本研究旨在探討NADPH氧化酶活化在油酸誘導(dǎo)的H9c2心肌細(xì)胞損傷中的作用.以體外培養(yǎng)H9c2心肌細(xì)胞為研究對(duì)象,用不同濃度(200,400,800μmol/L)油酸刺激H9c2心肌細(xì)胞(24,48,72 h),采用MTT法檢測(cè)細(xì)胞活力;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧和凋亡指標(biāo);免疫印跡法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)Caspase 3,Bax,Bcl-2變化.結(jié)果表明,油酸刺激明顯抑制細(xì)胞增殖、細(xì)胞內(nèi)活性氧水平明顯增加、Cleaved-caspase 3蛋白水平明顯增加、Bcl-2/Bax蛋白水平明顯降低;NADPH氧化酶抑制劑DPI預(yù)處理明顯改善油酸所致H9c2心肌細(xì)胞增殖抑制、活性氧增加和凋亡.本研究結(jié)果提示NADPH氧化酶活化參與油酸所致H9c2心肌細(xì)胞凋亡.

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【文章目錄】：
1 材料
    1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞系
    1.2 儀器與設(shè)備
    1.3 材料與試劑
2 方法
    2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
    2.2 油酸的配制
    2.3 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)分組
        2.3.1 油酸干預(yù)實(shí)驗(yàn)
        2.3.2 抑制劑干預(yù)實(shí)驗(yàn)
    2.4 細(xì)胞活力檢測(cè)
    2.5 細(xì)胞內(nèi)ROS檢測(cè)
    2.6 細(xì)胞凋亡檢測(cè)
    2.7 細(xì)胞內(nèi)蛋白表達(dá)檢測(cè)
    2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
3 結(jié)果
    3.1 油酸刺激引起H9c2心肌細(xì)胞增殖抑制
    3.2 油酸刺激引起H9c2心肌細(xì)胞內(nèi)ROS的產(chǎn)生
    3.3 NADPH氧化酶抑制劑降低油酸引起H9c2心肌細(xì)胞內(nèi)ROS的產(chǎn)生
    3.4 NADPH氧化酶抑制劑降低油酸引起H9c2心肌細(xì)胞增殖抑制
    3.5 NADPH氧化酶抑制劑抑制油酸引起H9c2心肌細(xì)胞凋亡
        3.5.1 Western blot法檢測(cè)細(xì)胞凋亡
        3.5.2 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡
4 討論
5 結(jié)論



本文編號(hào)：3797914