.09 AD +0.075 BC-0.085 BD-1.21 CD-7.89 A2-8.06 B2-7.67 C2-8.51D2,R2Adj=0.9779。(2)石榴皮酸降解前后多酚化合物比較分析。通過HPLC分析了石榴皮酸降解前后多酚化合物的指紋圖譜并比較了二者之間的差異,采用MALDI-TOF-MS與文獻比對的方法鑒定了酸降解前后石榴皮中的主要多酚。結果表明,石榴皮中游離型小極性酚類化合物種類多于結合型化合物種類,而中等極性化合物種類中結合型多于游離型;對主要離子碎片進行分析,發(fā)現(xiàn)酸降解后釋放至少六種結合酚類化合物,分別為Punicacortein、Granatin B、Valoneic acid bilactone、Delphinidin-3-O-glucoside、Caffeic acid hexoside、Vanillic acid hexoside。(3)結合型化合物分離鑒定。利用有機試劑去除石榴皮游離型化合物后,所剩殘渣采用上述優(yōu)化參數(shù)進行酸降解,利用有機試劑萃取降解液,得到富含結合型化合物的粗提物�？咕钚詼y試結果表明,粗提物對金黃色葡萄球菌具有顯著的抑制作用,采用活性追綜和多種柱層析相結合的方法對粗提物進行分離純化,得到6個單體化合物,利用現(xiàn)代波譜學,結合文獻數(shù)據(jù)對比將這些化合物的結構鑒定為:(1)β-胡蘿卜苷,(2)β-豆甾醇,(3)熊果酸,(4)科羅索酸,(5)積雪草酸,(6)阿江欖仁酸,其中化合物4、5、6為首次從石榴皮中分離得到。(4)結合型化合物抑菌活性評價。對從石榴皮結合型粗提物中分離得到的6個單體化合物進行初步抑菌活性測試,結果表明,化合物2、3、5均有選擇性抑菌活性�；衔�2能抑制產(chǎn)氣腸桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌的生長,化合物3能抑制恥垢分歧桿菌、金黃色葡萄球菌的生長,化合物5能明顯抑制金黃色葡萄球菌和恥垢分歧桿菌的生長,MIC值分別為16μg/ml和64μg/ml,化合物5可與化合物6產(chǎn)生協(xié)同抑菌效果,對恥垢分歧桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌產(chǎn)生較強抑制活性,抑制效果高于化合物5。該研究結果說明,石榴皮中的游離型和結合型多酚化合物存在明顯差異,結合型提取物中的主要抑菌活性成分為五環(huán)三萜類化合物,該研究結果為石榴皮的深加工與綜合利用奠定了理論基礎,具有重要的實際應用價值。
【圖文】：

圖２－１沒食子酸標準曲線逡逑Ｆｉｇ．２－１邋Ｔｈｅ邋ｓｔａｎｄａｒｄ邋ｃｕｒｖｅ邋ｏｆ邋Ｇａｌｌｉｃ邋ａｃｉｄ逡逑沒食子酸標準曲線回歸方程為：逡逑Ｙ＝０．００３７Ｘ＋邋０．０５１３，相關系數(shù)邋Ｒ２邋＝邋０．９９５９逡逑上式中：Ｘ代表沒食子酸濃度，ｐｇ／ｍＬ；邋Ｙ代表吸光度。式中表明沒食子酸當量逡逑（ｐＭ邋ＧＡＥ／ｇ）在０－７００范圍內(nèi)與吸光度呈線性關系，該方程可用于石榴皮多酚含量的逡逑線性測定。逡逑沒食子酸當量計算公式為：逡逑沒食子酸當量＝?jīng)]食子酸濃度Ｘ邋Ｖ邋ｐｍｏｌＧＡＥ／ｇ逡逑Ｍ邋ｘ邋ｍ逡逑上式中：Ｖ為旋蒸后溶液體積１０ｍＬ；邋Ｍ為沒食子酸相對分子質(zhì)量１７０．１２，，邋ｍ為逡逑石榴皮粉質(zhì)量２ｇ。逡逑２．２．３提取游離型多酚化合物溶劑選擇逡逑

