發(fā)布時間：2021-02-16 01:07

　　目的:對注射用胸腺法新中與胸腺法新主峰較難分離的雜質(zhì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定并測定7家企業(yè)樣品中雜質(zhì)的含量。方法:結(jié)合使用基質(zhì)輔助激光解析飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜（MALDI-TOF/TOF MS）和二維-超高效液相色譜-四級桿飛行時間質(zhì)譜（2D-UPLC-Q-TOF）測定雜質(zhì)分子量并對結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定,同時采用與合成的雜質(zhì)對照品通過保留時間比對進(jìn)行結(jié)構(gòu)確認(rèn),并且通過HPLC方法對雜質(zhì)含量進(jìn)行測定。結(jié)果:測得胸腺法新主峰前后5個雜質(zhì)分別為3個異構(gòu)體雜質(zhì)（[D-Ser1]-胸腺法新、[D-Asp15]-胸腺法新、[D-Asn28]-胸腺法新）、1個缺失肽雜質(zhì)（[Des-Ala3]-胸腺法新）和1個水解雜質(zhì)（[Asp28]-胸腺法新）,雜質(zhì)含量為0.1%～1.0%。結(jié)論:使用兩種質(zhì)譜技術(shù)對雜質(zhì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定,結(jié)果可靠,本研究為完善質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)以及制定合理的雜質(zhì)限度提供了依據(jù)。 

【文章來源】：中國藥師. 2020,23(07)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

雜質(zhì)Ⅱ的一級與二級質(zhì)譜圖

有關(guān)物質(zhì)典型圖譜

使用質(zhì)譜檢測時得到的是單同位素峰的相對分子質(zhì)量，根據(jù)計算雜質(zhì)峰Ⅰ的單同位素相對分子質(zhì)量約為3 036.5Da。胸腺法新的平均相對分子質(zhì)量為3 108.2Da，而其單同位素峰的相對分子質(zhì)量為3 106.5Da，雜質(zhì)峰Ⅰ與胸腺法新相比相對分子質(zhì)量少約71Da，推測肽序在偶聯(lián)過程少連接1個丙氨酸(殘基理論相對分子質(zhì)量71.07)。在胸腺法新序列中共有3個丙氨酸，且其中2個是相連的，故可能的肽序有2種:肽序1為SDAVDTSSEITTKDLKEKKEVVEEAEN，肽序2為SDAAVDTSSEITTKDLKEKKEVVEEEN。對其進(jìn)行二級質(zhì)譜圖采集，并將譜圖與肽序1和肽序2產(chǎn)生的理論碎片離子進(jìn)行比對。根據(jù)匹配結(jié)果，與肽序1的匹配度較高，可匹配上21個氨基酸，由此推測雜質(zhì)Ⅰ的結(jié)構(gòu)為SDAVDTSSEITT-KDLKEKKEVVEEAEN，即胸腺法新在3位或4位缺失一個丙氨酸。在質(zhì)譜圖中除主峰外，還存在一些其他雜峰，根據(jù)其分子量推測，質(zhì)荷比約為2 994.6的峰應(yīng)為雜質(zhì)Ⅰ脫去乙�；a(chǎn)生的峰;質(zhì)荷比約為3 107.6的峰應(yīng)為胸腺法新或其同分異構(gòu)體的峰，這可能是由于在該色譜條件下收集的餾分峰里含有與胸腺法新相對分子質(zhì)量一致的同分異構(gòu)體峰所致;質(zhì)荷比約為3 089.7的峰為3 107.6峰脫去一分子水產(chǎn)生的峰;質(zhì)荷比約為3 048.5的峰應(yīng)該是3 107.6峰脫去一分子水和乙�；a(chǎn)生的峰。因此，雜質(zhì)Ⅰ中主要為3位或4位缺失一個丙氨酸的胸腺法新，并含有一定量胸腺法新的同分異構(gòu)體。圖3 雜質(zhì)Ⅱ的一級與二級質(zhì)譜圖

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]胸腺肽α1的功能研究進(jìn)展[J]. 鄭立運(yùn).  中國處方藥. 2014(07)
[2]HPLC法對胸腺法新及其制劑中雜質(zhì)檢查[J]. 程磊,唐洋明,殷果,畢開順,陳曉輝,王鐵杰.  藥物分析雜志. 2013(11)
[3]胸腺肽α1的特征與功能綜述[J]. 高德民,王鳳山.  中國生化藥物雜志. 2007(02)

碩士論文
[1]胸腺法新的質(zhì)量分析研究[D]. 田妮娜.蘭州大學(xué) 2015



本文編號：3035863