肝細(xì)胞癌（HCC）在原發(fā)性肝癌中占了將近90%的高比例,嚴(yán)重危害人類健康。核酸適配體（AP）是一種全新的識別分子,目前用途很廣泛。本課題采取了化學(xué)偶聯(lián)和物理包埋兩種合成方法將核酸適配體（AP）修飾到實(shí)驗(yàn)室前期合成的殼聚糖-氟尿嘧啶（CS-FUA）上。利用市售的在5’端修飾有羧基（-COOH）的AP與含有氨基（-NH₂）的殼聚糖分子通過氨基與羧基的酰胺縮合反應(yīng),成功制備化學(xué)偶聯(lián)的核酸適配體-殼聚糖-氟尿嘧啶（AP-（CS-FUA））。利用CS-FUA自身的豐富氨基攜帶正電荷,與修飾了羧基（-COOH）的AP的負(fù)電荷進(jìn)行靜電結(jié)合,成功合成靜電吸附的核酸適配體/殼聚糖-氟尿嘧啶（（CS-FUA）/AP）,并對其進(jìn)行理化性質(zhì)表征、生物安全性與抗肝癌作用等進(jìn)行研究,具體研究如下:首先分別采用市售的在5’端修飾有羧基（-COOH）的AP與含有氨基（-NH₂）的殼聚糖分子通過氨基與羧基的酰胺縮合反應(yīng),成功制備化學(xué)偶聯(lián)的核酸適配體-殼聚糖-氟尿嘧啶（AP-（CS-FUA））。利用CS-FUA自身的豐富氨基攜帶正電荷,與修飾了羧基（-COOH）的AP的負(fù)電荷進(jìn)... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 緒論
第2章 AP-(CS-FUA)與 (CS-FUA)/AP載藥體系的制備與理化特性表征
    2.1 主要材料與試劑
    2.2 主要儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 主要溶液與前藥的配制
        2.3.2 AP-(CS-FUA)的合成
        2.3.3 (CS-FUA)/AP的合成
        2.3.4 AP-(CS-FUA)和 (CS-FUA)/AP的粒徑與電位測定
        2.3.5 AP-(CS-FUA)和 (CS-FUA)/AP的載藥量測定
        2.3.6 AP-(CS-FUA)和 (CS-FUA)/AP內(nèi) AP的包封率測定
        2.3.7 AP-(CS-FUA)和 (CS-FUA)/AP的穩(wěn)定性研究
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        2.4.1 AP-(CS-FUA)和 (CS-FUA)/AP的粒徑和電位
        2.4.2 AP-(CS-FUA)和 (CS-FUA)/AP的載藥量
        2.4.3 AP-(CS-FUA)和 (CS-FUA)/AP中 AP的包封率
        2.4.4 AP-(CS-FUA)和 (CS-FUA)/AP的穩(wěn)定性
    2.5 小結(jié)
第3章 AP-(CS-FUA)和 (CS-FUA)/AP生物安全性評價(jià)
    3.1 主要材料與試劑
    3.2 主要儀器
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 主要試劑的配置
        3.3.2 MTT法檢測細(xì)胞存活率
        3.3.3 溶血性實(shí)驗(yàn)
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 AP-(CS-FUA)和 (CS-FUA)/AP對 L02 細(xì)胞的細(xì)胞毒性
        3.4.2 AP-(CS-FUA)和 (CS-FUA)/AP的溶血性
    3.5 小結(jié)
第4章 AP-(CS-FUA)和 (CS-FUA)/AP的體外抗腫瘤作用和靶向性研究
    4.1 主要材料與試劑
    4.2 主要儀器
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 MTT法檢測細(xì)胞存活率
        4.3.2 流式細(xì)胞術(shù)測定攝取情況
        4.3.3 熒光倒置顯微鏡觀察藥物攝取
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 MTT法檢測細(xì)胞存活率
        4.4.2 流式細(xì)胞術(shù)測定攝取情況
        4.4.3 熒光倒置顯微鏡檢測藥物攝取
    4.5 小結(jié)
第5章 AP-(CS-FUA)和 (CS-FUA)/AP體內(nèi)抗腫瘤作用與器官損傷研究
    5.1 主要材料與試劑
    5.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    5.3 實(shí)驗(yàn)方法
        5.3.1 體內(nèi)抗腫瘤作用研究
        5.3.2 體內(nèi)器官損傷研究
        5.3.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    5.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        5.4.1 體內(nèi)抗腫瘤作用研究
        5.4.2 體內(nèi)器官損傷研究
    5.5 小結(jié)
第6章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
作者攻讀學(xué)位期間的科研成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]一種結(jié)合SELEX與二代測序技術(shù)篩選RNA結(jié)合蛋白特異識別序列新方法的建立[J]. 張璐,徐晉暤,麻錦彪.  生物工程學(xué)報(bào). 2016(07)



本文編號：3627827