發(fā)布時間：2017-05-30 06:07

  本文關(guān)鍵詞：低濃度毒死蜱對神經(jīng)前體細胞和端腦發(fā)育的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：毒死蜱(Chlorpyrifos,CPF)是廣泛使用的殺蟲劑,能引起胚胎腦發(fā)育異常,造成子代動物智能損傷,其毒性機制尚不清楚。本文探討其胚胎神經(jīng)前體細胞發(fā)育損傷機制。首先,對妊娠7.5-11.5天的母鼠,連續(xù)5天暴露0、1、3、5mg/kg CPF,制備胚胎14天切片,分別進行HE染色和Pax6、Tbr2、Tuj1免疫組化染色。結(jié)果發(fā)現(xiàn),當CPF暴露濃度為5mg/kg時,側(cè)腦室壁VZ層細胞減少15.8%,CP層細胞增加28.7%,其余濃度各層細胞沒有顯著變化。CPF引起Pax6和Tbr2陽性細胞數(shù)量減少,但沒有引起Tuj1陽性細胞的數(shù)量變化。然后,對妊娠14天母鼠以3h為間隔多次暴露5mg/kg CPF,染毒期間注射Brdu標記S期增殖細胞,制備胚胎Brdu免疫組化切片。結(jié)果表明,CPF造成標記1、3、6h時Brdu+核更多地分布于側(cè)腦室壁基底部分,而較少分布于頂端,提示核遷移運動減緩;在妊娠7.5-11.5母鼠暴露連續(xù)5天的5mg/kg/d CPF,E14時加以Brdu標記,Brdu免疫組化結(jié)果發(fā)現(xiàn),CPF仍能引起核遷移運動減緩,但影響程度較輕。最后,對妊娠7.5-11.5天的母鼠,連續(xù)5天暴露5mg/kg CPF,制備E12、14、18海馬冠狀切片,分析海馬區(qū)域細胞的數(shù)量。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),CPF引起E12海馬原基細胞減少18.6%,E14海馬DG原基細胞減少13.6%,E18海馬CA3、DG區(qū)細胞減少21.6%和12.6%。本實驗表明,CPF能降低神經(jīng)前體細胞的核移行速度,抑制增殖性前體細胞的數(shù)量,改變側(cè)腦室壁細胞分層結(jié)構(gòu),并能擾亂海馬腦區(qū)發(fā)育。我們的研究為CPF致成年期智能損傷提供了胚胎期的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：毒死蜱 神經(jīng)發(fā)育毒性 神經(jīng)前體細胞 周期性核移行 海馬發(fā)生
【學(xué)位授予單位】：浙江工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R114
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-11
• 主要縮略詞一覽表11-12
• 第一章 綜述12-23
• 1.1 引言12-13
• 1.2 胚胎神經(jīng)發(fā)育13-18
• 1.2.1 側(cè)腦室壁的發(fā)育13-14
• 1.2.2 胚胎神經(jīng)前體細胞14-16
• 1.2.3 APs的核移行現(xiàn)象16-18
• 1.3 海馬腦區(qū)發(fā)育18-20
• 1.3.1 海馬的形態(tài)結(jié)構(gòu)18-19
• 1.3.2 海馬形態(tài)發(fā)生19-20
• 1.4 農(nóng)藥神經(jīng)發(fā)育毒20-22
• 1.4.1 細胞毒性21
• 1.4.2 神經(jīng)遞質(zhì)毒性21
• 1.4.3 認知行為毒性21-22
• 1.5 研究背景和意義22
• 1.6 研究內(nèi)容和創(chuàng)新點22-23
• 第二章 毒死蜱對胚胎側(cè)腦室壁組織結(jié)構(gòu)的影響23-39
• 前言23
• 2.1 實驗用材23-27
• 2.1.1 實驗動物23
• 2.1.2 主要耗材及儀器23-25
• 2.1.3 試劑配制25-27
• 2.2 方法27-31
• 2.2.1 動物分組及處理27
• 2.2.2 胚胎制備與固定27
• 2.2.3 石蠟切片27-28
• 2.2.3.1 石蠟包埋27-28
• 2.2.3.2 切片28
• 2.2.4 HE染色28
• 2.2.5 Pax6、Tbr2、Tuj1免疫組化28-29
• 2.2.6 側(cè)腦室壁定位與分層29-31
• 2.2.7 統(tǒng)計分析31
• 2.3 實驗結(jié)果31-37
• 2.3.1 CPF對側(cè)腦室壁細胞形態(tài)的影響31-32
• 2.3.2 CPF對E14側(cè)腦室壁各分層細胞的影響32-33
• 2.3.3 CPF對APs的影響33-34
• 2.3.4 CPF對BPs的影響34-36
• 2.3.5 CPF對神經(jīng)元的影響36-37
• 2.4 討論37-39
• 第三章 毒死蜱對頂端前體細胞周期性核移行的影響39-48
• 前言39
• 3.1 實驗用材39-40
• 3.1.1 實驗動物39
• 3.1.2 主要耗材及儀器39
• 3.1.3 試劑配制39-40
• 3.2 方法40-42
• 3.2.1 動物分組及處理40
• 3.2.2 胚胎制備與固定40-41
• 3.2.3 石蠟切片41
• 3.2.4 免疫組化41
• 3.2.5 定位及計數(shù)41-42
• 3.2.6 統(tǒng)計分析42
• 3.3 結(jié)果42-46
• 3.3.1 CPF預(yù)先暴露對INM的影響42-44
• 3.3.2 CPF即時暴露對INM的影響44-46
• 3.4 討論46-48
• 第四章 毒死蜱對胚胎海馬發(fā)育的影響48-61
• 前言48
• 4.1 實驗用材48
• 4.1.1 實驗動物48
• 4.1.2 主要耗材及儀器48
• 4.1.3 試劑配制48
• 4.2 方法48-50
• 4.2.1 動物分組及處理48-49
• 4.2.2 胚胎制備與固定49
• 4.2.3 石蠟切片49
• 4.2.4 HE染色49
• 4.2.5 各時期海馬形態(tài)觀察及計數(shù)49-50
• 4.2.6 統(tǒng)計分析50
• 4.3 結(jié)果50-60
• 4.3.1 CPF對E12海馬原基細胞的影響50-52
• 4.3.2 CPF對E14海馬原基細胞的影響52-56
• 4.3.3 CPF對E18海馬細胞的影響56-60
• 4.4 討論60-61
• 第五章 實驗總結(jié)與展望61-62
• 參考文獻62-75
• 致謝75-76
• 讀研期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文76

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本文編號：406518