SMUG1(Single-strand-selective monofunctional uracil DNA glycosylase 1)是單鏈選擇性單功能尿嘧啶DNA糖基化酶1,能夠引發(fā)堿基切除修復(fù)(Base Excision Repair,BER)途徑,切除摻入到DNA中的尿嘧啶、5-羥甲基尿嘧啶(5-hydroxymethyluracil,5-hmU)和5-氟尿嘧啶(5-fluoropyrimidines,5-FU)。5-FU是一種抗代謝藥物,被廣泛使用于腫瘤的化學(xué)治療。在第一部分的實(shí)驗(yàn)研究中,我們首先利用免疫熒光染色法檢測(cè)了SMUG1在卵母細(xì)胞和早期胚胎中的定位。接著通過SMUG1-Morpholino特異性地敲低了SMUG1,并探討了其在卵母細(xì)胞成熟和早期胚胎發(fā)育過程中所起的作用。最后檢測(cè)了SMUG1對(duì)合子DNA去甲基化進(jìn)程的影響。結(jié)果表明,SMUG1在卵母細(xì)胞和早期胚胎的各階段均有表達(dá),且主要定位在細(xì)胞核中。SMUG1的敲低不會(huì)對(duì)卵母細(xì)胞的成熟進(jìn)程產(chǎn)生影響,但會(huì)顯著抑制早期胚胎的發(fā)育。此外,在1-細(xì)胞胚胎中敲低SMUG1不會(huì)影響DNA去甲基化進(jìn)程。在第二部分的實(shí)驗(yàn)研究中,...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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圖1.1SMUG1的結(jié)構(gòu)示意圖

3圖1.1SMUG1的結(jié)構(gòu)示意圖[8]G1的二級(jí)結(jié)構(gòu)圖像，彩虹顏色從藍(lán)色到紅色表示從N端到C端。圖（B）螺旋，綠色表示β折疊，黃色表示卷曲。（C）一對(duì)立體的SMUG1，顯示）顯示了分子表面的縫隙和凹陷嘧啶結(jié)合處。Figure1.1SMUG1Struc....

圖1.2卵母細(xì)胞向胚胎轉(zhuǎn)化過程中的DNA甲基化動(dòng)態(tài)[12]

受精不久后，父本基因組迅速發(fā)生去甲基化，在原核晚期，雄原核中5-hmC遠(yuǎn)高于5-mC（如圖1.2）[14,15]。圖1.2卵母細(xì)胞向胚胎轉(zhuǎn)化過程中的DNA甲基化動(dòng)態(tài)[12]父本和母本的基因組在受精后經(jīng)歷了復(fù)雜的、不同的DNA去甲基化進(jìn)程。在合子S期前，TET酶會(huì)介導(dǎo)去除雄原核....

圖1.3DNA去甲基化途徑[24]

圖1.3DNA去甲基化途徑[24]5-mC去甲基化背后最合理的機(jī)制涉及到TET蛋白，其參與了5-mC到5-hmC的氧化；后者進(jìn)一步成為5-fC和5-caC。然后，激活DNA糖基化酶TDG的堿基切除修復(fù)途徑以修復(fù)上述堿基修飾（5-fCC）并用胞嘧啶取代....

圖1.4DNA去甲基化過程中RNA和蛋白質(zhì)表達(dá)熱圖

圖1.4DNA去甲基化過程中RNA和蛋白質(zhì)表達(dá)熱圖[25]小鼠早期胚胎從合子到囊胚的發(fā)育過程中，SMUG1的RNA和蛋白質(zhì)均表現(xiàn)出了逐漸下降的趨勢(shì)。Figure1.4RNAandproteinexpressionprofilesrepresentedasheat....

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