２．４酸、堿水解方法的選擇及單因素實驗結果分析逡逑２．４．１游離型多酚化學物的提取溶劑的選擇結果逡逑不同提取溶劑對游離型石榴皮多酚提取效果的影響如圖２－２所示。從圖中可見，逡逑甲醇提取所得的游離型多酚含量遠高于其他溶劑，水和丙酮次之。因此游離型多酚的逡逑提取選用甲醇作為提取溶劑。逡逑１０邋ｒ逡逑§邐ｎ逡逑ｉ邐內(nèi)逡逑Ｅ逡逑ｐ邋５邐內(nèi)逡逑ｋ邐Ｔ逡逑，邐＾邋ｒ＾ｉ邋．邐ｒｈ逡逑懺邐ｒ逡逑環(huán)己烷邋氯仿乙酸乙酯丙＿邋甲醇邋水邋正丁醇逡逑溶劑逡逑圖２－２不同溶劑對游離酚降解效果圖逡逑Ｆｉｇ．２－２邋Ｄｉａｇｒａｍ邋ｆｏｒ邋ｆｒｅｅ邋ｐｈｅｎｏｌｓ邋ｗｉｔｈ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｓｏｌｖｅｎｔ逡逑２．４．２結合型多酚化學物的提取溶劑的選擇結果逡逑不同提取溶劑對結合型石榴皮多酚提取效果如圖２－３所示，從圖中可見，酸性提逡逑取條件下丙酮提取的量要遠高于其他溶劑的提取量，其次為水和甲醇，因此可采用丙逡逑酮作為酸降解提取結合型多酚的最佳溶劑。堿性提取條件下水提取的效果最好，其次逡逑為丙酮和甲醇。分別采用酸降解和堿降解法對石榴皮結合酚進行提取，發(fā)現(xiàn)酸降解釋逡逑放的結合酚含量普遍高于堿降解，因此本研究采用酸降解提取結合酚的方式。逡逑１０逡
【學位授予單位】：南京農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R284.1;R285

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 柏杜文;;石榴皮的藥用[J];農(nóng)村新技術;2019年04期

2 耿立文;;驗方選登[J];老年教育(長者家園);2016年12期

3 何國興;;石榴皮祛頑疾[J];家庭醫(yī)學;2017年01期

4 周止敬;;大佳水果:石榴[J];家庭醫(yī)學;2016年10期

5 夏道倫;;石榴皮可治療動物的多種疾病[J];廣東飼料;2014年09期

6 付軍;李正;;石榴皮鞣質(zhì)的藥理學研究進展[J];中國藥業(yè);2011年24期

7 徐紅偉;周光;;石榴皮外用治療燒傷[J];中國民間療法;2010年11期

8 帕麗達·阿不力孜;熱娜·卡斯木;叢媛媛;張笑穎;;電感耦合等離子體光譜法測定新疆石榴皮中的微量元素[J];微量元素與健康研究;2008年02期

9 ;石榴皮可治兔痢疾[J];北京農(nóng)業(yè);1994年01期

10 許學用;;治赤痢驗方[J];中醫(yī)函授通訊;1988年02期

相關會議論文 前10條

1 連軍;丁瑋;楊衛(wèi)星;伊永進;;石榴皮醇提物治療2型糖尿病大鼠的實驗研究[A];第十屆中國實驗動物科學年會論文集[C];2012年

2 王菲;馮立娟;楊雪梅;武沖;尹燕雷;;石榴褐變、保鮮及生物活性物質(zhì)研究進展[A];第二屆中國石榴博覽會暨第七屆全國石榴生產(chǎn)與科研研討會論文集[C];2017年

3 劉姍姍;張愛麗;崔希云;艾洪濱;;束縛-浸水應激對石榴皮多酚在大鼠體內(nèi)分布的影響[A];中國解剖學會2012年年會論文文摘匯編[C];2012年

4 孫雨晴;陶新;徐子偉;;酶解石榴皮多酚與原石榴皮多酚的成分和抗氧化活性比較[A];中國畜牧獸醫(yī)學會動物營養(yǎng)學分會第十二次動物營養(yǎng)學術研討會論文集[C];2016年

5 向暉;;石榴營養(yǎng)保健功能與藥用價值[A];2012年“全國醫(yī)院藥學(藥事管理)學術會議”論文集[C];2012年

6 崔希云;張愛麗;祝建平;;石榴皮多酚對束縛浸水應激大鼠胃腸壁肌間神經(jīng)叢內(nèi)神經(jīng)元活動的影響[A];中國生理學會第24屆全國會員代表大會暨生理學學術大會論文匯編[C];2014年

