目的:探討艾塞那肽（exendin-4, EX-4）對人牙周膜干細(xì)胞（periodontal ligament stem cells, PDLSCs）增殖、遷移和成骨分化的影響。方法:通過有限稀釋法體外分離、培養(yǎng)PDLSCs。通過克隆形成實(shí)驗(yàn),定向誘導(dǎo)成骨、成脂分化,鑒定其干細(xì)胞特性。通過免疫熒光染色檢測PDLSCs表面EX-4受體GLP-1R（glucagon-like peptide-1 receptor）的表達(dá)。利用5、10、20或50 nmol/L EX-4體外刺激PDLSCs,通過CCK-8、Transwell實(shí)驗(yàn)和堿性磷酸酶（alkaline phosphatase, ALP）活性測試,研究不同濃度EX-4對PDLSCs增殖、遷移和成骨分化的影響。應(yīng)用實(shí)時定量PCR檢測成骨相關(guān)基因ALP、runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2（runt related transcription factor 2, Runx2）和骨鈣素（osteocalcin, OCN）的表達(dá)。采用Graphpad Prims 6.0軟件包對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果:成功分離、培養(yǎng)PDLSCs。GLP-1R在PDLSCs... 

【文章來源】：上海口腔醫(yī)學(xué). 2020,29(03)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 試劑和儀器
        1.1.1 主要試劑
        1.1.2 主要儀器
    1.2 樣本收集與PDLSCs分離、培養(yǎng)
        1.2.1 樣本收集與倫理審批
        1.2.2 PDLSCs分離、培養(yǎng)
    1.3 PDLSCs克隆形成實(shí)驗(yàn)與定向誘導(dǎo)成骨、成脂分化
    1.4 PDLSCs表面GLP-1R表達(dá)的檢測
    1.5 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
    1.6 細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)
    1.7 ALP活性測試
    1.8 PDLSCs總RNA提取及實(shí)時定量PCR檢測成骨相關(guān)基因表達(dá)
    1.9 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 PDLSCs的分離、培養(yǎng)與鑒定
    2.2 PDLSCs表面GLP-1R陽性表達(dá)
    2.3 EX-4對PDLSCs增殖、遷移的影響
    2.4 EX-4顯著增加PDLSCs的ALP活性
    2.5 EX-4促進(jìn)PDLSCs成骨相關(guān)基因表達(dá)
3 討論



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