目的:為了探索p70S6K1是否參與肝細(xì)胞癌對索拉菲尼的耐藥,以及探討索拉菲尼誘導(dǎo)耐藥后p70S6K1對肝癌細(xì)胞的分子作用機(jī)制,從而明確p70S6K1作為耐藥性肝癌的潛在治療靶標(biāo),豐富肝癌治療手段。方法:1、收集了肝癌患者手術(shù)標(biāo)本及病例資料92例,分析其臨床生化檢驗指標(biāo)以及選取其中20例經(jīng)10%福爾馬林固定、取材、包埋、制片后,經(jīng)常規(guī)HE染色后選取典型蠟塊,應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色檢測耐藥性肝細(xì)胞內(nèi)源性p70S6K1,TOPO II,TP53,Ki-67蛋白表達(dá)的變化,另外進(jìn)一步利用RT-PCR檢測耐藥性肝細(xì)胞內(nèi)源性p70S6K1mRNAs水平在肝癌及癌旁組織種的表達(dá)。2、構(gòu)建索拉菲尼耐藥HepG2細(xì)胞株,采用熒光定量PCR檢測索拉菲尼耐藥HepG2細(xì)胞內(nèi)p70S6K1mRNAs水平在肝癌及癌旁組織種的表達(dá)。進(jìn)而進(jìn)一步運(yùn)用CCK8細(xì)胞增殖法和免疫熒光染色法探討細(xì)胞生長與增殖狀況,進(jìn)而評價耐藥性對細(xì)胞存活的影響。3、應(yīng)用shRNA技術(shù)構(gòu)建索拉菲尼耐藥HepG2細(xì)胞株p70S6K1敲低模型,通過轉(zhuǎn)染后克隆實驗進(jìn)一步驗證p70S6K1對耐藥性肝癌細(xì)胞增殖作用。然后通過免疫熒光檢測p70S6K1敲...

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
個人簡歷
中英文縮略詞表
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 p70S6K1與臨床索拉菲尼耐藥性肝細(xì)胞癌發(fā)病的相關(guān)性研究
    1 實驗材料
    2 實驗方法
    3 實驗結(jié)果
    4 實驗討論
    5 小結(jié)
第二部分 p70S6K1對索拉菲尼耐藥性肝癌細(xì)胞的作用及分子機(jī)制的研究
    1 實驗材料
    2 實驗方法
    3 實驗結(jié)果
    4 實驗討論
    5 小結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄



本文編號：3919800