【摘要】：調(diào)胃承氣湯是傳統(tǒng)瀉下方劑,由大黃、甘草、芒硝組成。其中,大黃瀉下峻猛,配伍甘草以緩其性。為探討甘草配伍解毒的本質(zhì),尤其是胃腸道代謝環(huán)節(jié),本課題基于前期研究結(jié)果,對(duì)大黃主要蒽醌類成分的人源腸道菌代謝進(jìn)行進(jìn)一步研究,在此基礎(chǔ)上,采用Caco-2細(xì)胞單層模型考察大黃配伍甘草及調(diào)胃承氣湯全方對(duì)毒性成分大黃酸攝取和轉(zhuǎn)運(yùn)的影響,結(jié)合考察甘草水煎液對(duì)大黃酸損傷的HK-2細(xì)胞的影響,進(jìn)而揭示甘草可能的配伍解毒機(jī)制。結(jié)果表明,大黃蒽醌類成分在人源腸道菌中發(fā)生代謝,共鑒定出10種代謝產(chǎn)物,主要的代謝途徑有甲基化、酯化、去糖基化及羥基化。毒性成分大黃酸在Caco-2細(xì)胞以主動(dòng)擴(kuò)散為主要跨細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)方式(考察的濃度范圍內(nèi)),轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白BCRP主要參與了大黃酸的外排轉(zhuǎn)運(yùn);配伍甘草水煎液、大黃甘草水煎液和調(diào)胃承氣湯全方配伍均能顯著降低大黃酸的吸收(P_(app AP-BL))(P0.05),并顯著增加大黃酸的分泌(P_(app BL-AP))(P0.05),提高大黃酸的外排率,說明配伍甘草水煎液及全方配伍能顯著降低大黃酸在Caco-2細(xì)胞中的吸收。此外,配伍甘草對(duì)于大黃酸損傷的人腎小管上皮細(xì)胞(HK-2)的毒性比較研究結(jié)果表明,大黃酸對(duì)HK-2細(xì)胞具有明顯的細(xì)胞毒性作用,配伍甘草水煎液后,對(duì)于大黃酸損傷后的HK-2細(xì)胞并無修復(fù)作用。本研究對(duì)大黃蒽醌類成分腸道菌代謝進(jìn)行研究,并通過考察大黃單煎液、甘草單煎液、大黃甘草共煎液及全方配伍對(duì)毒性成分大黃酸的吸收轉(zhuǎn)運(yùn)的變化規(guī)律,結(jié)合配伍甘草水煎液后對(duì)大黃酸損傷的HK-2細(xì)胞的影響,從吸收轉(zhuǎn)運(yùn)角度揭示了甘草的解毒效應(yīng)機(jī)制,為調(diào)胃承氣湯的藥效學(xué)研究奠定了一定的基礎(chǔ),也為其臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。
【圖文】：

大黃酚在人源腸道菌中的代謝變化

=21.70 min）的準(zhǔn)分子離子峰 [M-H]-m/z 285（圖2-2），比大黃酚（母體化合物）的準(zhǔn)分子離子峰 [M-H]-m/z 253 高了32 Da，，推測(cè)可能是一個(gè)二羥基取代物。代謝產(chǎn)物M1與母體化合物大黃酚的主要區(qū)別在于C-4 上是否存在羥基。因此，代謝產(chǎn)物M1推斷為1,4,8-三羥基-3-羥甲基蒽醌，并分析出M1可能的質(zhì)譜裂解規(guī)律（圖2-3）。圖 2-2 大黃酚在人源腸道菌中的代謝產(chǎn)物 UPLC-MS 提取離子流圖Figure 2-2 Extracted ion chromatograms (XICs) of chrysophanol by human fecal bacteria-H-H-H-H-HOH OHCH2OHOHOOOH OOOHOCH2OH OHOHOOOH OOHOOOM1[M-H]-m/z 285m/z 267m/z 255m/z 239m/z183-H2O-CH 2O-CH2O2-2CO圖 2-3 大黃酚在人源腸道菌中的代謝產(chǎn)物可能的質(zhì)譜裂解規(guī)律Figure 2-3 Proposed fragmentation pathways of chrysophanol by human fecal bacteria3.3.2大黃酸在人源腸道菌混合物中的代謝產(chǎn)物鑒定大黃酸在人源腸道菌混合物中的代謝隨著時(shí)間的變化如圖2-4(a)所示。
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R285

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2629660