7 孫斐;;石榴提取物在氧化應激介導的雄性不育中的作用[A];第十一次全國中西醫(yī)結合男科學術大會暨重慶市中西醫(yī)結合學會2016年男科學術大會論文集[C];2016年

8 楊紫濃;張杰;劉繡華;;石榴皮提取液制備納米銀[A];中國化學會第30屆學術年會摘要集-第三十三分會：綠色化學[C];2016年

9 孫雨晴;徐子偉;;單寧酶轉化石榴皮多酚的工藝條件研究[A];第七屆中國飼料營養(yǎng)學術研討會論文集[C];2014年

10 陳澤慧;;石榴皮鞣質(zhì)單體對鮑曼不動桿菌的抑菌效果及抑菌機制研究[A];中華醫(yī)學會2014全國微生物學與免疫學學術年會論文匯編[C];2014年

相關重要報紙文章 前10條

1 本報記者 石瑩瑩;日子過得像石榴一樣紅紅火火[N];和田日報(漢);2018年

2 韋良渠;石榴實用便方[N];中國中醫(yī)藥報;2017年

3 江玉哲;石榴皮在養(yǎng)兔急救中的妙用[N];中國畜牧獸醫(yī)報;2009年

4 胡獻國;藥食兩用說石榴[N];中國中醫(yī)藥報;2000年

5 ;石榴皮[N];中國中醫(yī)藥報;2013年

6 記者 牛金輝;科技給力 石榴皮“化身”抑菌良藥[N];新疆科技報(漢);2011年

7 郭好水;石榴皮驅蛔蟲[N];民族醫(yī)藥報;2002年

8 徐富華;石榴皮治療畜病效果好[N];中國畜牧獸醫(yī)報;2006年

9 趙家峰;常備石榴皮 畜病不著急[N];湖北科技報;2006年

10 記者 郎花;我區(qū)科研人員利用石榴皮有效成分開發(fā)出制劑[N];新疆科技報(漢);2016年

相關博士學位論文 前5條

1 孫雨晴;石榴皮多酚及其酶解產(chǎn)物的抗氧化活性和對氧化應激小鼠的保護作用研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2016年

2 趙勝娟;石榴多酚對血脂的影響及促進泡沫細胞膽固醇流出的分子機制研究[D];陜西師范大學;2017年

3 程霜;石榴皮萃取物抗氧化和降血脂作用與成分研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2005年

4 帕麗達·阿不力孜;新疆石榴皮植物雌激素物質(zhì)基礎及石榴品種RAPD分析研究[D];新疆醫(yī)科大學;2008年

5 曲文娟;石榴果皮多酚提取及殘渣的能源化利用[D];江蘇大學;2010年

相關碩士學位論文 前10條

1 黃思琪;結合型石榴皮化學成分及其抑菌活性研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2017年

2 李云;石榴皮多糖的提取、純化及免疫調(diào)節(jié)作用研究[D];陜西師范大學;2018年

3 王峰;不同濃度石榴皮多酚軟膏對皮脂及其成分亞油酸、膽固醇的影響[D];湖南中醫(yī)藥大學;2018年

4 時雙千;石榴皮多酚超聲影響和抗氧化性及與卵清蛋白作用研究[D];江蘇大學;2017年

5 王華斌;石榴皮多酚提取純化及納米乳制備工藝研究[D];新疆農(nóng)業(yè)大學;2011年

6 史李娜;石榴皮多酚有效部位抗消化性潰瘍的藥效學研究[D];新疆醫(yī)科大學;2015年

7 郭燕飛;石榴皮多酚的分級制備及生物活性研究[D];江南大學;2014年

8 李左龍;石榴皮多糖免疫與抗氧化活性初步研究[D];新疆農(nóng)業(yè)大學;2013年

9 王春梅;石榴皮多酚抗腫瘤活性機制的初步研究[D];新疆醫(yī)科大學;2013年

10 唐鵬程;石榴皮總多酚提取、分離純化、活性及成分分析研究[D];西華大學;2011年

本文編號：2648520