目的探討在高糖環(huán)境下西格列汀對大鼠心肌細胞纖維化過程中骨膜蛋白(POSTN)及轉(zhuǎn)錄激活蛋白-1表達(AP-1)的影響。方法將大鼠心肌細胞H9c2復(fù)蘇后接種于含體積分數(shù)10%胎牛血清的改良型洛斯維1640培養(yǎng)基持續(xù)培養(yǎng),并用無血清培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)使其同步化;將同步化的H9c2細胞分為對照組、高糖損傷組及西格列汀處理組,對照組H9c2細胞予以普通培養(yǎng)液,高糖損傷組H9c2細胞予以葡萄糖濃度為33.0 mmol·L^-1的培養(yǎng)基,西格列汀處理組H9c2細胞予以終濃度為33.0 mmol·L^-1葡萄糖+0.1μmol·L^-1西格列汀的培養(yǎng)基。采用細胞計數(shù)試劑盒-8檢測細胞活力。酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測H9c2細胞上清液中Ⅲ型膠原蛋白(COLⅢ)表達水平;免疫組織化學(xué)法檢測H9c2細胞中AP-1蛋白表達水平;反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)檢測H9c2細胞中POSTN和AP-1 mRNA表達水平。結(jié)果高糖損傷組和西格列汀處理組H9c2細胞增殖活力均顯著高于對照組(P <0.05);西格列汀處理組H9c2細胞增殖活力顯著低于高糖損傷組(P <...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細胞、主要試劑與儀器
    1.2 實驗方法
        1.2.1 細胞培養(yǎng)及分組
        1.2.2 CCK-8檢測H9c2細胞增殖活力
        1.2.3 ELISA檢測H9c2細胞上清液中COLⅢ表達水平
        1.2.4 免疫組織化學(xué)法檢測H9c2細胞中AP-1表達水平
        1.2.5 RT-PCR檢測H9c2細胞中POSTN、AP-1mRNA表達水平
    1.3 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 3組H9c2細胞增殖活力比較
    2.2 3組H9c2細胞上清液中COLⅢ表達水平比較
    2.3 3組H9c2細胞中AP-1表達水平比較
    2.4 3組H9c2細胞中POSTN和AP-1 mRNA表達水平比較
3 討論



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