【摘要】：本課題以韭菜地上部分作為研究對象,以Vc為陽性對照,采用普魯士藍(lán)法、鄰二氮菲-Fe~(2+)氧化法、鄰苯三酚自氧化法、DPPH法、ABTS法研究韭菜地上部分不同極性部位的抗氧化活性;利用水蒸氣蒸餾法、單因素和正交試驗優(yōu)化研究了韭菜揮發(fā)油的提取工藝及蒜氨酸酶對揮發(fā)油成分的影響;采用紙片法和超微藥粉瓊脂稀釋法研究了韭菜地上部分不同極性部位和揮發(fā)油的抗菌作用;在上述基礎(chǔ)上,利用MTT法研究韭菜地上部分不同極性部位與揮發(fā)油對RAW和SiHa細(xì)胞的體外抑制作用。具體結(jié)果如下:(1)從韭菜地上部分干燥粉末中加入75%乙醇溶液以料液比1:8(g/mL)和1:3(g/mL)回流兩次,將濃縮后的乙醇溶液依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇進(jìn)行萃取,得到乙醇相、石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相和水相五個不同的極性部位。韭菜的五種提取物均具有一定體外抗氧化能力。其中,總還原能力大小順序為:水相乙醇相≈乙酸乙酯相≈正丁醇相石油醚相;·OH清除能力大小順序為:乙醇相乙酸乙酯相石油醚相正丁醇相水相;O~(2-)清除能力大小順序為:乙醇相≈石油醚相≈乙酸乙酯相正丁醇相水相;DPPH·清除能力大小順序:乙醇相≈正丁醇相乙酸乙酯相水相(低濃度)石油醚相;ABTS~+·清除能力大小順序為:乙酸乙酯相乙醇相正丁醇相水相石油醚相。實驗結(jié)果說明,韭菜乙醇相和乙酸乙酯相的抗氧化效果較好。(2)從新鮮韭菜中提取揮發(fā)油的最佳工藝條件為:料液比1:0.5(g/mL)70℃水浴滅酶后40℃水浴保溫30 min,超聲40 min,利用揮發(fā)油提取器提取6 h,餾出液冰鹽水冷卻后進(jìn)行酶解處理,用二氯甲烷進(jìn)行萃取后揮干試劑。該條件下新鮮韭菜揮發(fā)油提取率為0.0388%,制備的揮發(fā)油澄明無雜質(zhì),色澤亮黃且具有濃烈的韭菜氣味。GC-MS結(jié)果顯示,酶解處理的韭菜揮發(fā)油中含硫量(88.18%)稍高于未酶解處理的揮發(fā)油(87.52%),主要成分均為二甲基二硫和二甲基三硫。(3)韭菜六種不同極性部位及揮發(fā)油對于鮑曼不動桿菌、肺炎鏈球菌、枯草芽孢桿菌、蘇云金桿菌、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、糞腸球菌均有明顯的抑制作用。乙醇相對肺炎鏈球菌有著較好的抗菌殺菌作用,其MIC值為0.0025 g/mL,MBC值為0.03g/mL;石油醚相對肺炎鏈球菌、枯草芽孢桿菌和糞腸球菌有著較好的抑菌效果,其MIC值可達(dá)到0.005 g/mL;石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相、水相對糞腸球菌的殺菌效果相當(dāng),MBC值最低達(dá)到0.02g/mL;乙酸乙酯相、正丁醇相、水相分別對金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、枯草芽孢桿菌有著較好的抑菌效果,其MIC值均為0.0025 g/mL。超微藥粉瓊脂稀釋法較紙片法更加簡便快捷,處理量大,節(jié)約實驗成本。(4)韭菜的六種提取物對RAW 264.7抗炎細(xì)胞無細(xì)胞毒害作用;對SiHa腫瘤細(xì)胞具有一定的抑制作用,并顯示了濃度和時間的依賴性。100μg/mL樣品溶液作用于SiHa細(xì)胞72 h時,抑制率大小順序為:乙酸乙酯相㧐乙醇相㧐石油醚相㧐正丁醇相㧐水相㧐揮發(fā)油,其中乙酸乙酯相對SiHa細(xì)胞的抑制率為29.93%,揮發(fā)油的抑制率最低僅為18.57%。綜上,本課題對韭菜不同極性部分進(jìn)行抗氧化活性比較,各相均具有一定的體外抗氧化能力;優(yōu)化了韭菜揮發(fā)油提取工藝,并明確了蒜氨酸酶酶解有利于提高韭菜揮發(fā)油的含硫量;證明了韭菜具有抗菌能力,其中乙酸乙酯相和正丁醇相效果較好;考察了韭菜不同提取物對SiHa及RAW細(xì)胞的影響,證明乙酸乙酯相對SiHa細(xì)胞有較好的抑制作用,各樣品對RAW細(xì)胞均無細(xì)胞毒作用。
【圖文】：

2.4 結(jié)果與分析2.4.1 總還原能力由圖2-1可知，在總還原能力的測定中，韭菜不同極性部位與Vc相差較大，，后者的總還原能力顯著強(qiáng)于前者韭菜各相提取物。韭菜各

Fig.2-2 The scavenging ability of different polar parts of Chinese chive on hydroxylradicals由圖2-2可知，韭菜各不同極性部位對·OH清除率的趨勢類似，清除率均隨濃度增加而升高呈現(xiàn)明顯的劑量依賴性，在低濃度時（<0.6g/mL）清除率均低于陽性對照Vc，而當(dāng)樣品濃度達(dá)到1.0 g/mL時，乙醇相和乙酸乙酯相的·OH清除率分別達(dá)到73.2%和67
【學(xué)位授予單位】：武漢工程大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R284.2

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本文編號：2599185