目的由于缺乏高效的純化和載藥方法,細(xì)胞外囊泡（extracellular vesicle,EV）在藥物遞送載體的應(yīng)用受到明顯限制。本研究在高效提取純化紅細(xì)胞膜的基礎(chǔ)上,制備并表征EV類似物人工紅細(xì)胞膜泡（artificial red blood cells membrane vesicle,ARBCMV）,評(píng)價(jià)其作為阿霉素遞送載體的可行性。方法本研究用低滲裂解與物理擠出方法制備ARBCMV,以人乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞來源EV為對(duì)照,通過透射電子顯微鏡和納米顆粒追蹤分析技術(shù)比較兩者形態(tài)、粒徑分布及合成效率,用熒光光譜技術(shù)分析載阿霉素ARBCMV的載藥量,在熒光顯微鏡下驗(yàn)證其與人乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞融合的可行性并探索其遞送阿霉素進(jìn)入細(xì)胞的能力。結(jié)果 ARBCMV和EV均為具有完整的膜性脂質(zhì)雙分子層的杯狀結(jié)構(gòu),粒徑峰值分別為（133.7±5.4）nm和（160.5±4.2）nm,ARBCMV粒徑相對(duì)更均一;ARBCMV合成快速且高效,不依賴超高速離心機(jī);載藥實(shí)驗(yàn)證明ARBCMV具有負(fù)載阿霉素的能力;且細(xì)胞試驗(yàn)證明ARBCMV可與乳腺癌細(xì)胞融合,并可將阿霉素成功遞入乳腺癌細(xì)胞... 

【文章來源】：實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志. 2020,36(15)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【部分圖文】：

ARBCMV制備過程

見表1。ARBCMV和EV的分離時(shí)間和提取量比較可知，提取EV需預(yù)先成功培養(yǎng)細(xì)胞，并超高速離心4 h，操作繁瑣且耗時(shí)達(dá)2～3 d，而ARBCMV制備僅需普通冷凍高速離心機(jī)和擠出器即可完成實(shí)驗(yàn)，時(shí)長(zhǎng)大約100 min。等量細(xì)胞可提取的MDA-MB-231 EV平均數(shù)量為2.04×1010個(gè)，ARBCMV平均數(shù)量為3.10×1010個(gè)，結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。因此，在相同的細(xì)胞數(shù)量情況下，可以提取相近的囊泡數(shù)量，但制備ARBCMV無需培養(yǎng)細(xì)胞，更加快速且高效，不依賴超高速離心機(jī)，對(duì)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備要求較低，因此更易于推廣應(yīng)用。2.3 ARBCMV與人乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞的融合

見圖3。ARBCMV經(jīng)過PKH-67膜染料染色后與細(xì)胞共孵育可使人乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞的細(xì)胞膜帶熒光，說明ARBCMV與人乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞成功融合，具有作為藥物載體并作用于癌細(xì)胞的潛力。2.4 載阿霉素ARBCMV的載藥量分析

【參考文獻(xiàn)】：
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