真菌耐藥性一直是真菌病治療的難題�？咕亩喟悬c作用機制有可能是解決真菌耐藥性問題的最佳選擇�？咕腃GA-N12和CGA-N9為衍生自嗜鉻粒蛋白A(CGA)N端的抗念珠菌活性肽,CGA-N12由N端第65至76位氨基酸組成,CGA-N9由N端第47至55位氨基酸組成。前期研究結(jié)果表明,CGA-N12和CGA-N9在不破壞細胞膜完整性的情況下,誘導(dǎo)念珠菌細胞凋亡,但其對細胞膜結(jié)構(gòu)的影響尚不清楚。本研究旨在探究CGA-N12和CGA-N9作用時念珠菌細胞膜結(jié)構(gòu)的變化,豐富抗菌肽膜活性機制理論體系,并為將CGA-N12和CGA-N9開發(fā)成為新型抗真菌藥物提供理論基礎(chǔ)。本文通過使用熒光探針、原子力顯微鏡(AFM)、離子體原子發(fā)射光譜儀(ICP-OES)、紫外分光光度計等研究了CGA-N12和CGA-N9對熱帶念珠菌細胞膜電位、膜流動性、細胞膜表面結(jié)構(gòu)、鉀離子泄露、質(zhì)膜中麥角甾醇的含量變化以及誘導(dǎo)脂質(zhì)體通道孔徑的影響。進一步,通過熒光染料鈣黃綠素(calcein)和CF的泄漏情況,檢測不同濃度CGA-N12和CGA-N9對膜完整性影響的變化規(guī)律及誘導(dǎo)形成通道的規(guī)律。結(jié)果表明,CGA-N12在熱帶...

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
1 緒論
    1.1 抗菌肽
    1.2 抗菌肽的來源
    1.3 抗菌肽的應(yīng)用前景
    1.4 微生物細胞膜結(jié)構(gòu)與組成
    1.5 抗菌肽的膜作用機制
        1.5.1 桶板作用機制
        1.5.2 蟲孔作用機制
        1.5.3 毯式作用機制
        1.5.4 非破膜肽膜作用機制
    1.6 CGA-N12、CGA-N9 的來源及研究進展
    1.7 選題意義
2 抗菌肽CGA-N12對熱帶念珠菌細胞膜結(jié)構(gòu)的影響
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗菌株
        2.1.2 主要使用試劑
        2.1.3 主要使用儀器
        2.1.4 主要溶液配置
    2.2 實驗方法
        2.2.1 抗菌肽合成及純化
        2.2.2 抗菌肽對熱帶念珠菌細胞膜結(jié)構(gòu)的影響
        2.2.3 抗菌肽CGA-N12對類念珠菌細胞膜結(jié)構(gòu)的影響
    2.3 實驗結(jié)果
        2.3.1 CGA-N12使細胞膜流動性增加
        2.3.2 CGA-N12對細胞膜麥角固醇含量無影響
        2.3.3 細胞膜表面的結(jié)構(gòu)變化
        2.3.4 細胞膜去極化
        2.3.5 K+泄漏
        2.3.6 脂質(zhì)體的表征
        2.3.7 CGA-N12 誘導(dǎo)脂質(zhì)體lucigenin泄漏
        2.3.8 CGA-N12誘導(dǎo)脂質(zhì)體膜發(fā)生質(zhì)子滲透
        2.3.9 CGA-N12 誘導(dǎo)脂質(zhì)體CF泄漏
        2.3.10 不同濃度CGA-N12對膜通道孔徑大小的影響
        2.3.11 不同濃度CGA-N12對膜結(jié)構(gòu)完整性的影響
3 CGA-N9對熱帶念珠菌細胞膜結(jié)構(gòu)的影響
    3.1 實驗材料
        3.1.1 主要試劑
        3.1.2 主要儀器
        3.1.3 主要溶液配置
    3.2 實驗方法
        3.2.1 抗菌肽CGA-N9對念珠菌細胞膜結(jié)構(gòu)的影響
        3.2.2 抗菌肽CGA-N9對類念珠菌細胞膜結(jié)構(gòu)的影響
    3.3 實驗結(jié)果
        3.3.1 CGA-N9誘導(dǎo)鉀離子外流
        3.3.2 CGA-N9不影響麥角固醇含量
        3.3.3 脂質(zhì)體的CF泄漏
        3.3.4 不同濃度CGA-N9對膜通道孔徑大小的影響
        3.3.5 不同濃度CGA-N9對膜結(jié)構(gòu)完整性的影響
4 討論
結(jié)論
參考文獻
致謝
個人簡歷



本文編號：3986678